Isolement de cellules de Sertoli régulatrices immunitaires à partir de tubules séminifères de souris

Les tubes séminifères des testicules contiennent des cellules de Sertoli, qui nourrissent les cellules germinales. Les cellules de Sertoli sont reliées par des jonctions serrées et sont fermement attachées à la matrice basale riche en acide hyaluronique. Cette disposition des cellules de Sertoli régule l’entrée des cellules immunitaires dans le tubule et protège les cellules germinales en développement de la dégradation.

Pour isoler les cellules de Sertoli, commencez par un tube contenant des tubes séminifères partiellement digérés dérivés de testicules de souris. Ces tubules manquent de cellules péritubulaires - des cellules musculaires lisses entourant les tubes séminifères.

Traitez les tubules avec un cocktail d’enzymes contenant de l’hyaluronidase – essentielle à l’hydrolyse de l’acide hyaluronique – et de la DNase.

Les hyaluronidases pénètrent dans les tubules et clivent l’acide hyaluronique – un polysaccharide basal – initiant le détachement des cellules de Sertoli de la matrice basale et libérant des cellules germinales dans la solution. La DNase digère tous les contaminants de l’ADN de la solution, empêchant ainsi l’agrégation cellulaire.

Lavez les tubules digérés par voie