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DOI: 10.3791/54625-v
Haochuan Zhang*1,2,3, JunGang Huang*2,3,4, Xin Liu2,3, Ping Zhu4, Zhongrong Li1, Xue Li2,3
1Department of Pediatric Surgery, The Second Affiliated Hospital & Yuying Children's Hospital,Wenzhou Medical University, 2Departments of Urology,Boston Children's Hospital, 3Department of Surgery,Harvard Medical School, 4Department of Cardiovascular Surgery, Guangdong Cardiovascular Institute,Guangdong General Hospital, Guangdong Academy of Medical Sciences
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Nous décrivons un protocole détaillé utilisant la microscopie épiscopique à haute résolution pour acquérir des images tridimensionnelles (3D) d’embryons de souris. Ce protocole amélioré utilise une méthode modifiée de préparation des tissus pour améliorer la pénétration du colorant fluorescent, permettant ainsi l’analyse morphométrique d’échantillons de petite et de grande taille.
L’objectif global de ce protocole est d’acquérir rapidement des images numériques 3D haute résolution d’échantillons biologiques à l’aide d’un équipement de laboratoire standard. Cette méthode peut répondre à des questions clés dans le domaine de la biologie du développement grâce à la visualisation et à la dynamique de caractéristiques morphologiques complexes. Les principaux avantages de cette technique sont qu’elle utilise un équipement de laboratoire standard et nécessite un minimum d’expérience préalable.
Jungang Huang, un étudiant diplômé de mon laboratoire, fera la démonstration de la procédure. Après la dissection et la fixation de l’embryon comme décrit dans le protocole textuel, remplacez le fixateur par une solution éclaircissante et faites pivoter doucement l’échantillon sur une bascule à température ambiante pendant une à deux semaines. À la fin de l’incubation, transférez l’échantillon dans du formol à 10 % et laissez-le sur le berceau pendant deux jours supplémentaires.
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