Summary
تشخيص تفاضلية في تقويم مفاصل مؤلمة أمر حاسم لنجاح العلاج. ويتم بشكل روتيني التطلع المشترك تأهيلي. متعدد تفاعل البوليميراز المتسلسل aspirate المشتركة والسائل سونيكيشن، يرد أداة مجدية للكشف عن مسببات المرض السريع من هذه العينات.
Abstract
في مرضى العظام، الإصابات المرتبطة بالجسم الأجنبي، خاصة بيريبروسثيتيك العدوى المشتركة (بجيس)، مضاعفات مدمرة لتقويم مفاصل. العدوى يتطلب العلاج المعقدة، قد يؤدي إلى تكاليف كبيرة منذ فترة طويلة بالمستشفى والأسباب. يمكن أن تكون عدة تنقيحات الجراحية اللازمة مع خسارة في الوظيفة، وكذلك في هؤلاء المرضى، كما هو الحال في نوعية الحياة.
التشخيص قبل الجراحة روتينية تشمل فحص الدم لبروتين سي التفاعلي (CRP) وغيرها من المؤشرات الحيوية، فضلا عن تحليل aspirate المشتركة لعدد الخلايا، والتمايز، والثقافة. عينات الموضعية لعلم الأنسجة وعلم الأحياء الدقيقة هي أيضا الإجراءات القياسية. الفحص الميكروبيولوجي يزرع إزالتها مع سونيكيشن، بالاقتران مع تنفيذ تقنيات البيولوجيا الجزيئية في علم الأحياء المجهرية، تمثل اثنين من رواية التقنيات المستخدمة حاليا لتعزيز التشخيص التفاضلي كمديرا.
نحن الحاضرين هنا الإجراء تدريجي لتحليل أسبيراتي المشتركة والسائل سونيكاتيون، واستخدام نظام تفاعل المتسلسل (PCR) على أساس خرطوشة بوليميريز متعدد. تم مطابقة نتائج ضد الثقافات التقليدية وتوافق المعايير كمديرا. الثقافات التقليدية الميكروبيولوجية من خزعات الأنسجة، المشترك أسبيراتي والسائل sonication أظهرت حساسية من 66.7 في المائة و 66.7% و 88.9%، على التوالي، وخصوصية 82.3% و 54.6 في المائة و 61.5 في المائة، على التوالي. بكر التشخيصية للسائل sonication والسوائل المشترك وأظهرت حساسية 50.0 في المائة و 55.6%، على التوالي، وكلاهما خصوصية 100.0%. وكان كلا تشخيصات PCR جنبا إلى جنب حساسية من 66.7 في المائة وخصوصية 100.0%. ولذلك يقدم PCR متعدد أداة تشخيص سريع مع حساسية معتدلة ولكن خصوصية عالية في تشخيص كمديرا.
Introduction
العمليات المؤلمة تحدي تشخيصي في جراحة العظام. بعد تخفيف العقيم، كمديرا ومعظم السبب الثاني لفشل عملية الزرع، ويعرض من مضاعفات مدمرة بعد جراحة تقويم مفاصل. كمديرا يصعب علاجه وصعوبة في التشخيص. غاب عن تشخيص نتيجة إرادة كمديرا المحتمل في الإصابة المتكررة، مع المراضة الرئيسية، وفقدان وظيفة، وفقدان نوعية الحياة. ولذلك، ينبغي استبعاد العدوى في جميع المرضى عرضه مع تقويم مفاصل مؤلمة، قبل أن يتم الشروع في اتخاذ تدابير علاجية.
التاريخ المرضى، والفحص السريري، فحص الدم للبروتين وعدد خلايا الدم البيضاء، فضلا عن التصوير الإشعاعي أو سزينتيجرافي المشتركة للمتضررين يشكل التشخيص الأساسية1. روتين قبل الجراحة ينبغي أن تشمل أيضا من تطلعات مشتركة تحت ظروف معقمة حيثما كان ذلك ممكناً. أسبيراتي المكتسبة من مادة قيمة للغاية في مزيد من التشخيص.
إلى جانب عدد الخلايا وتمايز الخلية في أسبيراتي المشتركة فحوصات راسخة2، قد تساعد الكشف عن البروتين المؤشرات الحيوية في تشخيص تفاضلية3،،من45. وتظل الثقافة التقليدية الميكروبيولوجية معيار الذهب في الكشف عن مسببات الأمراض. الأغشية الحيوية، التي تسببها الجراثيم إيجابية وسلبية الغرام، وتمسكا بزرع السطوح، عوامل رئيسية المسببة للأمراض في كمديرا. ولذلك، في عام 2007، تم تنفيذ الإجراء سونيكيشن في تشخيص الإصابة الخارجية المرتبطة بالجسم في جراحة العظام، الإخلال الأغشية الحيوية على إزالة يزرع للسماح بالكشف عن العوامل الممرضة. البكتيريا وبالتالي مأخوذة من شكلها يستريح بشكل نشط، مما يجعل الكشف عنها في الثقافة ممكناً مرة أخرى. وأظهرت سونيكيشن يزرع إزالة حساسية أعلى من الثقافات من الأنسجة العينات (78.5 في المائة مقابل 60.8 في المائة)6.
اختبار تضخيم الحمض النووي (NAT)، مثل PCR، انتقلت مؤخرا إلى النطاق من الأطباء والأطباء تشخيص كمديرا. لا سيما في المرضى الذين تلقوا العلاج بالمضادات الحيوية قبل الجراحة، اتضح أن بكر التشخيص مفيد في تحديد الكائنات المسببة7،،من89. في الآونة الأخيرة، تم الأخذ بنظام PCR متعدد جديدة، المصممة خصيصا للزرع والأنسجة والإصابات (ITI)،. هذا النظام القائم على خرطوشة يقدم مجموعة متنوعة من علامات الجينوم للتعرف على مسببات الأمراض وعلامات المقاومة للمضادات الحيوية. ضمن نطاق التطبيق بالعديد من المؤشرات (العدوى المشتركة الاصطناعية، التهابات موقع الجراحية، الأمراض المرتبطة بأمراض القلب، والإصابات المرتبطة بالقسطرة، التهابات القدم السكرية، الجلد العميقة والتهابات الأنسجة، زرع العدوى، وعدوى الجرح حرق)، وفريق واسع من المواد عينة يمكن أن تستخدم هذا الأسلوب (السائل sonication والسائل الزليلي ومسحات، الأنسجة، والصديد، aspirate/الإفرازات وبيوفيلم)10،،من1112.
