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Une nouvelle approche pour l'analyse comparative des complexes multiprotéiques Basé sur 15
Une nouvelle approche pour l'analyse comparative des complexes multiprotéiques Basé sur 15
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JoVE Journal Biology
A New Approach for the Comparative Analysis of Multiprotein Complexes Based on 15N Metabolic Labeling and Quantitative Mass Spectrometry

Une nouvelle approche pour l'analyse comparative des complexes multiprotéiques Basé sur 15 N Marquage métabolique et spectrométrie de masse quantitative

Full Text
12,665 Views
08:04 min
March 13, 2014

DOI: 10.3791/51103-v

Kerstin Trompelt1, Janina Steinbeck1, Mia Terashima1,2, Michael Hippler1

1Institute of Plant Biology and Biotechnology,University of Münster, 2Department of Plant Biology,Carnegie Institution for Science

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

L'approche décrite comparative, protéomique quantitative vise à obtenir un aperçu de la composition de complexes multiprotéiques dans des conditions différentes et est démontrée en comparant différentes souches génétiquement. Pour l'analyse quantitative des volumes égaux de fractions différentes d'un gradient de densité de saccharose sont mélangés et analysés par spectrométrie de masse.

L’objectif global de cette procédure est d’analyser de manière comparative la composition des complexes MultiPro dans les membranes de cordon thallique dans différentes conditions. Ceci est accompli en isolant d’abord les membranes thalles des cellules de lamona exposées à des conditions anaérobies. Ensuite, les membranes du thème cordon sont solubilisées et fractionnées sur un gradient de densité de saccharose.

Ensuite, des volumes égaux des fractions souhaitées sont mélangés et séparés sur la page FDS. Enfin, les bandes colorées au kumasi sont digérées avec de la trypsine. En fin de compte, les échantillons sont analysés par spectrométrie de masse quantitative pour observer les changements dans l’abondance des protéines entre les fractions étudiées.

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