Développement d’un réseau neuronal issu d’une micro-ingénierie tissulaire à l’aide d’une micro-colonne à base d’hydrogel

Commencez par un plat contenant une micro-colonne. La micro-colonne est dotée d’une enveloppe extérieure en hydrogel et d’une matrice extracellulaire, ou noyau ECM.

Ajoutez des gouttes de milieu de culture dans le même plat.

Transférez les agrégats de cellules neuronales dans la boîte, puis placez-les dans l’une des gouttelettes moyennes.

Observez au stéréomicroscope et insérez les agrégats cellulaires aux deux extrémités de la microcolonne.

Ensuite, transférez la micro-colonne ensemencée dans le milieu pour la viabilité cellulaire.

Incuber pour permettre la fixation de la cellule à l’ECM.

À l’aide du stéréomicroscope, confirmez l’attachement des cellules. Ensuite, ajoutez un milieu de culture pour couvrir le plat et incuber.

Les neurones attachés commencent à étendre leurs axones par le biais de l’ECM.

Remplacez régulièrement le demi-milieu par un milieu frais pour maintenir les niveaux de nutriments.

Au fil du temps, les axones se développent et s’étendent sur toute la longueur de la micro-colonne, formant des réseaux neuronaux.

Le réseau neuronal développé est prêt à reconstruire les circuits neuronaux endommagés.

Procéder à l’ensemencement cellulaire immédiatement après l’incubation. Tra