أكبر ميزة لهذا الإجراء، بالمقارنة مع التقليدية علم الأحياء المجهرية، هو السرعة: يمكن التعرف على مسببات المرض المسبّب للمرض في غضون ساعة. بالإضافة إلى ذلك، يكشف هذا النظام بكر فريق واسع من علامات ترميز الجينات المقاومة، السماح ببدء العلاج بالمضادات الحيوية المستهدفة في وقت مبكر. مع مساعدة بكر، الجراحين قد يكون قادراً على التمييز بين المرضى المصابين وغير المصابين في مرحلة مبكرة جداً من الإجراءات التشخيصية11. نقدم هنا، البروتوكول لأداء هذا بكر متعدد، بسرعة تشخيص كمديرا من أسبيراتي المشتركة والسائل sonication.
Protocol
هذه الدراسة قد أقرته اللجنة الأخلاقيات المحلية (046/09, rev. 3). وتم الحصول على الموافقة المستنيرة وبيان خصوصية البيانات من جميع المرضى وشملت.
1. التطلع المشترك
ملاحظة: ينبغي إجراء هذا الإجراء في مسرح العمليات جراحية أو غرفة لتدخل مع ظروف معقمة قابلة للمقارنة. المساعدة من ممرضة أو مساعدة الطبيب مفيد ولكنه ليس إلزامياً.
- ضع المريض في موقف ضعيف على سرير فحص. ضمان خلو من الملابس المشتركة ذات الاهتمام. تقصير الشعر الكثيف أو الطويل الجسم باستخدام كليبرز الكهربائية. لا تقم بإزالة الشعر الجسم بشفرة حلاقة. ضع سريعاً في اتجاه الصورة إذا كان الورك أن يكون ثقب. في حالة يكون ثقب الركبة، مكان لفة ركبة تحت الركبة للمريض مثل أن تقع على الركبة في وضع القرفصاء قليلاً13.
- إعداد جدول بصك مع المعدات المعقمة التالية: مسحات معقمة وثني غطاء معقم فينيستراتيد، مشرط معقم المتاح، وأشار بليد الجراحية (نوع #11) والمحاقن المعقمة 10 مل مع القنية العقيمة (قياس 20، 80 مم). المنصوص عليها مطهر الجلد الكحولية، أنابيب جمع الدم وقارورة ثقافة دم لدى أطفال شكل منفصل.
- اللباس في ثوب الجراحية، وغطاء محرك السيارة وقناع، ووضع قفازات معقمة.
- دقة أغسل جلد المريض في موقع الثقب (مثلاً ريسيسوس فائقة14 لمنطقة المدخل الركبة وأنتيرولاتيرال الورك) مع مطهر جلد.
ملاحظة: مراعاة وقت التعرض المطلوبة للمطهرات المستخدمة (عادة 90 ثانية في الركبة، 120 s في الورك للمطهرات الكحولية). -
تغطية الموقع ثقب مع ثني غطاء معقم فينيستراتيد. تحديد موقع الثقب.
ملاحظة: للركبة، الموقع الصحيح 2 سم فوق القطب الرضفة العلوي والجانبي 2 سم على الأوجه الجانبية. الورك، العثور على العمود الفقري حرقفي متفوقة الأمامي ونقل كودالي حتى يتمشى مع الارتفاق العلوي. تأكد من أن الموقع الأفقي لشريان فخذي (حوالي 4 سم)، الذي يمكن أن يكون دائماً المزيد15.- جعل شق طعنه صغيرة عن طريق الجلد (3-4 مم واسعة وعميقة) مع شفرة المبضع أشار في موقع الثقب. لا يتم تطبيق المخدرات الموضعية كما أنها قد تسبب سلبيات كاذبة في ثقافة الميكروبيولوجية، نظراً لتأثيرها والاريثروسين.
-
إرفاق القنية بكشف اللوير من المحاقن. إدراج القنية من خلال شق طعنه. في العطلة متفوقة من الركبة، تهدف بزاوية 45° الظهرية والانسي، نحو العطلة أدناه القطب العلوي الرضفة، وإدراج الإبرة بعمق من حوالي 5 سم. أسبيراتي السائل مشتركة باستخلاص مكبس للمحاقن.
- باستخدام التوجيه سريعاً عندما ثقب مفصل الورك. أدخل الإبرة في موقع الثقب بهدف ميديالى بزاوية 60 درجة. في سريعاً، تأكد من أن يشير طرف الإبرة في الرقبة بدلة. تقدم القنية على عمق حوالي 8 سم (أعمق في المرضى الدهنية) بينما يسفط، حتى يتحقق السائل مشتركة. اضغط الإبرة في الموقف أثناء يسفط، لتجنب القشط السطح بدلة.
ملاحظة: اتصال طرف إبرة مع البدلة يضمن القصبة لتحديد المواقع. عادة، لا يزيد عن 5 مل سائل يمكن أن يستنشق نموذج مفصل الورك، سوف تسفر عن الركبة أكثر من 10 مل. - بعد إزالة القنية، تنطبق تضميد جرح عقيمة إلى شق طعنه. لمنع تكوين ورم دموي، تطبيق ضمادة في الساق مع ضغط طفيف.
- باستخدام التوجيه سريعاً عندما ثقب مفصل الورك. أدخل الإبرة في موقع الثقب بهدف ميديالى بزاوية 60 درجة. في سريعاً، تأكد من أن يشير طرف الإبرة في الرقبة بدلة. تقدم القنية على عمق حوالي 8 سم (أعمق في المرضى الدهنية) بينما يسفط، حتى يتحقق السائل مشتركة. اضغط الإبرة في الموقف أثناء يسفط، لتجنب القشط السطح بدلة.
-
نقل أسبيراتي المشتركة التي تم جمعها في حاويات العينات. ضمان العقيمة تقنيات العمل في جميع أنحاء.
- التطعيم من قارورة ثقافة الدم لدى الأطفال مع السائل مشتركة يستنشق، تطهير الغشاء لقارورة ثقافة الدم لدى الأطفال مع المطهرات الكحولية. وضع قنية طازجة على المحاقن وحقن 1 إلى 3 مل سائل المشتركة يستنشق في قارورة ثقافة الدم. مزيج من الانفعالات أو التناوب لطيف16.
