Name: Vertical Test Choix labyrinthe en T pour la réponse aux arthropodes odorants (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-02-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 13 s
Description: Découvrez l'olfactomètre en T vertical pour mesurer les réponses comportementales des insectes aux odorants attractifs et répulsifs. Cette méthode permet d'évaluer les préférences olfactives dans un environnement contrôlé.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

La recherche Citrus and Development Foundation est reconnu pour fournir des fonds. Merci à Angel Hoyte et Michael Flores pour la réalisation des essais biologiques.

<ol><li> Assemblée d&#39;une coutume conçue, deux ports divisée T-olfactomètre décrit précédemment dans Mann et al. 10 est représentée sur la figure 1. L&#39;olfactomètre est constitué d&#39;un tube en verre 30 cm qui est bifurquée dans deux orifices distincts avec une bande de téflon formant un labyrinthe en T. Chaque moitié est analogue à un bras d&#39;un olfactomètre de style 2-choix permettant au sujet d&#39;essai pour choisir entre deux champs d&#39;odeurs potentielles. <ol><li> Tests d&#39;assemblage et ultérieur doit avoir lieu dans une salle à température contrôlée ou de la chambre de l&#39;environnement. </li><li> Mont de verre labyrinthe en T olfactomètre verticalement, comme représenté dans la figure 1 et le positionner sous une lampe fluorescente ampoule 900 lux. </li><li> Pour une diffusion optimale de la lumière, l&#39;ensemble doit être monté dans un 1,0 x 0,6 x 0,6 m contenant opaque afin de maximiser la diffusion uniforme de la lumière. </li><li> Connectez les bras olfactomètre à des sources d&#39;odeurs qui seront logés en phase solide micro-extraction à la source exploitation / odeur chamber (SPMEC) (ARS, Inc, Gainesville, FL) via téflon; raccords de tube en verre. Chaque SPMEC est constitué d&#39;un tube de verre droit (17,5 cm de longueur x 3,5 cm de largeur) supporté avec une entrée et sortie de soupape pour les flux d&#39;air entrant et sortant (figure 1). </li><li> Connecter le système d&#39;alimentation en air à une source externe d&#39;air humidifié et purifié de carbone qui est sous pression constante (le système de distribution d&#39;air présente à la fois un filtre à charbon pour la purification de l&#39;air intérieur et un barboteur d&#39;air pour l&#39;humidification, si les sources externes ne sont pas disponibles). </li><li> Dissoudre échantillons chimiques désirées dans un diluant approprié (solvant) et la pipette sur un substrat à libération lente comme une mèche de coton (Petty John Packaging, Inc, Concord, Caroline du Nord). Le traitement de contrôle devrait consister en une mèche de coton imprégnés de solvant seulement. </li><li> Pour éviter une contamination importante de la verrerie, envelopper les mèches de coton traités et témoins dans les tissus de laboratoire (Kimwipes, Kimberly-Clark, Roswell, Géorgie) et mettre dans les bras SPMEC deux (ARS, Inc, Gainesville, FL). Dans le cas des échantillons de plantes vivantes, une chambre de collecte guillotine volatile peut être attaché à l&#39;olfactomètre contenant les traitements à la place du SPMEC (Figure 1). </li><li> Fournir de l&#39;air humidifié et purifié à travers le SPMEC (ou chambre guillotine volatile) via deux pompes raccordées à un système de distribution d&#39;air (figure 1). Maintenir un débit d&#39;air de 0,1 L / min à travers les deux bras de l&#39;olfactomètre. </li></ol></li><li> Employant olfactomètre pour tester la réaction des arthropodes aux répulsifs putatifs. Dans la présente description, un insecte hémiptères, psylle asiatique des agrumes, Diaphorina citri, a été utilisé comme un arthropode test. Réponse a été testée par les volatiles agrumes, seul ou en combinaison avec un (disulfure de diméthyle) et repoussant l&#39;air pur en tant que sources d&#39;odeurs. <ol><li> Effectuer toutes les expériences à une température et une humidité relative normalisée. </li><li> Avant tous les tests, exposer test Couleur sujets pour nettoyer l&#39;air de l&#39;air par rapport à l&#39;air propre ou solvant par rapport propre à l&#39;olfactomètre labyrinthe en T pour vérifier l&#39;absence de biais positionnel ou un effet de solvant sur le comportement du sujet de test. </li><li> Assigner une source de l&#39;odeur de façon aléatoire l&#39;une des branches de l&#39;olfactomètre au début de chaque essai biologique. Inverser cette position toutes les 10 sujets testés doser, au minimum, afin d&#39;éliminer la possibilité de biais de position. </li><li> Tester la réponse d&#39;un minimum de 30 (et jusqu&#39;à 120) des sujets de test par combinaison de traitement. </li><li> Permettez-test de sujets 100-300 sec à présenter une réponse comportementale basée sur la réponse précédemment établi (latence) d&#39;intervalle. </li><li> Indiquez si un objet pénètre dans le bras traitement, bras de commande ou reste dans le port de libération ou au-dessous du pôle T-labyrinthe. </li><li> Note choix bras de traitement ou de contrôle quand un sujet de test traverse la division dans le labyrinthe en T et se déplace dans chaque bras olfactomètre. </li><li> Note choix bras de libération lorsqu&#39;un test sous reste dans l&#39;orifice d&#39;échappement ou au-dessous du pôle T-labyrinthe. </li><li> Nettoyez l&#39;olfactomètre et tubes de liaison à fond avec une solution savonneuse 2% et faire cuire les éléments en verre à 200 ° F entre l&#39;utilisation de traitements d&#39;odeurs différentes. </li><li> Pour les essais dans lesquels putatifs traitements répulsifs sont présentés dans l&#39;olfactomètre labyrinthe en T avec ou sans traitement chimique par rapport à l&#39;air pur, de comparer le nombre de sujets de test restantes au point de restitution et ne pénètrent pas dans l&#39;olfactomètre entre les traitements par une analyse de variance ( ANOVA) suivie d&#39;un test HSD de Tukey (α &lt;0,05). Dans les cas où les sujets d&#39;expérience quittent le bras de libération, comparez le numéro de choisir le groupe témoin, contre le bras de traitement avec chi carré (χ 2) l&#39;analyse à α &lt;0,05. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Resh, R. H., Cardé, R. T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aResh%2C+RH+%22Encyclopedia+of+Insects%22">Encyclopedia of Insects</a>. , Academic Press, Elsevier Science. USA. (2003).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Biorational+tree-fruit+pest+management%22">Biorational tree-fruit pest management</a>. Aluja, M., Lesky, T. C., Vincent, C. , CABI. USA. (2009).</li>
