Utilisation de deux dimensions semi dénaturation détergent Gel d’agarose pour confirmer l’hétérogénéité de la taille des fibres amyloïdes ou type amyloïde

L’objectif global de cette électrophorèse bidimensionnelle semi-dénaturante sur gel d’agarose est de confirmer l’hétérogénéité de taille des fibres amyloïdes ou amyloïdes observées lors du SDD-AGE traditionnel. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans les domaines de l’agrégation de l’amyloïde ou des protéines, par exemple si l’hétérogénéité de taille observée lors du SDD-AGE traditionnel est l’état natif des fibres in vivo ou le résultat de la dégradation ou de la dissociation des protéines lors de l’électrophorèse sur gel. Le principal avantage de cette technique est qu’elle peut être réalisée facilement en laboratoire sans équipement spécialisé.

Aucun équipement supplémentaire n’est requis au-delà de ce qui est utilisé dans le SDD-AGE traditionnel. Tout d’abord, ensemencez les cellules cancéreuses du côlon HT-29 productrices d’amyloïde dans une boîte de culture tissulaire de 10 centimètres. Ensuite, incubez les cellules pendant la nuit à 37 degrés Celsius avec 5 % de dioxyde de carbone.