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DOI: 10.3791/52643-v
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Ici, une méthode qui permet une préparation rapide, efficace et peu coûteuse de gels de polyacrylamide dans un format de plaque multipuits est décrite. La méthode ne nécessite aucun équipement spécialisé et pourrait être facilement adoptée par n’importe quel laboratoire de recherche. Il serait particulièrement utile dans les recherches axées sur la compréhension des réponses cellulaires dépendantes de la rigidité.
L’objectif global de cette procédure est de permettre une préparation rapide, efficace et peu coûteuse de gels de polyacrylamide dans un format de plaque multi-puits. Ceci est accompli en prenant d’abord en sandwich la solution de précurseur de gel entre une plaque de verre à revêtement hydrophobe et un support en plastique flexible adhésif acrylamide. La deuxième étape consiste à décoller le gel de la plaque de verre, qui s’est fixée de manière covalente au support en plastique flexible lors de la polymérisation, et à le laisser sécher.
Ensuite, le gel sec et le support en plastique flexible sous-jacent sont découpés dans les formes souhaitées et collés côté plastique vers le bas au fond d’une plaque multi-puits ou de tout autre récipient de culture cellulaire. La dernière étape consiste à enduire les gels de polyacrylamide assemblés par plaques multi-puits d’un revêtement adhésif cellulaire, tel qu’une monocouche de collagène de type un. En fin de compte, la microscopie, ainsi que d’autres techniques de caractérisation cellulaire, sont utilisées pour observer l’effet du substrat de polyacrylamide sous-jacent.
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