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Generación y análisis de imágenes histológicas de alto parámetro con citometría de histoflujo
Generación y análisis de imágenes histológicas de alto parámetro con citometría de histoflujo
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JoVE Journal Neuroscience
Generating and Analyzing High-Parameter Histology Images with Histoflow Cytometry

Generación y análisis de imágenes histológicas de alto parámetro con citometría de histoflujo

Full Text
703 Views
05:22 min
June 21, 2024

DOI: 10.3791/66889-v

Rajiv W. Jain1,2, David A. Elliott1, V. Wee Yong1,2

1Hotchkiss Brain Institute,University of Calgary, 2Department of Clinical Neurosciences,University of Calgary

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aquí se describe un método que se puede utilizar para obtener imágenes de cinco o más parámetros fluorescentes mediante microscopía inmunofluorescente. Se describe una línea de análisis para extraer células individuales de estas imágenes y realizar análisis de células individuales a través de estrategias de compuerta similares a la citometría de flujo, que pueden identificar subconjuntos de células en secciones de tejido.

Nuestro objetivo general es estudiar cómo las células del sistema inmunitario y las células gliales del sistema nervioso central contribuyen al desarrollo y la progresión de trastornos neurológicos como la esclerosis múltiple. La microscopía inmunofluorescente es una técnica estándar y ampliamente utilizada en todas las disciplinas biológicas y es esencial para la investigación en neurociencia e inmunología. Uno de los principales problemas que aquejan a los investigadores es que la microscopía inmunofluorescente suele estar limitada en el número de sondas que se pueden obtener a la vez debido a las limitaciones de los microscopios convencionales.

En este protocolo, describimos un método para expandir el número de sondas que muchos microscopios pueden obtener imágenes a la vez, y proporcionamos una canalización de análisis para procesar imágenes densas en información. La ventaja de este protocolo es que se puede adaptar a muchos microscopios ampliamente disponibles y es fácil de ejecutar, lo que haría que el análisis histológico multiplexado estuviera disponible para un mayor número de laboratorios.

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Palabras clave: Histología Citometría de histoflujo Diversidad de células inmunitarias Sistema nervioso central Citometría de flujo Parámetros fluorescentes Desmezcla espectral Imágenes de alta parámetro Análisis de células individuales Perfil celular Entorno tisular

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