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Immunomarquage quadruple de l'ampoule olfactive pour la visualisation des codes d'identit...
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JoVE Journal Neuroscience
Quadruple Immunostaining of the Olfactory Bulb for Visualization of Olfactory Sensory Axon Molecular Identity Codes

Immunomarquage quadruple de l'ampoule olfactive pour la visualisation des codes d'identité moléculaire des axes sensoriels olfactifs

Full Text
7,622 Views
06:32 min
June 5, 2017

DOI: 10.3791/55893-v

Naoki Ihara1, Yuji Ikegaya1,2, Haruki Takeuchi1,3

1Laboratory of Chemical Pharmacology, Graduate School of Pharmaceutical Sciences,The University of Tokyo, 2Center for Information and Neural Networks,National Institute of Information and Communications Technology, 3PRESTO,Japan Science and Technology Agency (JST)

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Les neurones sensoriels olfactifs expriment une grande variété de molécules de tri d'axones pour établir des circuits neuronaux appropriés. Ce protocole décrit une méthode de coloration immunohistochimique pour visualiser les expressions combinatoires des molécules de tri d'axones aux extrémités axonaires des neurones sensoriels olfactifs.

L’objectif global de cette méthode de coloration immunohistochimique est de visualiser l’expression combinée des molécules de tri axonal aux terminus axonaux des neurones sensoriels olfactifs. Cette méthode peut aider à caractériser des processus clés dans le domaine du développement olfactif, tels que le guidage axonal, la formation des synapses et la régénération des neurones sensoriels olfactifs. Le principal avantage de cette technique est qu’elle permet aux scientifiques de comparer et d’analyser les modèles d’expression des molécules de tri axonal dans le bulbe olfactif sans supporter de variation entre les sections.

La démonstration visuelle de cette méthode est essentielle car l’étape d’encastrement est difficile à apprendre, car la position et l’angle de l’échantillon de tissus olfactifs dans le moule sont difficiles à décrire avec des mots. Commencez avec des têtes de souris âgées d’une à deux semaines qui ont été fixées par perfusion intracardiaque de 4 % de paraformaldéhyde. Insérez une lame de ciseaux dans l’espace entre les dents supérieures et inférieures et coupez horizontalement pour retirer l’os de la mâchoire inférieure.

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