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Une méthode simplifiée pour les ultra-basse densité, à long terme primaire hippocampique Neuron C...
Une méthode simplifiée pour les ultra-basse densité, à long terme primaire hippocampique Neuron C...
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JoVE Journal Neuroscience
A Simplified Method for Ultra-Low Density, Long-Term Primary Hippocampal Neuron Culture

Une méthode simplifiée pour les ultra-basse densité, à long terme primaire hippocampique Neuron Culture

Full Text
16,698 Views
11:19 min
March 5, 2016

DOI: 10.3791/53797-v

Zhongming Lu*1,2, Mariel Piechowicz*1, Shenfeng Qiu1

1Department of Basic Medical Sciences,University of Arizona College of Medicine-Phoenix, 2Jiangsu Provincial Center for Disease Control and Prevention

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Les cultures à faible densité de neurones primaires de l’hippocampe nécessitent généralement une couche nourricière gliale pour fournir des facteurs neurotrophiques et maintenir la longévité. Nous décrivons ici une méthode simplifiée de culture de neurones à ultra-faible densité sur des lamelles de verre en présence d’une couche nourricière neuronale à haute densité, ce qui facilite l’étude de mécanismes neuronaux autonomes spécifiques.

L’objectif global de cette procédure est d’établir des cultures saines à long terme de neurones primaires de l’hippocampe de souris à très faible densité, afin de faciliter le marquage immunocytochimique et l’étude des mécanismes autonomes des cellules neuronales. Cette étude peut aider à comprendre certaines questions clés dans le domaine de la recherche en neurosciences, telles que les études sur la spécificité des protéines dans la neuromorphologie de la fonction du développement. Le principal avantage de cette technique est qu’elle permet aux neurones de se développer à une densité ultra-faible sur une lamelle sans le soutien d’une couche nourricière gliale.

La démonstration de la procédure sera faite par Mariel Piechowicz, une étudiante de mon laboratoire. Préparez deux plaques à 24 puits à haute densité et deux plaques à faible densité. À l’aide d’une aiguille de calibre 28, gravez le fond des plaques à 24 puits, de sorte que les plastiques déplacés servent de support aux lamelles sur lesquelles se développent des neurones de faible densité.

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Neuroscience numéro 109 l'hippocampe la culture de neurones primaires la culture de faible densité immunocytochimie synapse autaptic synapse excitatrice neurobiologie développementale

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