<li>Rodriquez-Saona, C., Stelinski, L. L. Behavior-modifying strategies in IPM: Theory and Practice. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRodriquez-Saona%2C+C+%22Integrated+Pest+Management%3A+Innovation+-+Development+Process%22">Integrated Pest Management: Innovation - Development Process</a>. Peshin, R., Dhawan, A. K. , Springer. NY. 261-311 (2009).</li>
<li>Cardé, R. T., Millar, J. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCard%C3%A9%2C+RT+%22Advances+in+insect+chemical+ecology%22">Advances in insect chemical ecology</a>. , Cambridge University Press. UK. (2004).</li>
<li>Knight, A. L., Stelinski, L. L., Hebert, V., Gut, L., Light, D., Brunner, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+dispensers+simultaneously+releasing+pear+ester+and+sex+pheromone+for+disruption+of+codling+moth+%28Lepidoptera%3A+Tortricidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Entomology%22%5BJournal%5D)">Novel dispensers simultaneously releasing pear ester and sex pheromone for disruption of codling moth (Lepidoptera: Tortricidae).</a> Journal of Applied Entomology. 136 (1-2), 79-86 (2012).</li>
<li>Mann, R. S., Tiwari, S., Smoot, J. M., Rouseff, R. L., Stelinski, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repellency+and+toxicity+of+plant-based+essential+oils+and+their+constituents+against+Diaphorina+citri+Kuwayama+%28Hemiptera%3A+Psyllidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Entomology%22%5BJournal%5D)">Repellency and toxicity of plant-based essential oils and their constituents against Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Psyllidae).</a> Journal of Applied Entomology. 136 (1-2), 87-96 (2012).</li>
<li>Forbes, A. A., Powell, H. Q., Stelinski, L. L., Smith, J. J., Feder, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sequential+sympatric+speciation+across+trophic+levels%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Sequential sympatric speciation across trophic levels.</a> Science. 323 (5915), 776-779 (2009).</li>
<li>Kennedy, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+visual+responses+of+flying+mosquitos%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Zoological+Society+of+London+A%22%5BJournal%5D)">The visual responses of flying mosquitos.</a> Proceedings of the Zoological Society of London A. 109 (4), 221-242 (1940).</li>
<li>Miller, J. R., Roelofs, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained-flight+tunnel+for+measuring+insect+responses+to+wind-borne+sex+pheromones%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">Sustained-flight tunnel for measuring insect responses to wind-borne sex pheromones.</a> Journal of Chemical Ecology. 4 (2), 187-198 (1978).</li>
<li>Mann, R. S., Rouseff, R. L., Smoot, J. M., Castle, W. S., Stelinski, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sulfur+volatiles+from+Allium+spp.+affect+Asian+citrus+psyllid%2C+Diaphorina+citri+Kuwayama+%28Hemiptera%3A+Psyllidae%29%2C+response+to+citrus+volatiles%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+Entomological+Research%22%5BJournal%5D)">Sulfur volatiles from Allium spp. affect Asian citrus psyllid, Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Psyllidae), response to citrus volatiles.</a> Bulletin of Entomological Research. 101 (1), 89-97 (2011).</li>
<li>Onagbola, E. O., Rouseff, R. L., Smoot, J. M., Stelinski, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guava+leaf+volatiles+and+dimethyl+disulfide+inhibit+response+of+Diaphorina+citri+Kuwayama+to+host+plant+volatiles%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Entomology%22%5BJournal%5D)">Guava leaf volatiles and dimethyl disulfide inhibit response of Diaphorina citri Kuwayama to host plant volatiles.</a> Journal of Applied Entomology. 135 (6), 404-414 (2011).</li>
<li>Baker, T. C., Linn, C. E. Wind tunnels in pheromone research. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBaker%2C+TC+%22Techniques+in+Pheromone+Research%22">Techniques in Pheromone Research</a>. Hummel, H., Miller, T. A. , Springer-Verlag. New York. 75-110 (1984).</li>
<li>Stelinski, L. L., Rodriguez-Saona, C., Meyer, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recognition+of+foreign+oviposition+marking+pheromone+in+a+multitrophic+context%5BTitle%5D)+AND+%22Naturwissenschaften%22%5BJournal%5D)">Recognition of foreign oviposition marking pheromone in a multitrophic context.</a> Naturwissenschaften. 96 (5), 585-592 (2009).</li>
<li>Gökçe, A., Stelinski, L. L., Whalon, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+electrophysiological+responses+of+leafroller+moths+to+selected+plant+extracts%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Behavioral and electrophysiological responses of leafroller moths to selected plant extracts.</a> Environmental Entomology. 34 (6), 1426-1432 (2005).</li>
<li>Ali, J. G., Alborn, H. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((herbivore-induced+plant+volatile+increases+biological+control+activity+of+multiple+beneficial+nematode+species+in+distinct+habitats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">herbivore-induced plant volatile increases biological control activity of multiple beneficial nematode species in distinct habitats.</a> PLoS ONE. 7 (6), e38146(2012).</li>
<li>Mann, R. S., Ali, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induced+release+of+a+plant+defense+volatile+%27deceptively%27+attracts+insect+vectors+to+plants+infected+with+a+bacterial+pathogen%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathogens%22%5BJournal%5D)">Induced release of a plant defense volatile 'deceptively' attracts insect vectors to plants infected with a bacterial pathogen.</a> PLoS Pathogens. 8 (3), e1002610(2012).</li>
</ol>

