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DOI: 10.3791/50344-v
Esperanza Mata-Martínez1, Omar José1, Paulina Torres-Rodríguez1, Alejandra Solís-López1, Ana A. Sánchez-Tusie1, Yoloxochitl Sánchez-Guevara1, Marcela B. Treviño2, Claudia L. Treviño1
1Departamento de Genética del Desarrollo y Fisiología Molecular,Instituto de Biotecnología-Universidad Nacional Autónoma de México, 2Math and Sciences Department,Edison State College
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Intracellulaire de Ca
L’objectif global de cette procédure est de mesurer les fluctuations intracellulaires du calcium dans les spermatozoïdes humains à l’aide de colorants fluorescents. Ceci est accompli en préparant d’abord l’échantillon de sperme par la méthode de nage vers le haut et, si nécessaire, en favorisant la capacitation. La deuxième étape consiste à charger le sperme avec un colorant fluorescent de calcium.
Ensuite, à l’aide de la fluorométrie conventionnelle, de la fluorométrie en flux arrêté, de la cytométrie en flux ou de l’imagerie unicellulaire, effectuez l’expérience et enregistrez les mesures de calcium. En fin de compte, les résultats sont analysés pour déterminer les changements dans les concentrations de calcium intracellulaire déclenchées par la progestérone ou pendant le processus de capacitation. Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes comme celles impliquant la radioactivité est qu’il s’agit d’une procédure très sensible.
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