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DOI: 10.3791/64212-v
Linlin Zhang1,2, Mengjia Liu1,2, Meng Zhang1,2, Junhong Ai1,2, Jiao Tian1,2, Ran Wang1,2, Zhengde Xie1,2
1Beijing Key Laboratory of Pediatric Respiratory Infectious Diseases, Key Laboratory of Major Diseases in Children, Ministry of Education, National Clinical Research Center for Respiratory Diseases, Laboratory of Infection and Virology, Beijing Pediatric Research Institute, Beijing Children's Hospital,Capital Medical University, National Center for Children's Health, 2Research Unit of Critical Infection in Children, 2019RU016,Chinese Academy of Medical Sciences
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Describimos un método que combina perlas inmunomagnéticas y clasificación celular activada por fluorescencia para aislar y analizar subpoblaciones de células inmunes definidas de células mononucleares de sangre periférica (monocitos, células T CD4 +, células T CD8 +, células B y células asesinas naturales). Usando este método, las células magnéticas y marcadas con fluorescencia pueden ser purificadas y analizadas.
Este método permitirá la caracterización de diferentes células inmunes en los mismos estados de enfermedad de individuos con MI, lo que ampliará nuestra comprensión del mecanismo de la infección por EBV. Demostrando el procedimiento estará Linlin Zhang, un médico de nuestro laboratorio. Para comenzar, tome los PBMC aislados previamente en un tubo de microcentrífuga de 1.5 mililitros, y gírelos a 300 G durante 10 minutos a temperatura ambiente.
Deseche el sobrenadante y vuelva a suspender las células con 80 microlitros del tampón preparado. A continuación, agregue 20 microlitros de microperlas CD 14 a la suspensión celular, mezcle bien con pipeteo e incube el tubo durante 15 minutos en hielo. Luego lave las PBMC con un mililitro de tampón y centrifugar a 300 G durante 10 minutos a temperatura ambiente.
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