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JoVE Journal Neuroscience
Using a Microfluidics Device for Mechanical Stimulation and High Resolution Imaging of C. elegans

En utilisant un dispositif microfluidique pour une Stimulation mécanique et l’imagerie haute résolution de c. elegans

Full Text
11,112 Views
10:39 min
February 19, 2018

DOI: 10.3791/56530-v

Holger Fehlauer*1, Adam L. Nekimken*1,2, Anna A. Kim1,2, Beth L. Pruitt1,2,3, Miriam B. Goodman1,2, Michael Krieg4

1Department of Molecular and Cellular Physiology,Stanford University, 2Department of Mechanical Engineering,Stanford University, 3Department of Bioengineering,Stanford University, 4Group of Neurophotonics and Mechanical Systems Biology,The Institute of Photonic Sciences (ICFO)

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a novel method for selectively mechanically stimulating immobilized nematodes using a microfluidic trap, facilitating high-resolution imaging of cellular responses. The primary focus is on understanding how mechanical stress influences neuronal responses and broader biological processes in the context of mechanobiology and sensory biology.

Key Study Components

Area of Science

  • Mechanobiology
  • Sensory biology
  • Neuroscience

Background

  • Mechanical stress is crucial in activating biochemical pathways.
  • Understanding neuronal responses to mechanical stimuli is vital for mechanobiological insights.
  • The method allows non-invasive yet effective immobilization of the biological subjects.
  • High-resolution imaging can enhance our comprehension of these responses.

Purpose of Study

  • To develop a technique for measuring nematode and neuronal responses to mechanical stimuli.
  • To explore how animals respond to mechanical stimulation in mechanobiology.
  • To provide insights into the impact of mechanical cues on organismal development.

Methods Used

  • Utilized a microfluidic chip setup with pressure actuators for stimulation.
  • Biological model involved the nematode C. elegans, focusing on the immobilization and imaging of its neurons.
  • Involved precise setup of microscopy systems for simultaneous excitation of fluorescence markers.
  • Experimental steps included loading the nematodes into a trapping channel and conducting high-resolution imaging protocols.

Main Results

  • The technique provided a reliable method for assessing neuronal responses to applied mechanical stimuli.
  • High-resolution imaging revealed the relationship between mechanical stimulation and biological responses within immobilized nematodes.
  • Enabled observation of significant neuronal behavior without compromising the organism's integrity or mobility.
  • Facilitated assessments of mechanically induced changes in neuronal excitability and other physiological parameters.

Conclusions

  • This method advances research in mechanobiology by enabling high-resolution imaging of neuronal responses to mechanical stress.
  • It provides essential insights into the mechanosensitivity of organisms and can be adapted for other similar biological models.
  • Overall, the findings can deepen our understanding of neuronal mechanisms and potential implications in developmental biology.

Frequently Asked Questions

What are the advantages of using a microfluidic chip for this research?
Microfluidic chips allow precise control over mechanical stimulation while minimizing the mobility of the subjects, enabling high-resolution imaging of cellular responses.
How are nematodes immobilized for the experiments?
Nematodes are immobilized in the microfluidic trap in a non-invasive manner, allowing for effective mechanical stimulation and imaging without harming the organism.
What type of data can be obtained from this technique?
The technique yields high-resolution images indicative of neuronal responses and excitability changes when subjected to targeted mechanical stimuli.
Can this method be adapted for other types of animals?
Yes, while designed for C. elegans, the method can be adapted for other organisms of similar size, potentially extending its applications in mechanobiological research.
What limitations should researchers consider when using this method?
Researchers should ensure that the animals selected fit the size requirements for effective trapping and should be cautious of potential issues related to pressure loss in the microfluidic system.

Nouveaux outils pour la recherche de mécanobiologie sont nécessaires pour comprendre les contraintes mécaniques comment active des voies biochimiques et suscite des réactions biologiques. Ici, nous présentons une nouvelle méthode de stimulation mécanique sélective des animaux immobilisée avec un piège de microfluidique permettant l’imagerie à haute résolution des réponses cellulaires.

L’objectif global de cette technique est de mesurer comment les nématodes et leurs neurones réagissent à des stimuli mécaniques externes à l’aide d’une puce microfluidique équipée d’actionneurs de pression. Cette méthode peut répondre à des questions clés dans les domaines de la mécanobiologie et de la biologie sensorielle, telles que la façon dont les cellules, les tissus et les animaux réagissent à la stimulation mécanique. Le principal avantage de cette technique est qu’elle réduit suffisamment la mobilité du ver de manière non invasive pour permettre une imagerie à haute résolution tout en ayant accès à la cuticule du ver pour la stimulation mécanique.

Cette méthode peut également être utilisée pour étudier l’influence des indices mécaniques sur le développement. Il pourrait même être appliqué à d’autres systèmes tels que l’exponse d’organes ex vivo ou d’autres animaux de taille similaire à C. Elegans. Mettre en place un système de microscope pour l’excitation simultanée de GCaMP et RFP.

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Neurosciences numéro 132 microfluidique soft-lithographie c. elegans mécanobiologie mécanosensibilité dynamique du calcium

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