- لإعداد العينة الأصلية aspirate المشتركة، إزالة القنية من المحاقن. فتح أنبوب جمع دم دون إضافات وحقن 1 مل أسبيراتي في هذا الأنبوب جمع. استبدال وربط الغطاء لتحليل PCR.
ملاحظة: شحن العينة إلى مختبر علم الأحياء الدقيقة دون تأخير لتحليل PCR. من نفس العينة، يمكن أيضا تعيين التقليدية الميكروبيولوجية الهوائية واللاهوائية الثقافات حتى17. - نقل 1 إلى 4 مل أسبيراتي المشتركة في أنبوب جمع دم تتضمن يدتا ل العد وتمايز الخلية2. السفينة عينة إلى مختبر الكيمياء حيوية دون أي تأخير.
2-بكر التشخيص
- تأكد من أن كافة الأجهزة الثلاثة (في ليساتور، المحلل، وقمرة القيادة؛ انظر الجدول للمواد)، والتي تعمل بشكل صحيح. تحدد جميع اللوازم المطلوبة لإجراء الاختبار (خرطوشة بكر، أنبوب مزيج رئيسي، وأنبوب عينة وعينه أنبوب غطاء، 0-200 ميليلتر ميكروبيبيتي، ونصائح ماصة معقمة) على مقاعد البدلاء العامل.
- تذويب الأنبوب مزيج الرئيسي قبل بدء هذا الإجراء، التي تحدد في درجة حرارة الغرفة. هي فعلا بريلابيليد جميع المواد الاستهلاكية (أنبوب مزيج الرئيسي وخرطوشه، وأنبوب العينة) مع باركود.
- قم بإزالة غطاء أنبوب عينة. تأخذ ميليلتر 180 من العينة التي تم جمعها (أما aspirate المشتركة، انظر الفرع 1؛ أو السوائل سونيكيشن، انظر الفرع 4) مع ماصة ونقل إلى العينة الأنبوبة. أغلق أنبوب عينة مع غطاء أنبوب عينة تحتوي على بروتين كيناز ك وجينات مراقبة داخلية لمراقبة جودة العمل كله.
- في قمرة القيادة، فتح برنامج التشغيل قبل لمس "الاختبار الجديد" الزر في الزاوية السفلي اليسرى. أدخل بيانات المريض أو معرف نموذج عن طريق اللمس. لاختيار العينة، اختر أولاً "ITI-خرطوشة" من القائمة المنسدلة، ثم "العظام" كوضع التطبيق، وأخيراً حدد "السائل الزليلي" أو "sonication السوائل" كنوع العينة. اضغط على زر ابدأ.
- مسح الباركود على الجزء السفلي من أنبوب عينة. إدراج أنبوب عينة ليساتور.
ملاحظة: سوف تبدأ تلقائياً عملية تحلل وتأخذ حوالي 30 دقيقة لإنهاء. وسوف تشير إلى العد التنازلي لجهاز ضبط الوقت على الشاشة ليساتور عند الانتهاء من تحلل. - حدد عينة على الشاشة قمرة القيادة لفتح أنبوب عينة من. إزالة أنبوب عينة من وأغلق الغطاء العلوي. نقل أنبوب عينة في فتحه أنبوب عينة من خرطوشة PCR. إدراج أنبوب mastermix مطلق في الفتحة mastermix الخرطوشة PCR.
- اتبع الإرشادات على الشاشة قمرة القيادة، المسح خرطوشة PCR مع أنبوب mastermix وعينه.
- إدراج خرطوشة PCR في فتحه الخرطوشة المشار إليها من المحلل. عند القيام بذلك، إصدارات المحلل الخرطوشة.
ملاحظة: شروط PCR هي مسبقاً من قبل الشركة المصنعة ولا يمكن تغييرها من قبل المستخدم. للحصول على مزيد من المعلومات راجع دليل التطبيق الخاص بالشركة المصنعة. سوف تبدأ تلقائياً عملية PCR ويستغرق حوالي 4 ساعات 10 دقيقة. - إزالة وتجاهل الخرطوشة. في لمس قمرة القيادة، اختر "التجارب الحالية" في الزاوية السفلي اليسرى، ثم اختيار معرف النموذج الصحيح لعرض نتائج الاختبار. حفظ النتائج في الذاكرة للجهاز، وطباعة أو تصدير (عن طريق محرك أقراص USB) للمزيد من المراجع.
ملاحظة: التقرير نتيجة لبكر، بما في ذلك تحديد مسببات المرض والكشف عن علامات المقاومة، للجراح دون تأخير. لوحة مع أهداف الحمض الخلوي الصبغي (DNA) 114 من مسببات الأمراض البكتيرية والفطرية التي توجد عادة في التهابات الزرع والتهابات الأنسجة اللينة، جنبا إلى جنب مع علامات المقاومة للمضادات الحيوية الأكثر شيوعاً هو تحليل.
3-الجراحة: جمع العينات الموضعية
ملاحظة: يتطلب جراحة تقويم مفاصل مراجعة على مستوى خبراء من المهارة والخبرة؛ للحصول على نظرة شاملة للإجراءات الجراحية، يرجى الرجوع إلى الكتب المدرسية لجراح18. وصف كامل ومفصل للعملية الجراحية ستكون خارج نطاق هذه المقالة. هنا التركيز على التفاصيل المتعلقة بجمع العينات والتحليلات السابقة. في مراجعة جراحة تقويم مفاصل، الامتناع عن الإدارة مفردة النار الاتقاء بالمضادات الحيوية، لا تعرض نتائج العينات الميكروبيولوجية التي تم الحصول عليها أثناء عملية جراحية ل. الالتزام بهذه القاعدة ويوصي، على الرغم من أن هذه الممارسة المثيرة للجدل19،20. استخدام النهج الجراحية الموجودة للمشترك كلما كان ذلك ممكناً. وسوف تضر الأنسجة الرخوة النهج الجراحية إضافية وزيادة تشكيل ندبة.
- تشريح الأنسجة حتى يتعرض الكبسولة المشتركة هو أيضا. تؤدي أرثروتومي بحقنه على أهبة الاستعداد، يمكن جمع السائل حتى أخرى مشتركة في المحاقن المعقمة لمزيد من التحليل وكما ورد أعلاه (الخطوات 1.7.1-1.7.3).
