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DOI: 10.3791/51477-v
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Quatre dimensions (4D) imagerie est utilisée pour étudier le comportement et les interactions entre les deux types de endosomes dans les terminaisons nerveuses vertébrés vivant. Le mouvement de ces petites structures est caractérisé en trois dimensions, ce qui permet la confirmation des événements tels que la fusion des endosomes et l'exocytose.
L’objectif global de cette procédure est d’imager avec précision les endosomes dans un espace tridimensionnel au fil du temps ou en quatre dimensions. Ceci est accompli en disséquant d’abord les muscles du serpent et en disposant le tissu dans la boîte d’imagerie. La deuxième étape consiste à colorer le tissu avec des colorants vitaux pour stimuler la formation d’endosomes.
Ensuite, la préparation est imagée en quatre dimensions pour une ou plusieurs jonctions neuromusculaires. La dernière étape consiste en une analyse minutieuse des données pour caractériser le comportement des macro-endosomes. En fin de compte, la présence et le mouvement des endosomes au fil du temps dans l’espace présynaptique peuvent être démontrés par l’imagerie de fluorescence en quatre dimensions.
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