Caracterización de células madre mesenquimales modificadas genéticamente para aplicaciones neuroterapéuticas
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:23 min. • August 7th, 2025
Comience con células madre mesenquimales de ratón transgénicas, células multipotentes derivadas de la médula ósea.
Las células están diseñadas para expresar GFP y factores neurotróficos terapéuticos que apoyan el crecimiento y la supervivencia neuronal.
Lave las células con tampón y fíjelas para preservar la integridad celular.
Lavar nuevamente con tampón, luego agregar una solución para permeabilizar las membranas celulares y nucleares y bloquear los sitios de unión no específicos.
Introducir anticuerpos primarios dirigidos a una proteína marcadora de proliferación celular expresada exclusivamente en el núcleo de las células en división.
Lavar con tampón para eliminar los anticuerpos no unidos.
Agregue anticuerpos secundarios conjugados con fluoróforo dirigidos a los anticuerpos primarios y un colorante de unión al ADN para contrarrestar la tinción de los núcleos.
Lavar con tampón para eliminar los reactivos no unidos.
Cargue la placa en el sistema de cribado de alto contenido y capture imágenes para detectar señales fluorescentes.
La expresión del marcador de proliferación celular indica división celular activa, lo que sugiere la idoneidad de las células transgénicas para aplicaciones neu
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