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DOI: 10.3791/52643-v
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Aquí, se describe un método que permite la preparación rápida, eficiente y económica de geles de poliacrilamida en un formato de placa multipocillo. El método no requiere ningún equipo especializado y podría ser fácilmente adoptado por cualquier laboratorio de investigación. Sería particularmente útil en investigaciones centradas en la comprensión de las respuestas celulares dependientes de la rigidez.
El objetivo general de este procedimiento es permitir una preparación rápida, eficiente y económica de geles de poliacrilamida en un formato de placa de pocillos múltiples. Esto se logra intercalando primero, la solución precursora de gel entre una placa de vidrio con recubrimiento hidrofóbico y un soporte de plástico flexible adhesivo de acrilamida. El segundo paso es despegar el gel de la placa de vidrio, que se ha adherido covalentemente al soporte de plástico flexible tras la polimerización y dejarlo secar.
A continuación, el gel seco y el soporte de plástico flexible subyacente se cortan en las formas deseadas y se pegan con el lado del plástico hacia abajo a los fondos de los pocillos de una placa de pocillos múltiples o cualquier otro recipiente de cultivo celular. El paso final es recubrir los geles de poliacrilamida ensamblados en placas de varios pocillos con un recubrimiento adhesivo celular, como una monocapa de colágeno tipo uno. En última instancia, la microscopía, así como otras técnicas de caracterización celular, se utilizan para observar el efecto del sustrato subyacente de poliacrilamida.
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