ملاحظة: يجب استخدام لا سوائل مطهرة الغسل حتى تتم إزالة الزرع وتم أخذ عينات الأنسجة. - إزالة يزرع المشتركة. فورا بعد إزالة، نقل أجزاء زرع في وعاء من بلاستيك عقيمة مع غطاء محكم هواء والماء.
ملاحظة: يمكن الاطلاع على تعليمات تفصيلية لإزالة الزرع في الأدب كتاب (الركبة، مثلاً: فيرتز et al.، 16.4 الفصل21؛ الهيب، مثلاً: كلاس et al., الفصل 14.5.122). صكوك محددة قد تكون ضرورية، كما جاء في تعليمات الشركات المصنعة. تقنية إزالة الزرع يتفاوت تفاوتاً كبيرا بين زرع مختلف أنواع وأساليب التثبيت. مجموعة احتال والتدريبات ومطرقة انزلاق ومجموعة إزالة مسمار إينتراميدولاري عالمية مفيدة في إزالة يزرع المتكاملة عظمى23،24. - استخدام كورت حادة معقمة، الملقط ورونجيور لإزالة الأنسجة غشاء من واجهة زرع العظام. نقل عينة من الأنسجة في وعاء من بلاستيك عقيمة مع غطاء المسمار على، كعينات لعلم الأحياء المجهرية وعلم الأنسجة.
ملاحظة: يمكن استخدام مخروط لمسح قناة النخاع من جميع الأنسجة الرخوة. أيضا، أخذ عينات كبسولة المفصل للفحص والأنسجة الزليلي وتخزينها في حاويات معقمة. ويجب أن تجمع العينات أربعة على الأقل في المجموع. - إرسال جميع العينات وأجزاء اكسبلانتيد إلى مختبر علم الأحياء الدقيقة على الفور.
ملاحظة: المضادات الحيوية يمكن بعد ذلك أن تعطي. اختيار المضادات الحيوية الصحيحة أمر ضروري، ويجب أن يكون قرار فردي25،26. المفاهيم العلاجية يجب أن يقرره على فريق متعدد التخصصات من الجراحين والأطباء مسبقاً. - إكمال ديبريديمينت الموقع السابق زرع عن طريق إزالة أي أنسجة يظهر دلائل على الحطام (مثل ارتداء البولي إثيلين، معدنية أو الأسمنت الجسيمات) أو من العدوى ونخر (الأنسجة صديدي، avascular المغلفة فيبرينوجين الغشائي أو "الطينية"). قم بإزالة أي عظم ميت أو أوستيتيك. قم بإزالة جميع المواد الأجنبية مثل مسامير أو أسلاك، سيركلاجيس، والحطام أسمنت العظام أو خيوط غير ريسوربابل (انظر كلاس et al., الفصل 14.5.322).
- ري الموقع الجراحي باستخدام مطهر الجروح من خيار استخدام حقنه 50 مل. ري بكميات وافرة (على الأقل 3 لتر) من حل المسابقة مع نظام غسل نابض. فاصل قد يكون ضروريا لتحقيق الاستقرار المشترك27.
- إغلاق الجرح باستخدام المغلفة بمضادات الميكروبات ريسوربابل خياطة الجروح العميقة لكبسولة أو رباط (بوليجلاكتين مزين خياطة الجروح، التريكلوسان المغلفة، 2 جامعة جنوب المحيط الهادئ)، والنسيج تحت الجلد (بوليجلاكتين مزين خياطة الجروح، المغلفة التريكلوسان، جامعة جنوب المحيط الهادئ 0). إغلاق الجلد باستخدام خيوط توقف غير ريسوربينج (مونوفيليك بولي بروبلين، جامعة جنوب المحيط الهادئ 0 أو USP 2-0).
4-سونيكيشن
ملاحظة: احرص على العمل بدقة أسيبتيكالي. استخدام مقعد السلامة الأحيائية "الفئة الثانية" مع تدفق الهواء الصفحي لمزيد من المعالجة للمواد اكسبلانتيد.
- فتح حاوية بلاستيكية عقد بدلة اكسبلانتيد من غرفة العمليات (راجع الخطوة رقم 3.2) تحت أحد مقاعد عامل تدفق هواء الصفحي، وإضافة الحل كلوريد الصوديوم 0.9% عقيمة حتى الجهة الخارجية اكسبلانتيد تغطية 80 في المائة على الأقل (حوالي 500-800 مل).
- إغلاق الحاويات البلاستيكية. يهز جيدا أو تحرض الحاوية البلاستيكية باستخدام خلاط دوامة على كثافة عالية لنقل س. 30 حاوية بلاستيكية في حمام سونيكيشن. فحص مستوى السوائل في حمام sonication.
ملاحظة: يجب أن يكون مستوى السائل سونيكاتيون حمام نفس داخل الحاوية البلاستيكية. التأكد من أن الحاوية البلاستيكية لا يمكن أن غمرت المياه، وإذا لزم الأمر إضافة أو إزالة السائل من حمام sonication. - Sonicate العينة لمدة 5 دقائق مع تردد 40 ± 2 كيلو هرتز وطاقة كثافة 0.22 ± 0.04 ث/سم2. اهتزاز أو دوامة العينة جيدا لمدة 30 ثانية.
ملاحظة: الأفضل تذويب الأغشية الحيوية، دون أي تأثير على بقاء البكتيرية28مرات Sonication بين 1-5 دقائق. - داخل مقاعد البدلاء الاندفاق الصفحي، جمع 50 مل سائل sonication وتحويلها إلى أنبوب العقيمة، وإغلاق محكم.
- لإنشاء سائل sonication مركزة، الطرد المركزي في أنبوب لمدة 10 دقائق في 4,200 س زاي ترك كمية متبقية من 10 مل، تجاهل المادة طافية المتبقية مع ماصة. ريسوسبيند بيليه بيبيتينج وفورتيكسينج.
- تلقيح وسائط الثقافة مناسبة (مثل أجار الدم، أجار الشوكولاته، أجار سابورو، أجار شايدلير في، أجار كاناميسين-فانكومايسين أو مرق thioglycolate) مع 0.5 مل سائل sonication تتركز كل. تطعيم قارورة ثقافة الدم لدى الأطفال مع 2 مل كما هو موضح أعلاه (راجع الخطوة 1.7.1). نقل 1 مل سائل sonication تتركز في أنبوب جمع دم دون إضافات لتحليل PCR.
