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Morphometric Protocol for the Objective Assessment of Blastocyst Behavior During Vitrification and Warming Steps

Morphométrique protocole pour l’évaluation Objective du comportement de blastocyste pendant la Vitrification et étapes de réchauffement de la planète

Full Text
9,332 Views
08:28 min
February 28, 2019

DOI: 10.3791/58540-v

Marjan Taborin1, Borut Kovačič1

1Department of Reproductive Medicine and Gynecological Endocrinology,University Medical Centre Maribor

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a morphometric protocol for monitoring blastocyst shrinkage and re-expansion during vitrification interventions and post-warming recovery. The protocol is designed for use in in vitro fertilization laboratories equipped with time-lapse microscopes.

Key Study Components

Area of Science

  • Reproductive Biology
  • Embryology
  • Vitrification Techniques

Background

  • Blastocyst development is critical in in vitro fertilization.
  • Monitoring blastocyst morphology can improve vitrification methods.
  • Time-lapse microscopy provides detailed insights into embryonic changes.
  • Effective vitrification is essential for successful embryo preservation.

Purpose of Study

  • To develop a protocol for assessing blastocyst morphology during vitrification.
  • To enhance the understanding of blastocyst behavior during cryopreservation.
  • To provide a reliable method for evaluating vitrification techniques.

Methods Used

  • Application of a laser pulse to induce blastocyst shrinkage.
  • Use of time-lapse microscopy for real-time monitoring.
  • Assessment of blastocyst recovery post-warming.
  • Utilization of advanced image editing software for analysis.

Main Results

  • The protocol effectively monitors blastocyst shrinkage and re-expansion.
  • Insights into the effectiveness of vitrification methods were gained.
  • Time-lapse microscopy proved beneficial for detailed observation.
  • Results support the optimization of blastocyst vitrification techniques.

Conclusions

  • The morphometric protocol is a valuable tool for IVF laboratories.
  • It enhances the understanding of blastocyst dynamics during cryopreservation.
  • Future studies can build on this protocol to refine vitrification methods.

Frequently Asked Questions

What is the main focus of the study?
The study focuses on a morphometric protocol for monitoring blastocyst behavior during vitrification.
How can this protocol be applied?
It can be applied in IVF laboratories equipped with time-lapse microscopes.
What are the advantages of using time-lapse microscopy?
Time-lapse microscopy allows for real-time monitoring of embryonic changes.
What is the significance of blastocyst vitrification?
Vitrification is crucial for the preservation of embryos for future use.
What insights does the protocol provide?
It provides insights into the effectiveness of different vitrification methods.
What are the expected outcomes of using this protocol?
Expected outcomes include improved understanding and optimization of blastocyst vitrification techniques.

Nous présentons ici un protocole de time-lapse morphométriques pour suivre l’intensité du rétrécissement du blastocyste et re-expansion durant les interventions de previtrification et récupération après réchauffement. L’application du protocole est possible dans les laboratoires in vitro fertilization équipés de microscopes time-lapse et est recommandée dans le développement d’une méthode de vitrification de blastocyste optimale.

Ce protocole morphométrique permet de surveiller l’intensité du rétrécissement et de la ré-expansion du blastocyste lors d’interventions antérieures de vitrification et de récupération post-réchauffement et donne un aperçu de l’efficacité des méthodes de vitrification du virus. Le principal avantage de cette technique est qu’elle peut être appliquée aux laboratoires de fécondation in vitro équipés de microscopes et d’ordinateurs en accéléré dotés d’un logiciel avancé d’édition d’images. Le cinquième ou le sixième jour de l’expansion, soumettez un blastocyste avec au moins quelques cellules de masse cellulaire interne et un trophectoderm cohésif à une impulsion laser de 0,4 à 0,7 milliseconde avec un diamètre de trou allant de 4,3 à 9,4 micromètres tangentiellement dirigés vers la zona pellucida et la jonction de deux cellules trophectodermiques adjacentes.

Ensuite, laissez le blastocoel s’effondrer complètement ou partiellement pendant cinq minutes. Ensuite, utilisez une pipette minuscule pour ajouter de façon aseptique un milieu d’équilibrage dans les trous de la zone microdroplet d’une boîte de Pétri de neuf puits, spécialement conçue pour la microscopie et l’enregistrement en accéléré. Lorsque tout le milieu a été ajouté, superposer la zone microdroplet avec environ 30 microlitres de milieu d’équilibrage.

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Bio-ingénierie numéro 144 bio-ingénierie assisté de cryobiologie vitrification blastocyste techniques de procréation bio-imagerie time-lapse morphométrie

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