Dosage de l’efférocytose à cellules fixes : méthode d’étude de l’absorption efférocytaire des cellules apoptotiques par les macrophages à l’aide de la microscopie à fluorescence

0 vues • 4:57 min • July 8th, 2025

Les cellules subissant l’apoptose - mort cellulaire programmée - affichent des signaux eat-me à leur surface cellulaire, facilitant la dégradation par les phagocytes - des cellules immunitaires spécialisées. Ce processus d’élimination des cellules apoptotiques s’appelle l’efférocytose.

Pour effectuer le test d’efférocytose, prenez d’abord une suspension de cellules apoptotiques à double coloration. Les surfaces de ces cellules sont marquées avec de la biotine, et le cytoplasme est marqué avec un colorant de suivi cellulaire, marquant les matériaux dérivés de cellules apoptotiques.

Ajoutez la suspension cellulaire dans une culture de cellules macrophages collées, qui fonctionnent comme des efférocytes. Centrifuger, forçant le contact entre les macrophages et les cellules apoptotiques, et incuber.

Les récepteurs efferocytaires des macrophages se lient à la phosphatidylsérine - un signal « mange-moi » - sur la membrane cellulaire apoptotique, facilitant son engloutissement. De petits fragments de la cellule apoptotique sont absorbés à l’intérieur d’une vésicule liée à une membrane, appelée efférosome.

Il en résulte une fraction efférocytosée - une partie de la cellule apoptotique à l’

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