L&#39;auteur a reçu un financement qui a été fourni par le Citrus Research and Development Foundation.

Ici, un dispositif de dosage et le protocole décrit pour la mesure de la réponse de petits arthropodes (insectes: Hemiptera: Psyllidae) vers odorants. Le procédé comprend le choix d&#39;un test, permettant à l&#39;insecte de faire un choix entre deux champs odorants dans le cas des essais évaluant un attractif putatif. En outre, le sujet peut afficher trois types de comportements en laissant le bras de libération et en entrant un ou l&#39;autre des deux champs d&#39;odeurs potentielles, ou de rester dans le bras de libération, dans le cas des essais de répulsion. L&#39;olfactomètre permet un débit de données de collecte élevé, car il tire parti de la geotactic négatif (tendance à se déplacer vers le haut) et phototactiques positif (tendance à se déplacer vers la lumière) naturelle réponse comportementale de nombreux arthropodes. Bien que la présente démonstration utilise un exemple des insectes psylle essai, le dosage peut être facilement adapté pour les arthropodes largement, à la fois ceux qui utilisent vol ou la marche comme principaux modes de transport. <p class=&quot;Jove_content&quot;&gt; olfactomètres conçus pour mesurer la réaction des insectes ont été initialement développées il ya plusieurs décennies et ont joué un rôle majeur dans la compréhension attractifs et répulsifs d&#39;insectes 12. Les conceptions spécifiques de ces olfactomètres varient considérablement; cependant, des variations sur le thème général de l&#39;épreuve à deux choix décrits ici, ainsi que, semblables Y-tube tests ont été souvent utilisé pour mesurer la réponse des arthropodes aux produits chimiques. Tunnels de vol plus susceptibles de causer un vol soutenu d&#39;insectes 9 ont également donné lieu à la collecte des données inédites élucider les mécanismes fondamentaux du vol des insectes et d&#39;orientation pour les écomones, ainsi que l&#39;information des données, l&#39;utilisation pratique des outils de lutte antiparasitaire. Il est souvent nécessaire de concevoir sur mesure un olfactomètre et l&#39;instrumentation associée pour la biologie des arthropodes du sujet de test spécifique. Ces olfactomètres qui peuvent être utilisés au sein d&#39;un groupe général d&#39;insectes sont plus utiles que les specific à un petit groupe, mais parfois l&#39;importance économique d&#39;un petit groupe d&#39;insectes dicte la nécessité du développement d&#39;un olfactomètre très spécifique et technique de dosage. La conception actuellement décrites s&#39;appuie sur des techniques d&#39;arthropodes déjà familiers. Elle permet une plus standard à deux choix test de Y-tube bioessais dans lequel l&#39;arène expérimentale ou test à choix prend la forme d&#39;un dispositif en verre en forme de Y 7. En règle générale, un bras d&#39;un tel Y-tube recevrez un traitement odorant, tandis que l&#39;autre sera laissé vide 13. Variations sur olfactomètres peuvent comprendre outre de multiples bras rayonnants 14 et même plus de support d&#39;un sol pour doser le comportement des organismes mobiles à travers le sol 15. Dans l&#39;élaboration de ces olfactomètres et essais associés, il est important de considérer à quel point les conditions naturelles sont répliquées et donc la véritable pertinence des réponses comportementales évaluées en termes de biologie des sujets du test. Pour à large mesure, les données collectées ne seront aussi utiles que la pertinence de l&#39;essai biologique du comportement à l&#39;égard de l&#39;écologie comportementale de l&#39;organisme 16. L&#39;olfactomètre actuellement décrites et bio-essai de comportement est spécialement conçu pour un insecte hémiptères qui tend à initier vol sous forme de courtes «saute» 16. L&#39;orientation verticale de l&#39;olfactomètre et le dispositif de source de lumière de faciliter le déclenchement du déplacement des insectes et donc le comportement ultérieur orientation induite chimiquement peuvent être dosés de manière efficace et avec un débit élevé. Ce dispositif d&#39;analyse comportementale peut probablement être utilisé pour un large éventail de voler ou marcher taxons d&#39;arthropodes ou pourrait être aussi facilement modifiés pour s&#39;adapter à la nécessité de la non-arthropodes organismes.

