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Techniques pour l'analyse des vésicules extracellulaire par cytométrie en flux
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JoVE Journal Biology
Techniques for the Analysis of Extracellular Vesicles Using Flow Cytometry

Techniques pour l'analyse des vésicules extracellulaire par cytométrie en flux

Full Text
24,084 Views
09:39 min
March 17, 2015

DOI: 10.3791/52484-v

Heather Inglis1, Philip Norris1,2,3, Ali Danesh1,3

1Blood Systems Research Institute, 2Department of Medicine,University of California, San Francisco, 3Department of Laboratory Medicine,University of California, San Francisco

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

De nombreux procédés existent pour la mesure de vésicules extracellulaires (VE) à l'aide de la cytométrie de flux (FCM). Plusieurs aspects doivent être considérés au moment de déterminer la méthode la plus appropriée à utiliser. Deux protocoles de mesure pour les véhicules électriques sont présentés, en utilisant soit la détection individu ou une approche à base de billes.

L’objectif global de cette procédure est d’isoler et d’analyser la circulation des vésicules extracellulaires dans le sang par deux méthodes différentes. Pour la méthode de détection des vésicules extracellulaires individuelles. Le plasma pauvre en plaquettes ou PPP est d’abord isolé à partir d’un échantillon de sang.

Le PPP est ensuite coloré avec les anticorps conjugués au fluorochrome d’intérêt. Pour la méthode de détection basée sur les billes, les vésicules extracellulaires sont incubées avec des billes, puis les vésicules liées aux billes sont colorées avec les anticorps conjugués au fluorochrome appropriés. En fin de compte, le contenu des vésicules extracellulaires circulantes peut être déterminé par l’analyse des échantillons par cytométrie en flux.

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