Criblage de la mort cellulaire à l’aide de la coloration DAPI : une méthode de dépistage rapide de la mort cellulaire clonogénique induite par l’IR dans des lignées cellulaires cancéreuses

L’exposition à des rayonnements ionisants tels que les rayons X peut causer des dommages à l’ADN, conduisant éventuellement à la mort cellulaire. Pour dépister l’effet des rayonnements ionisants sur les profils de mort cellulaire, commencez par prendre une boîte de culture contenant des cellules cancéreuses adhérentes placée sur la surface d’une lamelle.

Irradiez la boîte de culture avec des rayons X pendant la durée souhaitée. Ce traitement provoque des dommages à l’ADN à l’intérieur des cellules. Ensuite, aspirez le milieu usagé de la boîte de culture et ajoutez un fixateur approprié. Cette solution pénètre dans les cellules et verrouille les composants cellulaires en place lors des étapes de coloration suivantes.

Jetez la solution fixatrice. Retirez de la boîte de culture la lamelle contenant les cellules traitées aux rayons X. Retournez la lamelle et placez-la sur la surface d’une lame de verre portant une goutte de colorant DAPI dessus de sorte que les cellules soient en contact direct avec le DAPI.

Les molécules DAPI pénètrent dans les noyaux et se lient aux sites riches en A-T de l’ADN. Maintenant, visualisez les cellules sous un microscope à fluorescence. Les noyaux apparai