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Commencez par une co-culture neurone-astrocytes dans un réseau de micro-électrodes multipuits ou MEA.
Chaque puits contient un réseau de neurones dérivés de cellules souches pluripotentes induites humaines, ou hiPSC. Les astrocytes de rat fournissent un soutien pour le maintien du réseau.
La base des puits contient une grille de minuscules électrodes.
Placez le MEA dans un appareil d’enregistrement pour capturer l’activité électrophysiologique spontanée du réseau neuronal.
Faire couler un mélange gazeux humidifié dans la culture pour empêcher l’évaporation du milieu et stabiliser le pH, assurant ainsi la viabilité cellulaire.
Les neurones transmettent des signaux via des impulsions électriques, appelées potentiels d’action, qui se déplacent le long de leurs axones.
Lorsqu’elle atteint la synapse, l’impulsion déclenche la libération de neurotransmetteurs, qui propagent le signal au neurone suivant.
Les électrodes à l’intérieur de chaque puits enregistrent simultanément les potentiels d’action générés par plusieurs neurones synaptiquement connectés.
L’activité électrophysiologique spontanée du réseau neuronal confirme la différenciation des hiPSC en neurones.
Acquérez les données à 1 200 fois l’amplification et échantillonnez le signal à 10 kilohertz à l’aide de la carte d’acquisition de données MCS. Enregistrer 20 minutes d’activité électrophysiologique de neurones dérivés de hiPSC cultivés sur des MEA. Pendant l’enregistrement, maintenez la température à 37 degrés Celsius et empêchez l’évaporation du fluide et les changements de pH en délivrant un flux lent et constant de gaz humidifié sur les MEA. Après cela, analysez les données à l’aide d’un progiciel personnalisé.
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