Arthropodes (y compris les insectes et les arachnides) sont souvent définis comme des parasites, soit parce qu&#39;ils en concurrence avec la consommation humaine en milieu agricole ou urbain ou transmettre des agents pathogènes responsables de la maladie 1. Une grande quantité d&#39;investissement est réalisé dans le développement d&#39;outils de contrôle de ces parasites. Ces outils peuvent varier considérablement et des progrès significatifs ont été accomplis dans le développement d&#39;outils bio-rationnels que ce soit de modifier ou d&#39;exploiter le comportement naturel des ravageurs avec l&#39;utilisation d&#39;attractifs ou répulsifs comportementaux 2,3. Arthropodes nuisibles reposent souvent sur ​​des signaux olfactifs ou repères pour s&#39;accoupler et / ou de l&#39;hôte emplacement 4. Par conséquent découverte des attractifs ou répulsifs efficaces contre les organismes nuisibles peut souvent mener au développement d&#39;outils de contrôle. Ce processus de découverte comprend plusieurs étapes. Tout d&#39;abord, le comportement naturel du sujet de test doit être comprise. Par exemple, il faut vérifier si un sexe d&#39;une espèce donnée attire l&#39;inversele sexe pour emplacement de la contrainte. Si c&#39;est le cas, il faut déterminer si cette attraction est médiée par un produit chimique, et où cette substance est produite. D&#39;autres mesures consistent à déterminer si le produit chimique est produit et son éventuelle identification. Tout au long de cette procédure, (insectes ou acariens) fait l&#39;objet de test de réponse comportementale aux substances odorantes doivent être testés. Initialement, le comportement du sujet de test sera testé pour la matière naturelle. Par exemple, la réponse d&#39;un papillon mâle peut être testé à celle de l&#39;extrait de son congénère femelle glande phéromone. Sinon, la réponse d&#39;un herbivore aux odeurs naturelles de la plante hôte peut être testé. Bien que ces enquêtes ont souvent une orientation pratique sur le développement des outils de gestion de 5,6, ils peuvent également être appliqués à la recherche qui porte sur des questions plus fondamentales telles que la spéciation 7. Les étapes suivantes impliquent de tester la réponse de l&#39;arthropode à des versions synthétiques de produits naturels identifiés. Uomprendre comment répondre aux arthropodes produits chimiques nécessite le développement d&#39;outils appropriés pour mesurer leur comportement. Les données générées par ces outils dépendra de la façon dont l&#39;enquêteur est capable de mesurer des comportements naturels dans un environnement contrôlé. Plus il ya six décennies, olfactomètres vol et de tunnels soutenus ont été développés pour mesurer la réponse des insectes à 8,9 odorants. Olfactomètres varier de manière significative dans la conception et sont souvent adaptés à l&#39;insecte ou un problème spécifique à l&#39;étude. Le but de cet article est de décrire la conception et l&#39;utilisation d&#39;une orientation verticale, labyrinthe en T olfactomètre pour mesurer la réponse des insectes aux substances odorantes (figure 1). L&#39;orientation verticale olfactomètre tire profit de la géotaxie négatif (tendance à se déplacer vers le haut) exposées par de nombreux insectes. Une source lumineuse placée directement au-dessus de l&#39;olfactomètre tire parti de la phototaxie positif (tendance à se déplacer vers la source de lumière) présenté par de nombreux insectes. Le olfactommètre est particulièrement utile pour les insectes hémiptères qui ont tendance à ne pas exposer le mouvement facilement dans olfactomètres orientés horizontalement et qui sont fortement influencés par l&#39;intensité de la lumière par rapport à l&#39;orientation. Cependant, ce dispositif peut être utilisé pour un large éventail d&#39;insectes volants et rampants, ainsi que des arachnides. L&#39;olfactomètre peut être utilisé pour évaluer à la fois attractifs et répulsifs. Dans le cas des appâts, le champ d&#39;odeur bifurqué (Figure 1) est établi avec l&#39;attractif présumé libéré d&#39;un côté par rapport à l&#39;air pur sorti sur le côté opposé. Un choix est enregistré lorsque l&#39;insecte sorti à la base de l&#39;olfactomètre choisit l&#39;un des deux champs d&#39;odeurs. Dans le cas des répulsifs, un troisième comportement est possible. En plus des mouvements vers le haut dans l&#39;un des deux champs d&#39;odeur, l&#39;absence de mouvement vers le haut peut être enregistré indiquant un stimulus non-réactif ou pour repousser les champs de stimulus soit odeurs.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom de l&#39;équipement </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> Deux ports divisée T-olfactomètre </td><td> Analytical Research Systems (ARS), Inc Gainesville, FL </td><td> Aucun (sur mesure) </td><td> S&#39;il n&#39;est pas disponible à partir de ARS, Sud scientifique (Gainesville, Floride) a également construit actuellement et distribue des équipements tels. </td></tr><tr><td> En phase solide micro-extraction en exploitation / chambre source de l&#39;odeur de téflon; raccords de tube en verre. </td><td> Analytical Research Systems (ARS), Inc Gainesville, FL </td><td> RV-R3 </td><td> Voir ci-dessus commentaire </td></tr><tr><td> Système de distribution d&#39;air </td><td> Analytical Research Systems (ARS), Inc Gainesville, FL </td><td> HADS-2AFM2C.4 </td><td> Voir ci-dessus commentaire </td></tr><tr><td> Guillotine chambre </td><td> Analytique Researc Systems (ARS), Inc Gainesville, FL </td><td> L3GP3 </td><td> Voir ci-dessus commentaire </td></tr></tbody></table>

