Identification de sous-types de cellules ganglionnaires rétiniennes de souris par traçage fluorescent

0 vues • 3:20 min • May 29th, 2025

Placez un tissu rétinien isolé d’une souris transgénique avec des cellules ganglionnaires rétiniennes marquées par fluorescence, ou RGC, dans une chambre d’enregistrement.

L’information visuelle est relayée aux CGR, dont les axones la transmettent au cerveau via le nerf optique.

Les sous-types RGC se distinguent par les motifs ramifiés de leurs dendrites, qui se stratifient en sous-couches à l’intérieur de la couche rétinienne interne.

Aplatissez le tissu rétinien et fixez-le à l’aide d’un ancrage tissulaire.

Transférez la chambre sur une platine de microscope et perfuser une solution oxygénée pour maintenir la viabilité du CGR.

À l’aide de l’éclairage infrarouge, identifiez les CGR fluorescents.

Positionnez une pipette contenant un traceur fluorescent sur un RGC. Appliquez une

pression positive pour éviter le colmatage.

Passez à la pression négative, en aspirant la membrane dans la pipette pour former un joint. Appliquez une

aspiration pour rompre la membrane, en établissant une configuration de cellules entières qui facilite la diffusion du traceur dans les dendrites.

Observer la morphologie et la stratification dendritiques pour identifier les sous-types de CGR.

Lavez la rétine dans la

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Cellules ganglionnaires de la rétine