İskemi/Reperfüzyon Porsin Modelinde Omurilik Mikroperfüzyonunun Gerçek Zamanlı Değerlendirilmesi

Protokolümüz, omurilik mikrosirkülasyonunun gerçek zamanlı değerlendirmesi için tekrarlanabilir bir yöntem sağlar. Omurilik mikrosirkülasyonu ve iskemi reperfüzyon durumları ile ilgili terapötik yaklaşımları değerlendirme yeteneği sunar. Tekniğimizin öğrenilmesi kolaydır, minimal invazivdir ve bize büyük bir hayvan modelinde beyin omurilik sıvısı basıncı ve makrohemodinamik ile paralel olarak omurilik mikroperfüzyonunu değerlendirme fırsatı sunar.

Prosedürü gösterenler, anesteziyoloji uzmanları ve laboratuvarımızın bilimsel üyeleri olan Dr.Christoph Behem ve Dr.Till Friedheim olacaktır. Ek göstericiler anesteziyoloji asistanı Michael Graessler olacak. Üç aylık 40 kilogramlık bir domuzda uygun bir sedasyon seviyesini onayladıktan sonra, hayvanı doğru yanal pozisyona getirin ve omurlar arasındaki boşluğu genişletmek için hayvanın sırtını esnetin.

Spinöz süreçlerin ve vertebral kemerlerin hazırlanması için paravertebral alanı cerrahi olarak açığa çıkarın ve iki vertebral kemer arasında torasik vertebra 13 ila 14 veya bel omuru bir ila iki seviyesinde omuriliğe vasküler 14 gauge periferik ven kateter paramedianı yerleştirin. İğneyi lazer Doppler iğne probu ile değiştirin ve sinyal kalitesini test etmek için probu belirlenen sert ve yazılıma bağlayın. Orta derecede titreşimli kararlı bir sinyal gözlenmelidir.

Probu dikişlerle dikkatlice sabitleyin ve probun yerinden çıkmasını veya bükülmesini önlemek için kaydırma kullanın. Beyin omurilik basıncını ölçmek ve kontrol etmek için beyin omurilik sıvısı drenajının perkütan yerleştirilmesi için, lomber dört ila beş veya L5 ila 6 seviyesini belirleyin. Giriş iğnesi ile cildi ve deri altı boşluğunu delin ve kakma iğnesini çıkarın.

Giriş iğnesine tuzlu su dolu bir şırınga yerleştirin ve iğneyi epidural boşluğa dikkatlice sokmak için sabit basınç uygulayın. Doğru bir epidural yerleşimi gösteren bir direnç kaybı hissedildiğinde, inley iğnesini yerleştirin ve iğneyi intratekal boşluğa iki ila üç milimetre ilerletin. Drenajı 20 santimetre derinliğe kadar yerleştirin.

Bir Luer kilit adaptörü takın ve likörü dikkatli bir şekilde aspire ederek konumu doğrulayın. Daha sonra drenajı dikişlerle dikkatlice sabitleyin ve drenajı beyin omurilik sıvısı drenaj sistemine bağlayın. Ardından, kafatasını sol kulağın arkasına maruz bırakın ve kafatasının matkap deliği trepanasyonunu dikkatlice gerçekleştirmek için altı milimetrelik bir matkap eki kullanın.

İkinci bir lazer Doppler probunu doğrudan beyne yerleştirin ve probu dikkatlice yerine sabitlemek için dikişler kullanın. Sinyal kalitesini test etmek için probu sabit ve yazılıma bağlayın. Orta derecede pulsatiliteye sahip kararlı bir sinyal gözlenmelidir.

Tüm probların bağlantısını kesin ve dört ila beş asistanın yardımıyla, probları rahatsız etmemeye dikkat ederek hayvanı dolgu kullanarak dikkatlice sırtüstü pozisyona getirin. Probları yeniden bağlayın ve sinyal kalitesini kontrol edin. Ardından, 10 milimetre cıva hedef basıncı ve saatte 20 mililitre drenaj hacmi ile sürekli beyin omurilik sıvısı drenajına başlayın.

Mini bir laparotomi yaptıktan sonra, solunan oksijen fraksiyonunu bire yükseltin ve intravenöz olarak kilogram pankuronyum başına 0.1 miligram uygulayın. Sternumu çevreleyen dokudan nazikçe inceleyin, ardından yaralanmaları önlemek için retrosternal kompres yerleştirme işlemini gerçekleştirin. Ventilasyonu durdurduktan sonra, kemiği salınımlı bir testere ile bölün ve solunan oksijenin 0,3'e düşürülmüş bir fraksiyonu ile ventilasyonu yeniden başlatın.

