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DOI: 10.3791/63160-v
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Une plate-forme améliorée pour la culture d’embryons entiers permet un développement ex utero continu et robuste d’embryons de souris post-implantation jusqu’à six jours, des stades de prégestulation jusqu’à l’organogenèse avancée. Dans ce protocole, nous détaillons la procédure standard pour une culture d’embryon réussie en utilisant des plaques statiques et des systèmes de bouteilles rotatives.
Cette méthode sera fondamentale pour comprendre la gastrulation le long d’une formation chez les mammifères. En permettant l’expérimentation d’embryons vivants au cours de stades embryonnaires qui ont longtemps été cachés à l’intérieur de l’utérus maternel. Il permet, continue la croissance efficace et appropriée des embryons de souris en dehors de l’utérus pendant une période prolongée allant jusqu’à 6 jours.
Une dissection embryonnaire rapide et adéquate et une prégestrulation de la concentration et de la pression des gaz sont les étapes les plus critiques pour une croissance embryonnaire réussie. Pour commencer à cultiver des embryons de souris âgés de 7,5 jours ou plus, allumez le rotateur et l’unité de chauffage du système d’incubateur de culture à rouleaux pendant au moins 1 heure avant la dissection de l’embryon. Ajoutez également de l’eau d’autoclave à la bouteille d’entrée de gaz et au tube à essai de sortie.
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