- نقل وسائط الثقافة الملقحين للحاضنة (35 درجة مئوية، وأول أكسيد الكربون 5%2). احتضان الثقافات لمدة 14 يوما، وتحقق النمو يوميا.
- وبعد 14 يوما، تجاهل الثقافات مع لا نمو وتقرير سلبي. إذا تم الكشف عن النمو، القيام بتحديد مسببات المرض باستخدام التقنيات القياسية تحديد واختبار قابلية. تقرير النتيجة للجراح دون تأخير.
ملاحظة: هنا، تحديد العوامل المسببة للمرض أجريت باستخدام الليزر ساعد المصفوفة ديسوربشن/التأين--الوقت للطيران (استخدام-TOF) التحليل الطيفي. وأجرى اختبار حساسية الميكروبات مع محلل سيميوتوماتيد29،،من3031.
Representative Results
واعتبر وجود كمديرا، كما حددها الاجتماع إلى توافق في الآراء من المجتمع الإصابة العضلية الهيكلية (MSIS)، ثبت عندما حضر أحد المعايير الرئيسية أو على الأقل ثلاثة من أصل خمسة معايير بسيطة. وتشمل المعايير الرئيسية وجود ناسور الولادة، أو الكشف عن الممرض في عينتين منفصلتين الميكروبيولوجية. وتشمل المعايير الثانوية عدد الخلايا إيجابية (> 3,000 الكريات البيضاء/ميليلتر) أو تمايز الخلايا إيجابية (> المحببة العَدلات 85%) في أسبيراتي المشتركة، عينات إيجابية معدل البروتين والترسب في الدم، علم الأنسجة إيجابية في عينات الأنسجة أو كشف الممرض في الميكروبيولوجي عينة واحدة فقط19. حسبت الحساسية والنوعية لاختبار تضخيم الحمض النووي (NAT)، بالمقارنة مع معيار الذهب MSIS. وترد تفاصيل المريض، بما في ذلك الكشف عن العوامل الممرضة في الجدول 1.
وأظهرت النتائج الخاصة بنا حساسية معتدلة لبكر التشخيص من السوائل sonication و aspirate المشتركة (50.0 في المائة و 55.6%) لكن خصوصية قوية جداً من 100%11. كلما بكر التشخيص (ن مجموع = 62 الاختبارات) وأظهرت نتيجة إيجابية في أسبيراتي المشتركة (ن = 31) أو السائل sonication (ن = 31)، تم الكشف عن مسببات المرض نفسه في وقت لاحق في واحدة من الثقافات التقليدية الميكروبيولوجية. بكر لعينات مختلفة من حالات العدوى غير أظهر أي كاذبة إيجابية نتيجة (انظر الشكل 1).
فشل PCR التشخيصية للكشف عن بعض العوامل الممرضة التي ثبت مع الأساليب التقليدية ثقافة الميكروبيولوجية. 6 من أصل 16 (37.0%) مسببات الأمراض الحقيقية في عينات السوائل sonication ومسببات الأمراض 5 من أصل 13 (38.0%) من الثقافة المشتركة السوائل ضاعت بالكشف عن PCR. في الغالب، غاب التشخيص PCR الكشف عن العنقوديات سلبية المخثرة (8 من أصل 11). تشخيص PCR مجتمعة من كل من المواد (السائل أسبيراتي وسونيكاتيون مشتركة، "تجميع PCR") حددت حالات إصابة 12 من أصل 18 بشكل صحيح (حساسية 66.7%، 95% CI: 41.0 و 86.7 في المائة، انظر الجدول 2).
رقم 1: نتائج ملخص NAT. ويصور الرسم البياني النتائج الملخصة من عينات المرضى الجماعي. على الجانب الأيمن هو المجموعة المرضى المطابقة لمعايير كمديرا، على الجانب الأيسر من المجموعة التي لم يكن. الأشرطة تمثل أساليب تضخيم الحمض النووي. كاذبة إيجابيات وسلبيات كاذبة تظهر باللون الأحمر كنسبة مئوية من المجموع. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
| المشتركة | قضية مراجعة | مباريات MSIS المعايير؟ | العلاج بالمضادات الحيوية السابقة؟ | الثقافة السوائل سونيكاتيون | الثقافة المشتركة أسبيراتي | نات سونيكاتيون الثقافة | نات أسبيراتي المشتركة |
| الورك | تخفيف العقيم | لا | لا | ||||
| الركبة | تخفيف العقيم | لا | لا | ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
|||
| الركبة | تخفيف العقيم | لا | لا | ديرماباكتير دم |
|||
| الركبة | تخفيف العقيم | لا | لا | ||||
| الركبة | تخفيف العقيم | لا | لا | ليفسونيا اكواتيكا |
|||
| الورك | تخفيف العقيم | لا | لا | ||||
| الركبة | تخفيف العقيم | لا | لا | ||||
| الركبة | عدم الاستقرار | لا | لا | ||||
| الورك | خلع المزمن | لا | لا | المكوّرات العنقودية هايموليتيكوس |
|||
| الركبة | تخفيف العقيم | لا | لا | ||||
| الورك | تخفيف العقيم | لا | لا | ||||
| الورك | تخفيف العقيم | لا | لا | ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
|||
| الركبة | عدم الاستقرار | لا | لا | ||||
| الركبة | الإصابة الحادة | نعم | نعم | الزائفة الزّنجاريّة | الزائفة الزّنجاريّة | Pseudomonas الزّنجاريّة |
|
| الركبة | الإصابة الحادة | نعم | لا | الإشريكيّة القولونية |
الإشريكيّة القولونية |
الإشريكيّة القولونية |
|
| الورك | عدوى مزمنة | نعم | لا | كورينيباكتيريوم spp. |
ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
||
| الركبة | الإصابة الحادة | نعم | لا | المكوّرات العنقودية الذهبية | المكوّرات العنقودية الذهبية | المكوّرات العنقودية الذهبية | المكوّرات العنقودية aureus |
| الركبة | عدوى مزمنة | نعم | لا | عقدية أجالاكتيكاي |
عقدية أجالاكتيكاي |
عقدية أجالاكتيكاي |
عقدية أجالاكتيكاي |
| الورك | عدوى مزمنة | نعم | نعم | المكوّرات العنقودية الذهبية | |||
| الركبة | عدوى مزمنة | نعم | لا | ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