vertical test choix labyrinthe en t pour la réponse aux arthropodes odorants

Vertical T-maze Choice Assay for Arthropod Response to Odorants

Compte tenu de l&#39;importance économique des insectes et des arachnides comme les ravageurs des cultures agricoles, les milieux urbains ou en tant que vecteurs de maladies des plantes et de l&#39;homme, diverses technologies sont développées comme des outils de contrôle. Un sous-ensemble de ces outils met l&#39;accent sur la modification du comportement des arthropodes par attraction ou de répulsion. Par conséquent, les arthropodes sont souvent l&#39;objet d&#39;enquêtes comportementales. Différents outils ont été développés pour mesurer le comportement des arthropodes, y compris les tunnels à vent, moulins, vol servospheres, et divers types de olfactomètres. L&#39;objectif de ces outils est de mesurer la réponse des insectes ou arachnide à des signaux visuels ou olfactifs plus souvent. Le labyrinthe en T vertical oflactometer décrit ici mesure des choix effectués par les insectes en réponse à des attractifs ou répulsifs. Il s&#39;agit d&#39;un dispositif d&#39;analyse à haut débit qui tire parti de la phototaxie positive (attraction à la lumière) et négatifs (géotaxie tendance à marcher ou voler vers le haut) exposées par des arthropodes nombreux. Le olfactometer compose d&#39;un tube en verre de 30 cm qui est divisé en deux avec une bande de Téflon formant un labyrinthe en T. Chaque moitié sert un bras de l&#39;olfactomètre permettant aux sujets d&#39;expérience à faire un choix entre deux champs d&#39;odeurs potentielles dans des essais impliquant des substances attractives. Dans les essais impliquant des répulsifs, l&#39;absence de réponse normale à des attractifs connus peuvent également être mesurée par une troisième variable.

