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DOI: 10.3791/51103-v
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L'approche décrite comparative, protéomique quantitative vise à obtenir un aperçu de la composition de complexes multiprotéiques dans des conditions différentes et est démontrée en comparant différentes souches génétiquement. Pour l'analyse quantitative des volumes égaux de fractions différentes d'un gradient de densité de saccharose sont mélangés et analysés par spectrométrie de masse.
L’objectif global de cette procédure est d’analyser de manière comparative la composition des complexes MultiPro dans les membranes de cordon thallique dans différentes conditions. Ceci est accompli en isolant d’abord les membranes thalles des cellules de lamona exposées à des conditions anaérobies. Ensuite, les membranes du thème cordon sont solubilisées et fractionnées sur un gradient de densité de saccharose.
Ensuite, des volumes égaux des fractions souhaitées sont mélangés et séparés sur la page FDS. Enfin, les bandes colorées au kumasi sont digérées avec de la trypsine. En fin de compte, les échantillons sont analysés par spectrométrie de masse quantitative pour observer les changements dans l’abondance des protéines entre les fractions étudiées.
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