Analyse des structures amyloïdes dans une coupe de tissu à l’aide de la microscopie d’imagerie à durée de vie de fluorescence

Prenez une coupe de tissu avec des agrégats amyloïdes représentant des dépôts protéiques anormaux.

Le tissu est coloré avec le colorant fluorescent heptamère-formyl thiophène acétique ou hFTAA, qui se lie spécifiquement aux structures en feuillet bêta des fibrilles amyloïdes.

Imagez la lame à l’aide d’un microscope confocal équipé d’une unité de microscopie d’imagerie à durée de vie de fluorescence, qui mesure la durée de vie de fluorescence des molécules de colorant.

Optimisez les paramètres du microscope pour une excitation efficace des molécules de colorant.

Lorsque la lumière laser illumine le tissu, la hFTAA excite et rend fluorescente.

Une liaison à colorant plus forte dans les structures compactes entraîne des durées de vie plus longues, tandis qu’une liaison à colorant plus faible dans les structures moins compactes conduit à des durées de vie plus courtes.

Plus tard, le logiciel génère une image codée en couleur de l’agrégat.

Des couleurs, telles que le rouge et le jaune, apparaissent à la périphérie, indiquant des durées de vie de fluorescence plus courtes qui reflètent des structures amyloïdes moins compactes et instables.

Alors que des couleurs comme le bleu et le vert dan