Activité du psylle asiatique des agrumes (Diaphorina citri) adultes aux odeurs de leurs natal volatiles de la plante hôte (agrumes) est représenté sur la figure 2A. Adultes de façon significative (α &lt;0,05) plus choisi le bras de l&#39;olfactomètre labyrinthe en T recevoir les odeurs de plantes d&#39;agrumes de vie par rapport à un blanc (pureté de l&#39;air) de commande. Un exemple de répulsion est montré dans la figure 2B. Dans ce cas, les insectes ont été exposés à un bras de substances volatiles T-recevant labyrinthe d&#39;agrumes, tandis que le second bras reçu volatiles d&#39;une plante d&#39;agrumes qui a été traitée avec le plus connu répulsif, le disulfure de diméthyle 11. Dans ce cas, trois types de comportements ont été observés. Le nombre de psylles arrêtés au bras de libération et de ne pas répondre ne diffèrent pas statistiquement à partir du numéro entrant dans le bras recevant les odeurs de plantes d&#39;agrumes seuls (figure 2B). Toutefois, aucune psylles entré dans le bras contenant til plante hôte volatile en cas de co-présenté avec le répulsif (figure 2B). <img alt="Figure 1" src="/files/ftp_upload/50229/50229fig1.jpg" /> Figure 1. Schéma de principe d&#39;orientation verticale labyrinthe en T olfactomètre joint au système de distribution d&#39;air et appareils de traitement des odeurs de libération. Le diagramme est une adaptation de la figure 1 dans Mann et coll. 10. Un objet de test est placé individuellement dans la chambre de libération de l&#39;orifice 2-T-olfactomètre divisé. Il se déplace vers les odeurs grâce à une vanne qui permet un mouvement contrôlé vers le haut dans l&#39;olfactomètre et empêche l&#39;insecte rampant dans la zone du point de libération. Le tube de 10 cm bifurque après la valeur à la ferme. Une réponse positive à une odeur est enregistré une fois l&#39;insecte se déplace de 0,5 cm dans un côté spécifique de la division. La chambre de collecte guillotine volatile peut être utilisée à la place d&#39;un solide pvvihe micro-extraction de maintien / chambre de source d&#39;odeur (SPMEC) en tant que source de l&#39;odeur. <img alt="Figure 2" fo:content-width="3.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50229/50229fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50229/50229fig2.jpg" /> Figure 2. Réponse du psylle asiatique des agrumes (Diaphorina citri) adultes aux substances volatiles de plantes hôtes d&#39;agrumes contre contrôle qualité de l&#39;air (A) ou volatiles agrumes contre volatiles agrumes co-publiés avec un (diméthyl disulfure) et hydrofuge (B) dans une orientation verticale T labyrinthe en olfactomètre Figure 2A:. One-analyse de variance (ANOVA) suivie d&#39;un test HSD de Tukey (α &lt;0,05) a été réalisée pour comparer le nombre de psylle de faire un choix entre les deux bras (2 traitements, n = 120). Colonnes indiquées par des lettres différentes sont significativement différentes les unes des autres (α &lt;0,05) Figure 2B:. Sens unique analysest la variance (ANOVA) suivie d&#39;un test HSD de Tukey (α &lt;0,05) a été réalisée pour comparer le nombre de psylle de faire un choix entre les deux bras ou restant dans le point de rejet (3 traitements, n = 120). Colonnes indiquées par des lettres différentes sont significativement différentes les unes des autres (α &lt;0,05).

Une verticale, labyrinthe en T olfactomètre est décrite pour le dosage de la réponse comportementale des arthropodes. L&#39;olfactomètre permet à l&#39;expérimentateur de mesurer les choix effectués par les sujets testés lorsqu&#39;ils sont soumis à deux champs d&#39;odeurs potentielles. Tant d&#39;attraction et de répulsion à partir de substances odorantes peuvent être mesurés avec cet appareil.

Vertical Test Choix labyrinthe en T pour la réponse aux arthropodes odorants

Given the economic importance of insects and arachnids as pests of agricultural crops, urban environments or as vectors of plant and human diseases, ...

L'objectif général de cette procédure est de mesurer le comportement des CID en réponse à des odorants. Cela est réalisé en premier lieu en concevant un labyrinthe vertical (TMAs) dans lequel différents choix d'odeurs sont associés à différentes régions spatiales. La deuxième étape consiste à introduire les CID dans le labyrinthe.Ensuite, les CIP sont observées pendant une durée déterminée afin de noter vers quelle branche du labyrinthe elles se dirigent, et ce choix est enregistré. En définitive, le test de choix vertical TE masal permet de révéler la réponse comportementale des insectes aux odorants. Le spectromètre TE masal vertical exploite les comportements naturels des insectes afin de tester leur réponse à divers attractants et répulsifs.Comme première étape, trouver une pièce à température contrôlée ou une chambre environnementale où pourront avoir lieu les montages expérimentaux et les tests. Commencer la construction du dispositif expérimental par l'assemblage d'un olfactomètre personnalisé à deux voies. L'olfactomètre est constitué d'un tube en verre de 30 centimètres divisé en deux voies distinctes, une bande en téflon formant une cloison.Chaque moitié est analogue à un bras d'un olfactomètre à deux choix, permettant au sujet testé de choisir entre deux champs odorants potentiels. Pour une diffusion optimale de la lumière, utilisez un récipient opaque afin d'entourer le dispositif expérimental. Après avoir monté l'olfactomètre TMAs verticalement, placez-le sous une ampoule fluorescente de 900 lux et reliez l'entrée pour insectes à l'olfactomètre.Les sources d'odeur sont placées dans une chambre de source à extraction par micro-extraction en phase solide. Connectez les bras de l'olfactomètre aux sources d'odeur à l'aide de raccords en tube de verre téfloné. Ensuite, reliez le système de distribution d'air à une source externe d'air humidifié et purifié au carbone maintenu sous pression constante.Pour préparer les sources d'odeur, dissolvez les échantillons chimiques souhaités dans un solvant approprié. Prélevez ce mélange à l’aide d’une pipette et déposez-le sur une mèche en coton. Imprégnez également une mèche en coton avec le solvant seul afin de créer un échantillon témoin.Envelopper les mèches de coton traitées et témoins dans des mousses de laboratoire afin d'éviter une contamination importante du matériel en verre. Lorsqu'un échantillon est nécessaire, le placer dans l'une des chambres de prélèvement. Avant les tests avec une odeur, exposer les Cates à de l'air pur par rapport à de l'air pur, puis à un solvant par rapport à de l'air pur dans l'olfactomètre T MAs.Cela permet de vérifier l'absence de biais positionnel ou d'un solvant efficace sur les sujets testés. Pour comparer de l'air pur à de l'air pur, faites circuler de l'air purifié et humidifié à travers des chambres sources vides à l'aide de deux pompes reliées à un système de distribution d'air. Maintenez le débit d'air à 0,1 litre par minute à travers les deux branches de l'olfactomètre.Veillez à ce que toutes les observations soient effectuées à une température et une humidité relative standard. Commencez maintenant ce test témoin en plaçant environ 20 SIDS dans la chambre. Observez les SIDS pendant un intervalle prédéterminé compris entre 100 et 300 secondes.Le poids leur permet de réagir à l'environnement. Une fois le temps écoulé, enregistrez la réponse des CID au milieu test. Attribuez un score pour le choix du bras gauche pour chaque SLI qui pénètre dans la partie gauche du labyrinthe en T au-dessus du point le plus bas du séparateur. Procédez de manière analogue pour attribuer un score au bras droit.Attribuez un score à un choix du bras de libération s'il n'y a pas d'autre choix effectué. Une fois toutes les réponses enregistrées, collectez les CIDs à l'aide d'un aspirateur. Réalisez un test similaire pour le solvant par rapport à l'air pur en introduisant une mèche imprégnée de solvant dans l'une des chambres de source.Utilisez un ensemble différent de CIDs pour les observations après les essais témoins. Commencez le test olfactométrique en attribuant aléatoirement une source odorante à l'un des bras de l'olfactomètre au début de chaque bioessai. Inversez cette position après au moins 10 sujets testés afin d'éliminer tout biais potentiel dû à la position.De nouveau, vérifiez que le débit d'air, la température et l'humidité n'ont pas changé. Introduisez un ou plusieurs sates dans la chambre par essai. Pour le test présenté ici, environ 10 sont introduits. Testez la réponse d'au moins 30 et jusqu'à 120 sujets par combinaison d'odeurs.Observer les animaux pendant 100 à 300 secondes afin de permettre l'expression d'une réponse comportementale. L'intervalle de temps doit être défini au préalable. Enregistrer les choix de bras des sujets d'essai en notant un choix d'odeur lorsque le sujet entre dans le bras du olfactomètre contenant l'odeur, ou un choix de bras témoin, ou un choix de bras de libération.Enfin, une fois toutes les observations enregistrées, retirez les CID à l’aide d’un aspirateur avant d’utiliser le dispositif pour un autre traitement odorant, nettoyez soigneusement l’olfactomètre et le tube de connexion avec une solution de SAVON à 2 %, puis faites cuire les composants en verre à 200 degrés Fahrenheit pendant 24 heures. Ce graphique illustre la réponse de l’agrile asiatique aux composés volatils émanant des plantes hôtes citriques par rapport au témoin d’air pur. Ce graphique illustre la réponse de l’agrile asiatique aux volatils citriques par rapport aux volatils citriques co-émis avec du diméthyl disulfure, un répulsif présent dans les deux graphiques, supérieur et inférieur.Les colonnes désignées par une lettre sont statistiquement différentes les unes des autres avec un degré de confiance supérieur à 95 %. Selon une analyse de variance à un facteur suivie du test de Tukey de différence honnêtement significative, les pièges varient considérablement dans leur conception et sont souvent adaptés, voire spécialement conçus, pour le problème spécifique d'insectes étudié.L'article actuel décrit la conception et l'utilisation d'un t masal orienté verticalement. Réflectomètre utilisé pour mesurer la réponse des insectes à une variété d'odeurs.