|||
| الركبة | عدوى مزمنة | نعم | نعم | ستافلوكوككو ابيديرميديس |
ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
||
| الورك | عدوى مزمنة | نعم | لا | ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
||
| الركبة | عدوى مزمنة | نعم | لا | ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
المخثرة السلبية العنقوديات |
المخثرة السلبية العنقوديات |
|
| الورك | عدوى مزمنة | نعم | لا | المكوّرات العنقودية الذهبية | المكوّرات العنقودية الذهبية | ||
| الركبة | الإصابة الحادة | نعم | لا | ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
المخثرة السلبية العنقوديات |
المخثرة السلبية العنقوديات |
| الورك | الإصابة الحادة | نعم | لا | ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
المخثرة السلبية العنقوديات |
||
| الورك | عدوى مزمنة | نعم | لا | ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
||
| الورك | الإصابة الحادة | نعم | لا | ستافلوكوككوس ابيديرميديس |
المخثرة السلبية العنقوديات |
||
| الركبة | عدوى مزمنة | نعم | لا | المكوّرات العنقودية الذهبية | المكوّرات العنقودية الذهبية | المكوّرات العنقودية aureus |
|
| الورك | عدوى مزمنة | نعم | لا | البرازية فاسيليس |
البرازية فايسياليس |
البرازية spp. |
البرازية spp. |
| الركبة | عدوى مزمنة | نعم | نعم | انتيروكوككوس faecalis |
انتيروكوككوس faecalis |
البرازية spp. |
البرازية spp. |
الجدول 1: تفاصيل المريض والكشف عن العوامل الممرضة. جداول نتائج تفاصيل المريض، بما في ذلك قضية مراجعة الجراحة، معايير MSIS المطابقة والكشف عن مسببات الأمراض في الأحياء المجهرية التقليدية وتحليل NAAT.
| معايير | بكر Sonicate | أسبيراتي بكر | بكر المجمعة |
| قيمة P | 0.0036 | 0.0013 | 0.0001 |
| حساسية | 50.0% | 55.6 في المائة | 66.7 في المائة |
| خصوصية | 100، 0 ٪ | 100، 0 ٪ | 100، 0 ٪ |
| القيمة التنبؤية الإيجابية | 100، 0 ٪ | 100، 0 ٪ | 100، 0 ٪ |
| القيمة التنبؤية السلبية | 59.1 في المائة | 61.9% | 68.4% |
الجدول 2: نتائج الطرق الميكروبيولوجية. جداول نتائج التقييم لبكر التشخيص السائل سونيكيشن، أسبيراتي المشترك وبكر المجمعة. N = 31 عينة أسبيراتي وسونيكيشن، على التوالي، n = 62 للبيانات المجمعة PCR.
Discussion
الإصابة بجسم غريب مشكلة ناشئة في جراحة العظام وجراحة الصدمات مع تكلفة العلاج والاستشفاء الطويلة وقصور وظيفي في المفاصل المتضررة. التشخيص التفاضلي التحدي. العديد من الباحثين والأطباء يتم إيلاء الاهتمام لهذا الموضوع، تعمل جاهدة لإيجاد أكثر دقة والأساليب الموثوقة لتشخيص الجسم الخارجية المرتبطة العدوى. وحتى الآن، العديد من الأدوات التشخيصية المختلفة التي يجري تقييمها وتنفيذها في مسار التشخيص32.
الإجراء سونيكيشن أسلوب لا تقدر بثمن، تظهر حساسية أفضل من الثقافات التقليدية من عينات الأنسجة6. في دراستنا، أظهرنا أن الثقافات sonication السوائل لديها حساسية 88.9 في المائة مع خصوصية 61.5 في المائة. وكان الثقافات التقليدية من عينات الأنسجة وتبين المشتركة حساسية من 66.7 في المائة مع خصوصية 82.3% و 84.6 في المائة، على التوالي. الباحثين الآخرين إظهار نتائج مماثلة لهذه الإجراءات التقليدية الميكروبيولوجية6،33،،من3435. كثيرا ما تنتقد أن الإجراء sonication عرضه للتلوث، ولذلك يجب توخي الحذر خاصة في التعامل مع العينات.
إمكانية الكشف عن الحمض النووي الممرض المسبّب للمرض في عينات الأنسجة أو السوائل مثيرة للاهتمام. نات هو إجراء سريع الذي يمكن أن يحقق نتائج في غضون ساعات، بالمقارنة مع أساليب ثقافة الميكروبيولوجية تستغرق وقتاً طويلاً. دون شك، نات لديه حساسية جيدة في الكشف عن مسببات الأمراض، ولكن عقد خطر الكشف عن الملوثات، ومن ثم تفتقر إلى التحديد36. تم توثيق فائدة كبيرة من هذا تقنية PCR في تشخيص كمديرا خاصة في المرضى الذين تلقوا العلاج بالمضادات الحيوية القريبة من الجراحة أو لأطول فترة7،8. وتشير الدراسات إلى أن نات السائل sonication قد تزيد حساسية وخصوصية37. للأسف، هذا الأسلوب غير متوفر بشكل روتيني في المختبرات، سبب لها سير العمل وقتاً طويلاً.
هناك بعض القيود لتقنية PCR بصورة عامة: نات بالكشف عن الحمض النووي مع لا التفريق بين البكتيريا قادرة على البقاء وغير قابل للحياة، مما يجعل من الصعب تفسير النتائج. فقط سيكشف بكر واسعة النطاق 16S ريبوسومال الحمض النووي الريبي (الرنا الريباسي 16S)، عدم التفريق بين العوامل الممرضة37. أنظمة أكثر تحديداً لا يكشف علامات ترميز الجينات المقاومة للمضادات الحيوية بشكل روتيني. ولذلك قد تكون محدودة دون إجراء مزيد من الاختبارات قابلية علاج بالمضادات الحيوية مستهدفة.
النظام المطبق في هذه الدراسة ويتغلب على بعض هذه القيود، التفريق بين البكتيريا محددة وتحديد علامات ترميز الجينات المقاومة. عموما، قد اعتبار فحوصات نات تكامل سريعة ومفيدة لتأكيد كمديرا7،،من89،38.
