Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:24 min. • July 8th, 2025
Tome una placa de pocillos múltiples con monocapas de células endoteliales humanas adherentes en hidrogeles de poliacrilamida recubiertos de colágeno de rigidez variable.
Las células de los hidrogeles más rígidos experimentan una reorganización citoesquelética significativa, lo que aumenta la tensión intracelular, en comparación con los hidrogeles más blandos.
Lave las células con medios y agregue Listeria monocytogenes diseñado, que expresa una proteína fluorescente bajo el promotor de la proteína inductora de ensamblaje de actina (ActA).
Centrífuga para facilitar el contacto célula-bacteria. Incubar para mediar la endocitosis bacteriana.
Lavar con medios. Tratar con gentamicina para eliminar las bacterias no internalizadas. Incubar.
Las bacterias internalizadas liberan toxinas formadoras de poros, alterando las membranas fagosomal. Las bacterias citosólicas regulan al alza ActA y la expresión de proteínas fluorescentes, marcando bacterias intracelulares.
Las proteínas ActA inducen la polimerización de la actina, formando una cola de cometa de actina que impulsa a las bacterias hacia adelante, causando la internalización por parte de las células vecinas y promoviendo la diseminaci
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos