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DOI: 10.3791/67125-v
Cong Xu*1, Siyu He*1, Yuefei Zhu1, Gazelle Crasto2, Caroline Chen1, Morgan L. Clay3, Yeh-Hsing Lao3, Kam W. Leong1
1Department of Biomedical Engineering,Columbia University, 2College of Dental Medicine, Division of Periodontics,Columbia University, 3Department of Pharmaceutical Sciences, University at Buffalo,The State University of New York
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Ce protocole présente une méthode de génération d’organoïdes vasculaires à l’aide de cellules souches pluripotentes humaines.
Cette étude introduit une méthode modifiée pour la production évolutive d’organoïdes vasculaires homogènes à partir d’IPSC humains. En utilisant de nouveaux inhibiteurs de ROCK et le confinement des micropuits, l’approche améliore la reproductibilité et minimise les variations d’un lot à l’autre, ce qui la rend adaptée aux applications d’analyse morphologique en aval et de modélisation des maladies. Les technologies de séquençage unicellulaire ont été largement utilisées dans la recherche sur les organoïdes pour démêler l’hétérogénéité et la dynamique génomiques, épigénomiques et transcriptomiques au sein des populations cellulaires.
Les technologies d’imagerie 3D telles que le nettoyage des tissus et la microscopie à feuillet de lumière permettent une imagerie rapide et à haute résolution de la morphologie cellulaire et de l’architecture tissulaire dans un contexte tridimensionnel. Le débit et la standardisation sont des défis clés dans la recherche sur les organoïdes. La manutention manuelle demande beaucoup de main-d’œuvre et limite le débit, ce qui fait de l’automatisation robotique une solution prometteuse.
La standardisation de la culture d’organoïdes, y compris le contrôle de la qualité IPSC et l’optimisation du protocole de différenciation, peut améliorer considérablement la reproductibilité et minimiser les variations entre les lots et les lignées cellulaires.
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