Desarrollo de bolas de neuronas mediante una técnica de cultivo de gota colgante
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 1:46 min. • July 8th, 2025
Comience con una suspensión unicelular de células progenitoras neuronales embrionarias de ratón en un medio neurobasal.
El medio contiene nutrientes esenciales para mantener la viabilidad celular.
Dispense pequeñas gotas de esta suspensión celular en la tapa de una placa de cultivo no adhesiva, asegurándose de que estén separadas.
Invierta la tapa, lo que dará como resultado la formación de gotas colgantes.
Coloque la tapa sobre el plato que contiene un tampón para establecer un ambiente húmedo que evite la evaporación e incubación del medio.
Dentro de las gotas colgantes, la tensión superficial del líquido mantiene la forma de la gota.
Este confinamiento de forma restringe las células a un espacio limitado sin extenderse.
Además, las fuerzas gravitacionales dentro de las gotas dirigen las células hacia la región inferior.
A medida que las células progenitoras neuronales entran en contacto más cercano, se agregan espontáneamente para formar una estructura tridimensional conocida como bola neuronal.
Para preparar bolas neuronales, ajuste la densidad celular en esta suspensión celular a 1 millón de células por mililitro utilizando medio NGB. Agregue 7 mililitros de PBS a la parte inf
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