0 vues • 3:34 min • April 30th, 2023
- Commencez par ajouter de l’agarose E3 à point de fusion moyen à bas et chauffez jusqu’à ce que l’agarose se dissolve complètement. Refroidissez l’agarose à 37 degrés Celsius et ajoutez la solution de tricaïne. Ensuite, anesthésez les embryons en ajoutant de la tricaïne dans une boîte de Pétri contenant des embryons dans un milieu E3. Faites tourner la boîte de Pétri pour recueillir les embryons au milieu.
À l’aide d’une pipette de transfert, prélevez un embryon avec une quantité minimale de milieu. Tenez la pipette en position verticale et faites rebondir l’embryon pour le positionner à l’extrémité de la pipette. Placez maintenant l’embryon dans la solution d’agarose sans ajouter de milieu en excès, ce qui diluerait l’agarose et empêcherait la gélification. Mélangez délicatement l’embryon dans l’agarose et transférez la solution dans le puits d’une plaque d’imagerie à l’aide de la pipette.
Placez la plaque sous un microscope et utilisez la pointe d’une pipette pour positionner l’embryon dans l’orientation souhaitée. Une fois que l’agarose se solidifie, versez un milieu E3 contenant de la tricaïne dessus pour garder la gélose hydratée et imager l’embryon. Dans un exemple de protoc
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