Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:00 min. • July 8th, 2025
Tome una placa de pocillos múltiples con células madre mesenquimales, o MSC, en pocillos seleccionados.
Introducir macrófagos e incubar, facilitando la interacción MSC-macrófagos en los pocillos de cocultivo.
Agregue zimosano, un componente de la pared celular de levadura, conjugado con un fluoróforo sensible al pH en todos los pocillos.
Los receptores carroñeros de macrófagos se unen al zimosano, desencadenando su engullimiento dentro de un fagosoma, que se fusiona con un lisosoma para formar un fagolisosoma.
Un pH ácido dentro del fagolisosoma hace que el fluoróforo emita fluorescencia.
En los pozos de cocultivo, las MSC proyectan nanotubos de túnel, o TNT, extensiones citoplasmáticas que se unen a los macrófagos. Las mitocondrias de MSC viajan a través del TNT para ingresar a los macrófagos, aumentando el número total de mitocondrias funcionales.
Un número mitocondrial elevado aumenta la producción de trifosfato de adenosina o ATP, que alimenta el requerimiento de energía para un aumento de la fagocitosis.
Registre la intensidad de fluorescencia a lo largo del tiempo de los zimosanos conjugados con fluoróforos internalizados.
El cocultivo muestra una mayor fluorescencia en compa
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