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Cortical de actina de flujo en células T cuantificados por espacio-temporal de correlación Imagen...
Cortical de actina de flujo en células T cuantificados por espacio-temporal de correlación Imagen...
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Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Cortical Actin Flow in T Cells Quantified by Spatio-temporal Image Correlation Spectroscopy of Structured Illumination Microscopy Data

Cortical de actina de flujo en células T cuantificados por espacio-temporal de correlación Imagen Espectroscopia de Estructurado Iluminación Microscopía de datos

Full Text
10,203 Views
09:09 min
December 17, 2015

DOI: 10.3791/53749-v

George Ashdown1, Elvis Pandžić3, Andrew Cope2, Paul Wiseman4, Dylan Owen1

1Department of Physics and Randall Division of Cell and Molecular Biophysics,King's College London, 2Academic Department of Rheumatology, Centre for Molecular and Cellular Biology of Inflammation, Division of Immunology, Infection and Inflammatory Disease,King's College London, 3ARC Centre for Advanced Molecular Imaging, Australian Centre for NanoMedicine,University of New South Wales Australia, 4Departments of Chemistry and Physic,McGill University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Para investigar las velocidades de flujo y la direccionalidad de la actina filamentosa en la sinapsis inmunológica de las células T, se combinan imágenes de superresolución de células vivas con fluorescencia de reflexión interna total y se cuantifican con espectroscopía de correlación de imágenes espacio-temporales.

El objetivo general de este experimento es cuantificar la dinámica de la actina cortical mediante espectroscopia de correlación de imágenes después de la adquisición por reflexión interna total, imágenes de iluminación estructurada o simulación de césped. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo biofísico, como qué papel tiene el flujo cortical de actina en la regulación de las interacciones en la sinapsis inmunológica. La principal ventaja de la técnica es que combina la resolución a escala nanométrica con la compatibilidad con el estilo de vida, lo que permite observar y analizar procesos a menor escala en comparación con las técnicas convencionales de microscopía de instancia.

El encargado de demostrar esta técnica será George Ashdown, un estudiante de doctorado de mi laboratorio. Para una muestra de prueba, agregue cinco microlitros de una solución madre de microesferas fluorescentes de subdifracción de 100 nanómetros de diámetro a la superficie de un cubreobjetos nuevo sin recubrimiento. A continuación, extienda la solución de microesferas sobre el cubreobjetos con la punta de una pipeta y deje que se seque.

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