Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 5:13 min • July 8th, 2025
Pour détecter les interactions ligand-analyte à l’aide de l’interférométrie de biocouche, il suffit de commencer par un biocapteur à fibre optique hydraté fixé sur une monture d’instrument BLI, réglé sur le programme souhaité.
L’embout du biocapteur est recouvert d’une couche biocompatible immobilisée avec des groupes nickel-acide nitrilotriacétique, Ni-NTA. Immergez l’embout du biocapteur dans le tampon.
L’instrument émet une lumière blanche vers le biocapteur, qui est réfléchie par deux interfaces : la couche de référence interne ou optique et la couche biocompatible. Les faisceaux réfléchis interfèrent de manière constructive ou destructrice à différentes longueurs d’onde lumineuses. Un photodétecteur détecte le motif d’interférence qui en résulte.
Après la mesure de la réponse interférométrique de base, ajoutez une solution de ligand marquée à l’histidine. Les marqueurs d’histidine se lient aux cations nickel sur le biocapteur, immobilisant les ligands sur l’extrémité.
Après association, la lumière blanche émise est réfléchie par la couche optique, et la couche biocompatible s’immobilise avec des ligands avec une épaisseur optique accrue à l’extrémité. Cela augmente la distance
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