من الضروري أن تخطط للمستقبل في التطلع المشترك وفي الجراحة: حاويات العينات يجب أن تكون معقمة وجاهزة، ونموذج سرعة النقل يجب أن تكون متوفرة. ينبغي إطلاع الجراحين على الأطباء في الإجراءات المقررة وما عينة من المواد يمكن توقعه. عند أداء التطلعات المشتركة، وظروف معقمة تماما يجب ضمان، للوقاية من العدوى علاجية المنشأ المشترك. في مرضى الدهنية، ثقب المشترك يمكن أن يكون تحديا، والتوجيه الفلوري يمكن أن تكون مفيدة. جراحة تقويم مفاصل مراجعة يتطلب درجة عالية جداً من الخبرة، وينبغي أن يؤديها إلا طبيب جراح مهرة. المواد اكسبلانتيد لا ينبغي أن يوضع في غرفة العمليات أي أطول مما هو ضروري، ولكن ترسل إلى الميكروبيولوجي أقرب وقت ممكن. جزء هام جداً في هذا البروتوكول من المخاطر المحتملة للتلوث. حين جمع العينات، بل أيضا أثناء التعامل مع العينات في مختبر الميكروبيولوجيا، جميع الموظفين المعنيين (جراحة العظام، الممرضات، والفنيين، والأطباء) يجب العمل بسرعة ودقة، ويكون التدريب السليم في الإجراءات.
Sonication ونأت أدوات قيمة في تشخيص الإصابات المرتبطة بعملية الزرع. ومع ذلك، ينبغي دائماً التشكيك النتائج بعناية. نحن نوصي بمناقشة النتائج في اجتماع مائدة مستديرة لجراحي العظام، والأطباء وأخصائيي الأمراض المعدية، وأخصائيي علم الأمراض للاتفاق على استراتيجية علاجية فردية.
لتنفيذ هذا الأسلوب في التشخيص يمكن أن يكون مسار كمديرا العديد من المزايا. تشخيص سريع بنتيجة في غضون ساعات. نتيجة لتحليل عدة علامات المقاومة الجينات المشفرة، علاج بالمضادات الحيوية مستهدفة يمكن أن يحدث في مرحلة مبكرة جداً في مسار السريرية. كأثر جانبي، يمكن حفظ المضادات الحيوية واسعة المدى للبيانات حيث توجد حاجة حقيقية. كما يمكن أن تحقق أنواع عينة أخرى (مثلاً عينات الأنسجة، مسحات، ورم دموي، إلخ) وفقا للبروتوكول لدينا. منذ خرطوشة PCR نظام مغلق، لا استكشاف الأخطاء وإصلاحها اللازمة أو الممكنة على الجانب المستخدم. التكيف مع أي من البروتوكول يجب أن تنفذها الشركة المصنعة. يتم إجراء تغييرات في كلا من البرامج والأجهزة (خرطوشة) بشكل مستمر من الشركة المصنعة لتعزيز النظام، بيد أن تنشر أي تفاصيل عن التغييرات الدقيقة في الإصدارات الأحدث.
Disclosures
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
Acknowledgments
المؤلف يود أن يشكر كوريتيس GmbH لدعم هذه الدراسة.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| sterile plastic container | Lock & Lock, Distributor ISI GmbH, Solingen, Germany | EAN 8803733184403 | Transport container for implants |
| Bactosonic 14.2 | Bactosonic, Bandelin, Berlin, Germany | 3290 | "Sonication machine" |
| 50ml Falcon tubes | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 352070 | Centrifugation |
| PEDS medium blood culture flasks | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 442194 | culture medium |
| Columbia agar with 5% sheep blood | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 254071 | culture medium |
| Mac Conkey agar | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 254078 | culture medium |
| chocolate agar | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 254089 | culture medium |
| sabouraud agar | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 254096 | culture medium |
| thioglycolate bouillon | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 221788 | culture medium |
| Schaedler agar | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 254084 | culture medium |
| kanamycin/vancomycin agar | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 254077 | culture medium |
| Bactec FX blood culture system | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 441386/441385 | culture medium |
| Unyvero A50 Analyzer | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 60001 | PCR machine |
| Unyvero L4 Lysator | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 60002 | PCR machine |
| Unyvero C8 Cockpit | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 60003 | PCR machine |
| Unyvero M1 Masterix Tube | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 10002 | consumables PCR |
| Unyvero i60 ITI Cartridge | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 10040 | consumables PCR |
| Unyvero Sample Tube Cap | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 10004 | consumables PCR |
| Unyvero Sample Tube | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 10003 | consumables PCR |
| S-Monovette 2.7ml | Sarstedt AG, Nümbrecht, Germany | 05.1729.001 | Transport container (aspirate) |
| scalpel typ 11 | pfm medical, Cologne, Germany | 200130011 | scalpel for stab incision |
| PP Container 70mL 55x45mm | Sarstedt AG, Nümbrecht, Germany | 759,922,721 | Transport container (tissue specimen) |
| Vicryl Plus | Johnson&Johnson Medical GmbH, Ethicon Germany, Norderstedt, Germany | VCP247H | surgical suture material |
| Prolene 0 | Johnson&Johnson Medical GmbH, Ethicon Germany, Norderstedt, Germany | EH7920H | surgical suture material |
| Prolene 2/0 | Johnson&Johnson Medical GmbH, Ethicon Germany, Norderstedt, Germany | EH7697H | surgical suture material |
| Kodan Tinktur forte farblos | Schülke & Mayr GmbH, Norderstedt, Germany | 104005 | alcoholic skin disinfectant |
References
- Wimmer, M. D., et al. Evaluation of an interdisciplinary therapy algorithm in patients with prosthetic joint infections. Int Orthop. 37 (11), 2271-2278 (2013).
- Trampuz, A., et al. Synovial fluid leukocyte count and differential for the diagnosis of prosthetic knee infection. Am J Med. 117 (8), 556-562 (2004).
- Randau, T. M., et al. Interleukin-6 in serum and in synovial fluid enhances the differentiation between periprosthetic joint infection and aseptic loosening. PLoS One. 9 (2), e89045 (2014).
- Deirmengian, C. A., Wongworawat, M. D. Editor's spotlight/take 5: diagnosing periprosthetic joint infection: has the era of the biomarker arrived. Clin Orthop Relat Res. 472 (111), 3250-3253 (2014).
