Injection mur souris vessie

L’objectif global de cette procédure est d’introduire des cellules dans des zones définies de la paroi de la vessie. Ceci est accompli en faisant d’abord une incision abdominale pour exposer la vessie. L’étape suivante de la procédure consiste à insérer le biseau de l’aiguille intra-muros.

La dernière étape de la procédure consiste à pousser le piston de la seringue pour injecter les cellules d’intérêt dans la paroi de la vessie. L’implantation réussie des cellules est marquée par une bulle bien localisée qui ne fuit pas de liquide et reste stable en taille. Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes telles que l’inoculation transurétrale de souris avec des cellules, est qu’elle permet de diriger l’endroit où les cellules vont s’implanter dans la vessie.

La démonstration visuelle du muscle li est essentielle car les séjours d’injection sont difficiles à apprendre. Connaître l’angle correct et la position d’entrée de l’aiguille dans la vessie est essentiel au succès de la technique. Sélectionnez l’âge, le sexe et la souche des souris en fonction des besoins de l’expérience ici.

Des souris âgées de huit à 12 semaines sont utilisées pour commencer à nettoyer la surface de la table d’opération avec de l’eau et du savon. Ensuite, essuyez la surface de la table d’opération avec des lingettes latérales ou des lingettes antiseptiques. Les instruments chirurgicaux doivent être stérilisés dans un autoclave avant l’opération.

Essuyez les instruments avec de l’éthanol à 70 % juste avant de les utiliser et stérilisez-les à nouveau avec un stérilisateur à billes chaudes entre les chirurgies individuelles. Nettoyez une seringue Hamilton de 100 microlitres attachée à une aiguille de calibre 30 par aspiration répétée d’alcool absolu, suivie d’une solution saline tamponnée au phosphate stérilisée. Placez un animal anesthésié en position couchée sur un coussin chaud pour aider à maintenir une température corporelle normale.

Maintenez un niveau d’anesthésie suffisant en plaçant le museau de l’animal dans une buse contenant du fluor vaporisé. Ensuite, retirez les poils de la peau abdominale avec une tondeuse. Utilisez un champ chirurgical stérile jetable pour couvrir l’anus afin d’éviter la contamination fécale pendant la chirurgie.

Placez un deuxième champ chirurgical sur le bas-ventre et exposez une fenêtre chirurgicale. Stérilisez le site chirurgical avec des applications répétées de bétadine et d’alcool à l’aide d’un microscope de dissection pour le grossissement. Faites une incision abdominale médiane inférieure avec des ciseaux.

Utilisez une légère pression sur l’abdomen pour exposer la vessie. Étant donné que la vessie est généralement partiellement ou complètement pleine, la pression sur l’abdomen repoussera préférentiellement les autres organes et permettra à la vessie de sortir de l’incision. Si la vessie est pleine, appliquez une légère pression vers le bas au niveau du dôme pour la décompresser partiellement.

Remplissez la seringue stérile Hamilton avec 50 microlitres de la solution d’échantillon. Insérez la pointe de l’aiguille avec le biseau vers le haut dans la paroi de la vessie et injectez la solution d’échantillon. Une injection réussie est caractérisée par une bulle bien localisée qui ne fuit pas de liquide et maintient une taille stable.

Après l’injection, fermez l’incision avec des clips de plaie. Laissez le maître récupérer sur un coussin chauffant Un maître. Cette technique peut être réalisée en 10 à 15 minutes si elle est correctement exécutée.

Le succès peut être confirmé par une analyse histologique de la vessie à des moments successifs après l’injection.