vertical-t-maze-choice-assay-for-arthropod-response-to-odorants

Research

Recherche

JoVE Journal

Neuroscience

Neurosciences

Dans cet article, vidéo, nous décrivons une nouvelle méthode permettant la construction de gradients odorant avec des géométries stable et contrôlable. Nous illustrer brièvement comment ces gradients peuvent être utilisées pour dépister les défauts olfactifs (anosmie complète et partielle) et d'étudier les caractéristiques plus subtiles du comportement chimiotaxie.

Haute résolution de mesure du comportement Odor-Driven dans les larves de drosophile

Larves de drosophile sont capables de s'associer avec des stimuli odeur récompense gustative. Nous décrivons ici un paradigme simple de comportement qui permet l'analyse de l'apprentissage olfactif associatif appétitive.

Appétitive apprentissage olfactif associatif en<em&gt; Drosophila</em&gt; Les larves

Les mouches des fruits ont un système olfactif complexe, peuvent discriminer des centaines d’odorants et utiliser leur odorat pour orienter les décisions comportementales. Cette vidéo décrit le test de l’olfactomètre à quatre voies, une méthode permettant d’étudier les réponses comportementales olfactives chez les mouches. Le clip de protocole présenté montre comment manipuler les mouches de test et quelles sont les étapes critiques lors de la réalisation du test.

Dosage de l’olfactomètre à quatre voies : une méthode pour évaluer les réponses des signaux odorants chez la drosophile

Cette vidéo décrit une méthode pour tester le comportement olfactif exploratoire chez la mouche des fruits, appelée le labyrinthe en Y. Le clip de protocole présenté montre comment configurer et effectuer le test.

drosophile Essai du labyrinthe en Y : une méthode pour évaluer les réponses olfactives chez les mouches

Procédé d'évaluation quantitative de la réponse chimiotactique...

C. elegans Chemotaxis Assay

Dans cet article, vidéo, nous décrivons un test automatisé pour mesurer l'effet de la faim ou de satiété sur le comportement dépend olfactif de recherche de nourriture dans le fruit de mouche adulte Drosophila melanogaster.

Une simple mouche Essai de comportement alimentaire dans Drosophila

Nous présentons un test à choix de révéler l'influence de substances odorantes sur le comportement de drosophile en utilisant un dosage labyrinthe en Y.

Expérimentation<em&gt; Drosophila</em&gt; Olfaction avec un dosage labyrinthe en Y

Le Flywalk système de suivi automatisé est utilisé pour la haute résolution de quantification comportement d'odeur guidé dans Drosophila melanogaster.

Haute résolution La quantification du comportement Odor-guidée dans<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Utilisation de la<em&gt; Flywalk</em&gt; Paradigm

Nous décrivons ici une configuration comportementale et une méthode d’analyse de données permettant de doser les réponses olfactives de jusqu’à 100 mouches du vinaigre (Drosophila melanogaster). Ce système peut être utilisé avec un ou plusieurs stimuli olfactifs, et adaptable pour l’activation optogénétique ou le silençage de sous-ensembles neuronaux.

Comportements olfactifs dosées par Tracking Computer Of<em&gt; Drosophila</em&gt; Dans un Olfactométre quatre quadrants

Nous décrivons ici la construction et l’utilisation d’un tunnel de vent pour odeur véhiculée par des tests comportements avec des insectes. La conception du tunnel de vent facilite la libération des sources d’odeurs par plusieurs méthodes, avec ou sans stimuli visuels. Des expériences de soufflerie sont des moyens importants pour identifier les substances chimiques volatiles actives sur le plan comportemental.

Une soufflerie pour odeur véhiculée par des tests comportements insectes

Les labyrinthes en Y permettent aux chercheurs de déterminer la pertinence de stimuli spécifiques qui déterminent le comportement des animaux, en particulier les indices chimiques isolés provenant de diverses sources. Une conception et une planification minutieuses peuvent produire des données robustes (p. ex. discrimination, degré d’exploration, nombreux comportements). Cet appareil expérimental peut fournir un aperçu puissant des questions comportementales et écologiques.

Utilisation de labyrinthes en Y fermés pour évaluer le comportement chimiosensoriel chez les reptiles

Découvrez l'olfactomètre en T vertical pour mesurer les réponses comportementales des insectes aux odorants attractifs et répulsifs. Cette méthode permet d'évaluer les préférences olfactives dans un environnement contrôlé.

Vertical Test Choix labyrinthe en T pour la réponse aux arthropodes odorants

Explorer plus de vidéos