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DOI: 10.3791/59440-v
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This article presents a method for synthesizing fusogenic porous silicon nanoparticles designed for efficient oligonucleotide delivery in vitro and in vivo. The nanoparticles are engineered to carry siRNA and are coated with fusogenic lipids, enhancing their delivery capabilities.
Nous démontrons la synthèse de nanoparticules de silicium poreux fusogène pour livraison efficace oligonucléotide in vitro et in vivo. Nanoparticules de silicium poreux sont chargés avec des siARN pour former le noyau, qui est recouvert par les lipides fusogène par extrusion pour former la coquille. Ciblage portion fonctionnalisation et caractérisation des particules sont inclus.
Ce protocole décrit la synthèse d’un système de nanoparticules capable de faire taire les gènes in vivo en fournissant des siARN avec une grande efficacité. En échangeant simplement le peptide de ciblage et la charge utile de siRNA, les nanoparticules fusogéniques peuvent être employées comme formulation thérapeutique potentielle pour des maladies qui exigent la modulation in vivo de gène. Nous avons déjà publié des résultats utilisant le nanoplateforme fusogénique contre les infections bactériennes gram-positives en faisant taire un gène qui code pour l’inflammation dans les macrophages pour mettre fin à l’inflammation chronique.
Avant d’effectuer cette procédure, assemblez une cellule d’échage de téflon contenant une plaquette de silicium dans une solution d’acide fluorhydrique trois contre un. Exécutez un courant alternatif d’une forme d’onde carrée avec une faible densité de courant de 50 milliamperes par centimètre au carré pendant 0,6 seconde et une densité de courant élevée de 400 milliamperes par centimètre au carré pendant 0,36 seconde répétée pendant 500 cycles. Une fois la gravure terminée, retirer la cellule du circuit et rincer soigneusement la solution d’acide fluorhydrique à l’aide d’une seringue.
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