Développement d’un modèle 3D de tissu neural polarisé à base de collagène de soie
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:14 min • July 8th, 2025
Placez des échafaudages en soie poreuse en forme de beignet, enduits de poly-D-lysine, dans une assiette à plusieurs puits.
Ajoutez du milieu de culture pour hydrater les échafaudages, facilitant ainsi la fixation des cellules.
Aspirez les fluides en excès. Ensemencez les échafaudages avec une suspension de cellules neuronales et incubez.
La surface enduite et les pores de l’échafaudage offrent une grande surface pour la fixation des cellules à haute densité et facilitent la diffusion efficace des nutriments et des déchets.
Retirez les cellules non attachées et ajoutez du collagène, une protéine de la matrice extracellulaire.
Incuber pour la polymérisation du collagène. Ce processus intègre les cellules dans une matrice 3D semblable à un gel sur l’échafaudage poreux.
Ajouter des médias. Cultivez, et remplacez régulièrement la moitié du milieu de culture pour reconstituer les nutriments sans perturber les cellules.
Au sein de la culture, les corps cellulaires neuronaux restent ancrés à l’échafaudage de soie tandis que les axones se développent à travers la matrice de collagène, formant des réseaux axonaux 3D.
Cette localisation compartimentée du corps cellulaire et des axones abouti
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