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DOI: 10.3791/55412-v
Ke Zou1,2, Diana S. Ren2, Qi Ou-yang1,3, Hao Li2, Jiashun Zheng2
1The State Key Laboratory for Artificial Microstructures and Mesoscopic Physics, School of Physics,Peking University, 2Department of Biochemistry and Biophysics,University of California, San Francisco, 3Peking-Tsinghua Center for Life Sciences at Center for Quantitative Biology, Academy for Advanced Interdisciplinary Studies,Peking University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a protocol for creating specialized microfluidic devices to measure the lifespan and cellular phenotypes of single yeast cells. This method aims to address key questions in the yeast aging field, particularly regarding the aging processes of mother cells.
Cet article présente un protocole optimisé pour la production de puces microfluidiques et la mise en place d'expériences microfluidique pour mesurer la durée de vie et phénotypes cellulaires de cellules de levure unique.
L’objectif global de cette expérience est de fabriquer un dispositif microfluidique spécialisé et de l’utiliser pour mesurer la durée de vie et les phénotypes cellulaires d’une seule cellule de levure. Cette méthode peut aider à répondre à certaines des questions clés dans le domaine du vieillissement de la levure, telles que pourquoi les cellules mères vieillissent et meurent et quels sont les événements moléculaires antérieurs qui entraînent la perte d’homéostasie cellulaire et finalement le vieillissement et la mort cellulaires ? Le principal avantage de cette technique est que nous pouvons suivre les cellules mères, suivre leur durée de vie et les différents marqueurs moléculaires en même temps, de sorte que nous pouvons rechercher des événements moléculaires en corrélation avec la durée de vie.
Bien que cette méthode puisse donner un aperçu du vieillissement de la levure, elle peut également être appliquée à d’autres domaines, tels que la surveillance des réponses secondaires à la participation qui nécessite une vérification cellulaire pendant de nombreuses générations. En général, les personnes qui ne connaissent pas cette méthode auront du mal à le faire, car la fabrication de dispositifs microfluidiques, le chargement de cellules, la configuration d’un microscope nécessitent beaucoup de pratique pour fonctionner avec succès. La démonstration préalable de cette méthode est essentielle car il est difficile de charger correctement le dispositif microfluidique avec de la levure.
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