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JoVE Journal Developmental Biology
Multi-Photon Time Lapse Imaging to Visualize Development in Real-time: Visualization of Migrating Neural Crest Cells in Zebrafish Embryos

Multiphotonique Time Lapse imagerie de visualiser le développement en temps réel : visualisation de la migration des cellules neurales de crête dans des embryons de poisson-zèbre

Full Text
8,194 Views
10:13 min
August 9, 2017

DOI: 10.3791/56214-v

Antionette L. Williams1, Brenda L. Bohnsack1

1Department of Ophthalmology and Visual Sciences, Kellogg Eye Center,University of Michigan

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study utilizes advanced optical techniques, specifically multi-photon fluorescence excitation, to achieve high-resolution, three-dimensional imaging of neural crest migration in zebrafish embryos. The method allows for real-time observation of migratory cell populations, enhancing our understanding of developmental biology.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Developmental Biology
  • Imaging Techniques

Background

  • Multi-photon time lapse imaging provides deeper tissue penetration compared to traditional methods.
  • This technique reduces phototoxicity, allowing for longer imaging sessions.
  • Understanding cell migration is crucial for developmental biology.
  • Zebrafish embryos serve as an effective model for studying neural crest migration.

Purpose of Study

  • To capture high-resolution images of neural crest migration.
  • To map migration pathways of different cell populations.
  • To improve imaging techniques for developmental biology research.

Methods Used

  • Laser scanning microscopy
  • Multi-photon fluorescence excitation
  • Time lapse imaging
  • Embryo collection from zebrafish

Main Results

  • Successful capture of real-time imaging of neural crest migration.
  • Demonstrated advantages of multi-photon imaging over confocal microscopy.
  • Provided insights into the dynamics of cell migration in embryos.
  • Enhanced understanding of developmental processes in zebrafish.

Conclusions

  • Multi-photon imaging is a powerful tool for studying cell migration.
  • This technique can be applied to various developmental biology questions.
  • Future studies can leverage these methods for deeper insights into embryonic development.

Frequently Asked Questions

What is multi-photon imaging?
Multi-photon imaging is an advanced optical technique that allows for deeper tissue penetration and reduced phototoxicity, making it ideal for imaging living tissues.
Why use zebrafish embryos for this study?
Zebrafish embryos are transparent and develop rapidly, making them an excellent model for studying developmental processes such as neural crest migration.
What are the advantages of multi-photon over confocal microscopy?
Multi-photon microscopy offers deeper tissue penetration and lower phototoxicity, allowing for longer imaging sessions and better visualization of cellular dynamics.
How does this study contribute to developmental biology?
This study enhances our understanding of cell migration pathways, which are crucial for normal development and can inform research on developmental disorders.
What are the implications of this research?
The findings can lead to improved imaging techniques and methodologies in developmental biology, potentially influencing future research directions.

Une combinaison des techniques optiques avancées de lecture avec excitation de fluorescence multi-photons longue longueur d’onde de laser a été mis en œuvre pour capturer l’imagerie haute résolution, en trois dimensions, en temps réel de la migration de la crête neurale en Tg (sox10:EGFP) et les embryons de poissons zèbres Tg (foxd3:GFP).

L’objectif global de l’imagerie multiphotonique est de capturer des images tridimensionnelles en temps réel à haute résolution des populations de cellules migratrices. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés en biologie du développement, telles que la cartographie des voies de migration de différentes populations cellulaires. Le principal avantage de cette technique par rapport à la microscopie confocale traditionnelle est que les lasers multiphotons ont une pénétration tissulaire plus profonde et une phototoxicité réduite.

Cela augmente la facilité d’utilisation dans les tissus plus épais et permet des périodes d’acquisition d’images plus longues. Pour vous préparer à la collecte d’embryons entre 15h00 et 21h00, assemblez des réservoirs d’élevage et remplissez-les d’eau d’osmose inverse ou d’osmose inverse.

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