¿Qué son las bolas neuronales?

Las bolas neuronales son agregados tridimensionales formados por células progenitoras neuronales durante el cultivo.

¿Por qué usar gotas colgantes para el cultivo celular?

Las gotas colgantes crean un microambiente que promueve la agregación celular y minimiza la evaporación.

¿Cuál es la densidad celular óptima para formar bolas neuronales?

Se recomienda una densidad celular de 1 millón de células por mililitro para una agregación óptima.

¿Cuánto tiempo deben incubarse las células?

Las células deben incubarse durante tres días a 37 grados Celsius con 5% de CO2.

¿Qué medio se utiliza para cultivar las células?

Se utiliza medio Neurobasal suplementado con nutrientes esenciales para el cultivo celular.

¿Cuál es la importancia de usar células progenitoras neuronales embrionarias de ratón?

Estas células son vitales para estudiar el desarrollo y la función neuronal en un entorno controlado.

Desarrollo de bolas de neuronas mediante una técnica de cultivo de gota colgante

JoVE Encyclopedia of Experiments

Neuroscience

0 views • 1:46 min • July 8th, 2025

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Comience con una suspensión unicelular de células progenitoras neuronales embrionarias de ratón en un medio neurobasal.

El medio contiene nutrientes esenciales para mantener la viabilidad celular.

Dispense pequeñas gotas de esta suspensión celular en la tapa de una placa de cultivo no adhesiva, asegurándose de que estén separadas.

Invierta la tapa, lo que dará como resultado la formación de gotas colgantes.

Coloque la tapa sobre el plato que contiene un tampón para establecer un ambiente húmedo que evite la evaporación e incubación del medio.

Dentro de las gotas colgantes, la tensión superficial del líquido mantiene la forma de la gota.

Este confinamiento de forma restringe las células a un espacio limitado sin extenderse.

Además, las fuerzas gravitacionales dentro de las gotas dirigen las células hacia la región inferior.

A medida que las células progenitoras neuronales entran en contacto más cercano, se agregan espontáneamente para formar una estructura tridimensional conocida como bola neuronal.

Para preparar bolas neuronales, ajuste la densidad celular en esta suspensión celular a 1 millón de células por mililitro utilizando medio NGB. Agregue 7 mililitros de PBS a la parte inferior de las placas de cultivo. Cultive las neuronas corticales como gotas colgantes de 10 microlitros que contienen 10,000 células por gota dentro de los párpados superiores de placas de cultivo de 10 centímetros. Mantenga los platos en una incubadora durante tres días a 37 grados centígrados con 5% de CO₂ en condiciones húmedas para permitir la formación de bolas neuronales.