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Vertical Test Choix labyrinthe en T pour la réponse aux arthropodes odorants
Vertical Test Choix labyrinthe en T pour la réponse aux arthropodes odorants
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JoVE Journal Neuroscience
Vertical T-maze Choice Assay for Arthropod Response to Odorants

Vertical Test Choix labyrinthe en T pour la réponse aux arthropodes odorants

Full Text
15,423 Views
06:13 min
February 14, 2013

DOI: 10.3791/50229-v

Lukasz Stelinski1, Siddharth Tiwari1

1Entomology and Nematology Department,University of Florida

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article describes a vertical T-maze olfactometer designed to assess the behavioral responses of arthropods to various odorants. The device enables the measurement of both attraction and repulsion to different odor fields.

Key Study Components

Area of Science

  • Behavioral ecology
  • Olfactory response in insects
  • Experimental design in entomology

Background

  • The olfactometer is a tool for studying insect behavior in response to odors.
  • It allows researchers to create controlled environments for testing insect preferences.
  • Understanding these behaviors can provide insights into pest management and ecological interactions.
  • Previous studies have utilized similar setups to investigate various insect responses.

Purpose of Study

  • To measure the behavioral responses of insects to different odorants.
  • To determine the effectiveness of attractants and repellents.
  • To establish a reliable method for assessing insect choices in a controlled setting.

Methods Used

  • Construction of a vertical T-maze olfactometer with two odor ports.
  • Introduction of test subjects (CIDs) into the maze for observation.
  • Control tests to eliminate bias from environmental factors.
  • Recording of insect choices over a set observation period.

Main Results

  • Insects displayed distinct preferences for certain odors over others.
  • Statistical analysis confirmed significant differences in responses to various odor combinations.
  • The setup effectively measured both attraction and repulsion behaviors.
  • Results contribute to understanding insect olfactory mechanisms.

Conclusions

  • The vertical T-maze olfactometer is a valuable tool for studying insect behavior.
  • Findings can inform pest control strategies by identifying effective attractants and repellents.
  • Future research can expand on these methods to explore other insect species and odorants.

Frequently Asked Questions

What is the purpose of the olfactometer?
The olfactometer is used to measure insect behavioral responses to different odors.
How are the insects introduced into the maze?
Insects are placed in the maze and observed for their choice between odor fields.
What types of odors can be tested?
Various attractants and repellents can be tested using the olfactometer.
How is bias eliminated in the experiments?
Control tests with clean air and solvent are conducted to ensure no positional bias affects results.
What are the main findings of the study?
Insects showed significant preferences for certain odors, indicating their behavioral responses to olfactory cues.

Une verticale, labyrinthe en T olfactomètre est décrite pour le dosage de la réponse comportementale des arthropodes. L'olfactomètre permet à l'expérimentateur de mesurer les choix effectués par les sujets testés lorsqu'ils sont soumis à deux champs d'odeurs potentielles. Tant d'attraction et de répulsion à partir de substances odorantes peuvent être mesurés avec cet appareil.

L’objectif général de cette procédure est de mesurer le comportement des CID en réponse aux odorisants. Ceci est accompli en réalisant d’abord des TMA verticales dans lesquelles différents choix d’odeurs sont associés à différentes régions spatiales. La deuxième étape consiste à introduire des CID dans le temaze.

Ensuite, les CID sont observés pendant un certain temps pour voir quel bras du labyrinthe ils choisissent, et leur choix est enregistré. En fin de compte, le test de choix de témas verticaux est utilisé pour révéler la réponse comportementale des insectes aux odorants. Spectometer exploite les comportements naturels des insectes afin de tester la réponse des insectes à une variété d’attractifs et de répulsifs.

Dans un premier temps, trouvez une pièce à température contrôlée ou une chambre environnementale dans laquelle des assemblages et des essais expérimentaux peuvent avoir lieu. Commencer la construction de l’installation expérimentale avec l’assemblage d’un olfactomètre personnalisé à deux ports. L’olfactomètre se compose d’un tube de verre de 30 centimètres qui est divisé en deux ports séparés avec une bande de téflon formant une tase.

Chaque moitié est analogue à un bras d’un olfactomètre à deux choix, ce qui permet au sujet de choisir entre deux champs d’odeurs potentiels. Pour une diffusion optimale de la lumière, utilisez un récipient opaque pour enfermer l’ensemble expérimental. Après avoir monté l’olfactomètre TMA à la verticale, placez-le sous une ampoule fluorescente 900 luxe et connectez l’entrée d’insecte à l’olfactomètre.

Les sources d’odeurs sont logées dans une chambre de micro-extraction en phase solide. Connectez les bras de l’olfactomètre aux sources d’odeurs à l’aide de connecteurs de tube en verre téflon. Ensuite, connectez le système de distribution d’air à une source externe d’air humidifié et purifié au carbone qui est sous pression constante.