- Gollwitzer, H., et al. Antimicrobial peptides and proinflammatory cytokines in periprosthetic joint infection. J Bone Joint Surg Am. 95 (7), 644-651 (2013).
- Trampuz, A., et al. Sonication of removed hip and knee prostheses for diagnosis of infection. N Engl J Med. 357 (7), 654-663 (2007).
- Achermann, Y., Vogt, M., Leunig, M., Wust, J., Trampuz, A. Improved diagnosis of periprosthetic joint infection by multiplex PCR of sonication fluid from removed implants. J Clin Microbiol. 48 (40), 1208-1214 (2010).
- Portillo, M. E., et al. Multiplex PCR of sonication fluid accurately differentiates between prosthetic joint infection and aseptic failure. J Infect. 65 (6), 541-548 (2012).
- Qu, X., et al. PCR-based diagnosis of prosthetic joint infection. J Clin Microbiol. 51 (8), 2742-2746 (2013).
- Borde, J. P., et al. Diagnosis of prosthetic joint infections using UMD-Universal Kit and the automated multiplex-PCR Unyvero i60 ITI((R)) cartridge system: a pilot study. Infection. 43 (5), 551-560 (2015).
- Hischebeth, G. T., et al. Unyvero i60 implant and tissue infection (ITI) multiplex PCR system in diagnosing periprosthetic joint infection. J Microbiol Methods. 121, 27-32 (2016).
- Prieto-Borja, L., et al. Evaluation of a commercial multiplex PCR (Unyvero i60(R)) designed for the diagnosis of bone and joint infections using prosthetic-joint sonication. Enferm Infecc Microbiol Clin. , (2016).
- Bernau, A., Heeg, P. Intraarticular punctures and injections: indications--prevention of infection--technique--complications. Orthopade. 32 (6), 548-569 (2003).
- Courtney, P., Doherty, M. Joint aspiration and injection and synovial fluid analysis. Best Pract Res Clin Rheumatol. 27 (2), 137-169 (2013).
- Arnold, S., Meurer, A. Intra-articular punctures and injections. Orthopade. 42 (12), 1075-1086 (2013).
- Geller, J. A., et al. Prospective Comparison of Blood Culture Bottles and Conventional Swabs for Microbial Identification of Suspected Periprosthetic Joint Infection. J Arthroplasty. 31 (8), 1779-1783 (2016).
- Cross, M. C., et al. Utility of percutaneous joint aspiration and synovial biopsy in identifying culture-positive infected hip arthroplasty. Skeletal Radiol. 43 (2), 165-168 (2014).
- Berry, D. J. Revision total hip and knee arthroplasty. , Wolters Kluwer Health/Lippincott Williams & Wilkins. (2012).
- Parvizi, J., Gehrke, T. International Consensus Group on Periprosthetic Joint, I. Definition of periprosthetic joint infection. J Arthroplasty. 29 (7), 1331 (2014).
- Ghanem, E., et al. Perioperative antibiotics should not be withheld in proven cases of periprosthetic infection. Clin Orthop Relat Res. 461, 44-47 (2007).
- Wirtz, D. C. AE-Manual der Endoprothetik - Knie. , Springer. (2011).
- Claes, L. K., Peter,, Perka,, Carsten,, Rudert,, Maximilian, AE-Manual der Endoprothetik - Hüfte und Hüftrevision. , Springer. (2012).
- Herrmann, P., Thoele, P., Heppert, V. Infected knee prostheses. Part 2: chronic late infections. Oper Orthop Traumatol. 25 (3), 242-250 (2013).
- Zweymuller, K. A., Steindl, M., Melmer, T. Anterior windowing of the femur diaphysis for cement removal in revision surgery. Clin Orthop Relat Res. 441, 227-236 (2005).
- Osmon, D. R. Microbiology and Antimicrobial Challenges of Prosthetic Joint Infection. J Am Acad Orthop Surg. 25, Suppl 1 17-19 (2017).
- Renner, L., Perka, C., Trampuz, A., Renz, N. Treatment of periprosthetic infections. Chirurg. 87 (10), 831-838 (2016).
- Kuzyk, P. R., et al. Two-stage revision arthroplasty for management of chronic periprosthetic hip and knee infection: techniques, controversies, and outcomes. J Am Acad Orthop Surg. 22 (3), 153-164 (2014).
- Kobayashi, N., Bauer, T. W., Tuohy, M. J., Fujishiro, T., Procop, G. W. Brief ultrasonication improves detection of biofilm-formative bacteria around a metal implant. Clin Orthop Relat Res. 457, 210-213 (2007).
- Dubois, D., et al. Performances of the Vitek MS matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry system for rapid identification of bacteria in routine clinical microbiology. J Clin Microbiol. 50 (8), 2568-2576 (2012).
- Cherkaoui, A., et al. Comparison of two matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry methods with conventional phenotypic identification for routine identification of bacteria to the species level. J Clin Microbiol. 48 (4), 1169-1175 (2010).
- Barenfanger, J., Drake, C., Kacich, G. Clinical and financial benefits of rapid bacterial identification and antimicrobial susceptibility testing. J Clin Microbiol. 37 (5), 1415-1418 (1999).
- Tande, A. J., Patel, R.
- Portillo, M. E., et al. Advantages of sonication fluid culture for the diagnosis of prosthetic joint infection. J Infect. 69 (1), 35-41 (2014).
- Scorzolini, L., et al. Sonication technique improves microbiological diagnosis in patients treated with antibiotics before surgery for prosthetic joint infections. New Microbiol. 37, 321-328 (2014).
- Zhai, Z., et al. Meta-analysis of sonication fluid samples from prosthetic components for diagnosis of infection after total joint arthroplasty. J Clin Microbiol. 52 (5), 1730-1736 (2014).
- Panousis, K., et al. Poor predictive value of broad-range PCR for the detection of arthroplasty infection in 92 cases. Acta Orthop. 76 (3), 341-346 (2005).
- Rak, M., KavcIc, M., Trebse, R., Co, R. A. Detection of bacteria with molecular methods in prosthetic joint infection: sonication fluid better than periprosthetic tissue. Acta Orthop. 87 (4), 339-345 (2016).
- Li, Z., Yu, A. Diagnostic value of a PCR-based technique for prosthetic joint infection. J Clin Microbiol. 52 (6), 2281-2282 (2014).
