Essai de superposition des protéines membranaires: Un protocole pour tester l'interaction entre les protéines solubles et insolubles In vitro

Test des protéines. L’interaction protéique est indispensable pour la dissection de la fonctionnalité protéique. Cette vidéo présente un test in vitro de liaison aux protéines pour tester l’interaction entre une protéine membranaire et une protéine immobilisée avec une protéine soluble.

Tout d’abord, les protéines de fusion sont clonées, exprimées et extraites. La protéine insoluble marquée est immobilisée sur la membrane de nitrocellulose et traitée pour être repliée jusqu’à sa confirmation native. La membrane est ensuite sondée avec des protéines solubles marquées et un immuno-transfert est effectué pour détecter les protéines.