Kanamayı azaltmak ve sternumu kemik mumu ile kapatmak için elektrokoter kullanın. Sol akciğerin tabanını dikkatlice hareket ettirin ve cerrahi maruziyeti kolaylaştırmak için diyaframın sol lateral kısmını bölün. İnen aort proksimal kısmını çölyak gövdesine maruz bırakmak için sol akciğeri nazikçe geri çekin ve çevredeki dokuyu bölün.

Uygun maruziyeti sağlamak için inen aortun etrafına bir Overholt yerleştirin ve inen torasik aortun etrafına bir akış probu takın, ardından iyi kalitede bir sinyalin varlığını onaylayın ve aort çapraz klempleme alanını işaretlemek için akış probuna inen aort distalinin etrafına bir damar halkası takın. Bir temel ölçümün elde edilmesinden sonra, adım başına beş dakikalık bir süre boyunca kilogram hidroksietil nişasta kolloidi başına yedi mililitrelik ardışık hacim yükleme adımlarını uygulayın. Kardiyak debideki artış %15'ten az olana kadar her adım arasında beş dakikalık dengelemeHemodinamik optimizasyonun tamamlanmasından sonra ölçümleri tekrarlayın.

Daha sonra, toplam 48 dakika boyunca bir, iki, beş, 10 ve 30 dakikalık aralıklarla iskemi reperfüzyonunu indüklemek için suprakeliak aort üzerinde önceden işaretlenmiş alana bir aort klempi yerleştirin. Her aralıktan sonra aort çapraz klemplemesine devam edin. En fazla beş dakika sonra veya femoral arter akışının normalleşmesinden sonra, 100 mililitre cıva ortalama arter basıncından daha fazla kan basıncı artışını önlemek için inferior vena kavanın manuel giriş tıkanıklığını gerçekleştirin ve ölçümleri tekrarlayın 30 dakikalık klempleme aralığının sonunda reperfüzyondan önce.

Ölçümler elde edildiğinde, hemodinamik stabiliteyi sağlamak için kelepçeyi kademeli olarak açın ve kilogram hidroksietil nişasta kolloidleri başına yedi mililitre ve stabilizasyon için 10 ila 20 mikrogram norepinefrin ve / veya epinefrin ek bolus enjeksiyonları uygulayın. Normokapniyi gerektiği gibi sağlamak için solunum hızını ayarlayın. Bir saat sonra ölçümleri tekrarlayın.

Reperfüzyon sonrası ölçümleri aldıktan sonra, hacim yüklemesini gösterildiği gibi tekrarlayın ve başka bir ölçüm seti elde edin. İskemi reperfüzyonunun indüksiyonundan 4-1 / 2 saat sonra, son ölçüm setini elde edin. Burada, iskemi indüksiyonu için aort çapraz klempleme sırasında ve ayrıca unklemp ve reperfüzyon sırasında serebral mikrodolaşım ve makrohemodinamik kayıtlarla birlikte gerçek zamanlı omurilik mikrodolaşım kayıtlarının örnekleri görülebilir.

İnen aort akımının bozulmasını, çıkan aorttaki basınç artarken omurilik akışında belirgin bir azalma izledi. Reperfüzyon zıt etkilere yol açtı. Makro ve mikro dolaşım parametrelerinin istatistiksel analizi, iskemi sırasında omurilik akışında belirgin bir azalma olduğunu göstermektedir.

Buna karşılık, tahmini marjinal ortalamalar ve güven aralıkları ile gösterildiği gibi iskemi sırasında serebral akı belirgin şekilde artmıştır. Buna kalp atış hızı, arteriyel basınç ve sistemik vasküler dirençte bir artış eşlik ederken, kardiyak debi ve inme hacmi azaldı. Floresan mikroküre analizi, alt omurilikte omurilik mikrodolaşım kan akışında belirgin bir azalma olduğunu ortaya koyarken, üst omurilikte önemli bir değişiklik gözlenmedi.

Reperfüzyon zıt etkilere yol açtı. Protokolün sonunda kardiyak debi, inme hacmi ve arteriyel basınçta daha fazla azalma olmasına rağmen, omurilik akısı ve omurilik mikrodolaşım kan akımı stabildi. Omurilik iğne probunun yerleştirilmesi, anatomi hakkında derin bilgi gerektirir.

Ek olarak, probun kullanımında çok yüksek teknik becerilere ihtiyacınız vardır. Metodolojiyi etkileyebilecek omurilik yaralanmalarını önlemek için birden fazla girişimden kaçınılmalıdır.