Pour préparer les sources d’odeurs, dissolvez les échantillons chimiques souhaités dans un solvant approprié. Pipetez-le sur une mèche en coton. Imprégnez également une mèche de coton avec du solvant uniquement pour créer un échantillon de contrôle.

Enveloppez les mèches en coton traité et de contrôle dans des tissus de laboratoire pour éviter une contamination importante de la verrerie. Lorsqu’un échantillon est nécessaire, placez-le dans l’une des chambres sources. Avant de tester avec une odeur, exposez les Cates à l’air pur par rapport à l’air pur et au solvant par rapport à l’air pur dans l’olfactomètre T MAs.

Cela sert à vérifier l’absence de biais de position ou d’un solvant efficace sur les sujets testés. Pour tester l’air pur par rapport à l’air pur, commencez le flux d’air purifié et humidifié à travers des chambres de source vides via deux pompes connectées à un système de distribution d’air. Maintenez le débit d’air à 0,1 litre par minute à travers les deux bras de l’olfactomètre.

Assurez-vous que toutes les observations seront effectuées à une température et une humidité relative standard. Commencez maintenant ce test de contrôle en plaçant environ 20 SMSN dans la chambre. Observez le SMSN pendant un intervalle prédéterminé entre 100 et 300 secondes.

Le poids leur permet de réagir à l’environnement. Une fois le temps écoulé, notez la réponse des CID à l’environnement de test. Marquez un choix du bras gauche pour chaque SLI qui traverse la partie gauche du T aze au-dessus du point le plus bas du séparateur Marquez de manière analogue pour le bras droit.

Marquez un choix du bras de déclenchement si aucun autre choix n’est fait. Une fois que toutes les réponses ont été enregistrées, collectez les CID à l’aide d’un aspirateur. Effectuez un test similaire pour le solvant par rapport à l’air pur en introduisant une mèche de solvant dans l’une des chambres sources.

Utilisez un autre ensemble de CID pour les observations après les exécutions de contrôle. Commencez l’analyse des odeurs en attribuant une source d’odeur au hasard à l’un des bras de l’olfactomètre au début de chaque essai biologique. Inversez cette position après un test sur 10 sujets de test au moins pour éliminer le biais de position potentiel.

Encore une fois, vérifiez que le flux d’air, la température et l’humidité n’ont pas changé. Introduire un ou plusieurs satellites dans la chambre par cycle Pour le test ici, environ 10 sont introduits. Testez la réponse d’un minimum de 30 et jusqu’à 120 sujets de test par combinaison d’odeurs.

Observez les sates pendant 100 à 300 secondes pour leur permettre de présenter une réponse comportementale. L’intervalle de temps doit être établi à l’avance. Enregistrez les choix de bras des sujets de test en notant un choix d’odeur lorsqu’un sujet de test entre dans le bras de l’olfactomètre avec l’odeur ou un choix de bras de contrôle ou un choix de bras de relâchement.

Enfin, une fois que toutes les observations ont été enregistrées, retirez les CID à l’aide d’un aspirateur avant d’utiliser la configuration pour un traitement des odeurs différent, nettoyez soigneusement l’olfactomètre et le tube de raccordement avec une solution de savon à 2 % et faites cuire les composants en verre à 200 degrés Fahrenheit pendant 24 heures. Cette parcelle a choisi la réponse des agrumes asiatiques aux substances volatiles des plantes hôtes des agrumes par rapport au contrôle de l’air pur. Cette parcelle a choisi la réponse des agrumes asiatiques aux agrumes volatils par rapport aux agrumes volatils co-libérés avec le diméthyl di sulfure, un répulsif dans les graphiques supérieur et inférieur.

Les colonnes étiquetées par une lettre sont statistiquement significativement différentes les unes des autres avec un niveau de confiance supérieur à 95 %. Selon une analyse à sens unique de la variance suivie de tui. Honnêtement, les faits de différence significative sont très largement dans leur conception et sont souvent adaptés, conçus pour le problème spécifique des insectes qui est étudié.

Le présent article décrit la conception et l’utilisation d’un t masal orienté verticalement. Réflectomètre utilisé pour mesurer la réponse des insectes à une variété d’odeurs.

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Biochimie Numéro 72 biologie moléculaire les protocoles de base Entomologie comportement Eucaryotes produits chimiques organiques Actions chimiques et utilisations Sciences de la vie (général) sciences du comportement le comportement des arthropodes écologie chimique olfactomètre chimiotactisme l'olfaction l'attraction la répulsion odorant labyrinthe en T psylle Diaphorina citri Insecte anthropod modèle insectes

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