Aislamiento de múltiples tipos de células del cerebro de un ratón mediante homogeneización mecánica
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:27 min. • July 8th, 2025
Comience colocando los componentes del molinillo de tejidos en hielo. Este dispositivo incluye un mortero y dos morteros de diferentes diámetros.
Vierta un tampón de sal fría en el mortero y luego agregue tejido cerebral de ratón.
El tampón mantiene el equilibrio osmótico, preservando la estructura y función celular.
Muela el tejido con múltiples movimientos suaves utilizando el mortero de menor diámetro, que corta mecánicamente el tejido en trozos más pequeños.
A continuación, acariciar con el mortero de mayor diámetro, facilitando una mayor descomposición del tejido en las células que lo componen.
Transfiera la mezcla a un tubo y centrifuge.
Retire el sobrenadante.
Agregue un tampón de sal fría y un vórtice para romper los grumos celulares y la mielina.
A continuación, agregue un medio de gradiente de densidad y centrifuge.
Debido a las diferencias en la forma y la masa, las células se asentarán en la capa inferior, mientras que los desechos y la mielina se acumularán en la capa superior.
Deseche el sobrenadante.
Agregue una solución adecuada para obtener una suspensión de múltiples celdas para su uso posterior.
Para la homogeneización de tejidos, agregue 3 mililitros de HBSS pre
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos