Name: Isolement de cellules stromales mésenchymateuses dérivées du cordon ombilical BAMBIhumain (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-10T14:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 5 s
Description: Découvrez l'isolement des cellules BAMBI high MFGE8 high dérivées du cordon ombilical humain. Cette méthode par cytométrie en flux permet d'analyser leurs caractéristiques transcriptomiques uniques et leur potentiel thérapeutique.

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<meta charset="utf8"></head><body>Analyse fonctionnelle des sous-populations de BAMBIàMFGE8élevé UC-MSC

<ol><li>Liechty, K. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+mesenchymal+stem+cells+engraft+and+demonstrate+site-specific+differentiation+after+in+utero+transplantation+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Human mesenchymal stem cells engraft and demonstrate site-specific differentiation after in utero transplantation in sheep.</a> Nat Med. 6 (11), 1282-1286 (2000).</li>
<li>Zhou, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+and+advances+in+clinical+applications+of+mesenchymal+stromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Challenges and advances in clinical applications of mesenchymal stromal cells.</a> J Hematol Oncol. 14 (1), 24(2021).</li>
<li>Xie, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tnf-alpha-mediated+m%286%29a+modification+of+elmo1+triggers+directional+migration+of+mesenchymal+stem+cell+in+ankylosing+spondylitis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Tnf-alpha-mediated m(6)a modification of elmo1 triggers directional migration of mesenchymal stem cell in ankylosing spondylitis.</a> Nat Commun. 12 (1), 5373(2021).</li>
<li>Mcguire, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell-derived+interleukin-28+drives+the+selection+of+apoptosis+resistant+bone+metastatic+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell-derived interleukin-28 drives the selection of apoptosis resistant bone metastatic prostate cancer.</a> Nat Commun. 12 (1), 723(2021).</li>
<li>Yuan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell+therapy+induces+flt3l+and+cd1c%28%2B%29+dendritic+cells+in+systemic+lupus+erythematosus+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell therapy induces flt3l and cd1c(+) dendritic cells in systemic lupus erythematosus patients.</a> Nat Commun. 10 (1), 2498(2019).</li>
<li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Umbilical+cord+mesenchymal+stem+cell+transplantation+in+active+and+refractory+systemic+lupus+erythematosus%3A+A+multicenter+clinical+study%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Umbilical cord mesenchymal stem cell transplantation in active and refractory systemic lupus erythematosus: A multicenter clinical study.</a> Arthritis Res Ther. 16 (2), R79(2014).</li>
<li>Ortiz, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell+engraftment+in+lung+is+enhanced+in+response+to+bleomycin+exposure+and+ameliorates+its+fibrotic+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell engraftment in lung is enhanced in response to bleomycin exposure and ameliorates its fibrotic effects.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100 (14), 8407-8411 (2003).</li>
<li>Phinney, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+heterogeneity+of+mesenchymal+stem+cells%3A+Implications+for+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">Functional heterogeneity of mesenchymal stem cells: Implications for cell therapy.</a> J Cell Biochem. 113 (9), 2806-2812 (2012).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptome+atlas+of+human+mesenchymal+stem+cells+exploring+cellular+heterogeneity%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptome atlas of human mesenchymal stem cells exploring cellular heterogeneity.</a> Clin Transl Med. 11 (12), e650(2021).</li>
<li>Chen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+and+spatial+transcriptomics+decodes+wharton%27s+jelly-derived+mesenchymal+stem+cells+heterogeneity+and+a+subpopulation+with+wound+repair+signatures%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Single-cell and spatial transcriptomics decodes wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells heterogeneity and a subpopulation with wound repair signatures.</a> Adv Sci (Weinh). 10 (4), e2204786(2023).</li>
<li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+heterogeneity+reveals+a+unique+bambi%28high%29+mfge8%28high%29+subpopulation+of+human+uc-mscs%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Dissecting heterogeneity reveals a unique bambi(high) mfge8(high) subpopulation of human uc-mscs.</a> Adv Sci (Weinh). 10 (1), e2202510(2022).</li>
<li>Tsuji, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+different+cell-detaching+methods+on+the+viability+and+cell+surface+antigen+expression+of+synovial+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Effects of different cell-detaching methods on the viability and cell surface antigen expression of synovial mesenchymal stem cells.</a> Cell Transplant. 26 (6), 1089-1102 (2017).</li>
<li>Lai, T. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+methods+of+detaching+adherent+cells+and+their+effects+on+the+cell+surface+expression+of+fas+receptor+and+fas+ligand%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Different methods of detaching adherent cells and their effects on the cell surface expression of fas receptor and fas ligand.</a> Sci Rep. 12 (1), 5713(2022).</li>
<li>Avinash, K., Malaippan, S., Dooraiswamy, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+isolation+and+characterization+of+stem+cells+from+different+regions+of+oral+cavity+using+markers%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Methods of isolation and characterization of stem cells from different regions of oral cavity using markers: A systematic review.</a> Int J Stem Cells. 10 (1), 12-20 (2017).</li>
<li>Galvao, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rock+inhibition+drives+resolution+of+acute+inflammation+by+enhancing+neutrophil+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Rock inhibition drives resolution of acute inflammation by enhancing neutrophil apoptosis.</a> Cells. 8 (9), 964(2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Tube de microcentrifugation de 0,6 mL</td><td>Corning&nbsp ;</td><td>Axygen MCT-060-A</td><td></td></tr><tr><td>1,5 mL microcentrifugeuse</td><td>tubes Beijing Labgic Technology</td><td>MCT-001-150</td><td></td></tr><tr><td>100 mm Boîte de culture cellulaire&nbsp ;</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>12311</td><td></td></tr><tr><td>Plaque à 12 puits</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>11210</td><td></td></tr><tr><td>Tube à centrifuger de 15 mL</td><td>Nanjing Vazyme Material Technology</td><td>TCF00115</td><td></td></tr><tr><td>Plaque à 24 puits</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>11310</td><td></td></tr><tr><td>Tube de centrifugation de 50 mL</td><td>Nanjing Vazyme Technology</td><td>TCF00150</td><td></td></tr><tr><td>5 mL Tubes à fond rond</td><td>Corning</td><td>FALCON 352003</td><td></td></tr><tr><td>70 &mu ; Filtre à cellules m</td><td>Falcon</td><td>352350</td><td>Dilution : 1:1000</td></tr><tr><td>APC anti-humain CD79a (Ig&alpha ;) Anticorps</td><td>BioLegend</td><td>333505</td><td>581 Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>APC/Cyanine7 anti-humain CD73 (Ecto-5'-nucléotidase) Anticorps</td><td>BioLegend</td><td>344022</td><td>G46-6 Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>APC-Cy7 Souris IgG1, &kappa ; Contrôle d’isotype</td><td>BD Bioscience</td><td>557873</td><td>MOPC-31C (Contrôle d’isotype) Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>Anticorps BAMBI</td><td>Bioss</td><td>bs-12418R</td><td></td></tr><tr><td>Violet brillant 510 anti-souris/humain Anticorps CD44</td><td>BioLegend</td><td>103044</td><td>5E10 Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>Violet brillant 510 Rat IgG2b, &kappa ; Isotype Ctrl Anticorps</td><td>BioLegend</td><td>400646</td><td>MOPC-21 (contrôle des isotypes) Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>CD105 (Endoglin) Anticorps monoclonal&nbsp ; APC</td><td>eBioscience</td><td>17-1057-42</td><td>HM47 Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>Lames de chambre de comptage</td> cellulaire <td>Shanghai QIUJING</td><td>XB-K-25</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugeuse</td><td>Pékin BAIYANG</td><td>BY-320C</td><td></td></tr><tr><td>ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix</td><td>Vazyme</td><td>Q711-02</td><td></td></tr><tr><td>Chloroforme</td><td>XILONG Scientific</td><td>13700908</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12 (1:1) basique (1x)</td><td>Gibco</td><td>C11330500BT</td><td></td></tr><tr><td>EDTA (0,5 M), pH 8,0,</td><td>Invitrogen sans RNASE</td><td>AM9260G</td><td>Dilution : 1:1000</td></tr><tr><td>Éthanol &nbsp ;</td><td>XILONG Scientific</td><td>12803405</td><td></td></tr><tr><td>Sérum fœtal bovin (FBS)</td><td>Gibco</td><td>10099-141C&nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>FITC Souris Anti-Humain CD34</td><td>BD Bioscience</td><td>555821</td><td>IM7 Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>FITC Souris Anti-Humain CD45</td><td>BD Bioscience</td><td>555482</td><td>AD2 Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>FITC Souris Anti-Humain HLA-DR</td><td>BD Bioscience</td><td>555811</td><td>SN6 Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>Cytomètre en flux</td><td>BD Bioscience</td><td>FACSAria&trade ; III Trieur de cellulesAria</td><td></td></tr><tr><td>Flowjo</td><td>BD Bioscience</td><td>V10</td><td></td></tr><tr><td>Réactif de dissociation cellulaire douce</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>100-0485</td><td></td></tr><tr><td>IgG anti-souris de chèvre H& L (Alexa Fluor 488)</td><td>abcam</td><td>ab150113</td><td>HI30 Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>Chèvre Anti-Lapin IgG H& L (AlexaFluor 594)</td><td>abcam</td><td>ab150080</td><td>Dilution : 1:1000</td></tr><tr><td>HiScript II Q RT SuperMix pour qPCR (+essuie-glaceur d’ADNg)</td><td>Microscopes inversés Vazyme</td><td>R223-01</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Nikon</td><td>ECLIPSE Ts2</td><td></td></tr><tr><td>Alcool isopropylique</td><td>XILONG Scientific</td><td>12802505</td><td></td></tr><tr><td>MFGE8</td> anticorps <td>Biorbyt</td><td>orb388429</td><td>Dilution : 1:100</td></tr><tr><td>Microcentrifugeuse</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>FRESCO 21</td><td></td></tr><tr><td>Souris IgG1 kappa Contrôle d’isotype APC</td><td>eBioscience</td><td>17-4714-42</td><td>P3.6.2.8.1 (Contrôle d’isotype) Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>IgG1 de souris Contrôle d’isotype FITC</td><td>eBioscience</td><td>11-4714-42</td><td>eBMG2b (Contrôle d’isotype) Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>Souris IgG2b kappa Contrôle d’isotype FITC</td><td>eBioscience</td><td>11-4732-42</td><td>RTK4530 (contrôle des isotypes) Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>PBS (10x)</td><td>Sangon Biotech (Shanghai)</td><td>E607016-0500</td><td></td></tr><tr><td>PE-Cy5 Souris anti-humaine CD90&nbsp ;</td><td>BD Bioscience</td><td>555597</td><td>P3.6.2.8.1 (contrôle des isotypes) Dilution : 1:200</td></tr><tr><td>PE-Cy5 IgG1 de souris &kappa ; Contrôle des isotypes</td><td>BD Bioscience</td><td>550618</td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline-Streptomycine 100x</td><td>Cytiva</td><td>SV30010</td><td>Dilution : 1:100</td></tr><tr><td>Système de PCR en temps réel</td><td>Applied Biosystems byThermo Fisher Scientific</td><td>Q6</td><td></td></tr><tr><td>Spectrophotomètre d’eau sans RNase</td><td>QIAGEN</td><td>129112</td><td></td></tr><tr><td>Thermo</td><td>Fisher Scientific</td><td>NanoDrop One (840-317400)</td><td></td></tr><tr><td>Pointes de micropipette stériles</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td></td><td>Dilution : 1:100</td></tr><tr><td>Fiole de culture cellulaire T75</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>13212A</td><td></td></tr><tr><td>Thermocycleur</td><td>Applied Biosystems byThermo Fisher Scientific</td><td>Veriti</td><td></td></tr><tr><td>Tri réactif</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T9424</td><td></td></tr><tr><td>Typsin-EDTA Solution</td><td>Bio-Channel Biotechnology</td><td>BC-CE-005</td><td></td></tr><tr><td>Chemise d’eau CO2 Incubateur</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>3111</td><td></td></tr></tbody></table>

isolement de cellules stromales mésenchymateuses dérivées du cordon ombilical bambihumain

Isolation of Human BAMBIhighMFGE8high Umbilical Cord-Derived Mesenchymal Stromal Cells

La figure 1 montre les profils d’expression des marqueurs de surface cellulaire des CSM-UC humaines. Les CSM en culture étaient fortement positives pour l’expression de CD44, CD73, CD90 et CD105 et négatives pour l’expression de CD14, CD34, CD45, CD79 et HLA-DR. LesCSM BAMBI à hauteMFGE8 ont été triées à partir de CSU-UC humaines cultivées, et leur expression de BAMBI et MFGE8 a été réanalysée par cytométrie en flux après expansion pour 3-4 passages (<strong class="xfig...

Isolement de cellules stromales mésenchymateuses dérivées du cordon ombilical BAMBIhumain

Umbilical cord-derived mesenchymal stromal/stem cells (UC-MSCs) present low immunogenicity and potent immunomodulatory effects for treating various ...

isolation-human-bambihighmfge8high-umbilical-cord-derived-mesenchymal

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Ce protocole décrit l'isolement et à l'expansion ultérieure des cellules stromales mésenchymateuses et les cellules endothéliales formant colonie sans l'utilisation de sérum animal pour générer des paires autologues à des fins de transplantation expérimentale.

Isolement et animale expansion sans sérum du cordon ombilical humain dérivé cellules stromales mésenchymateuses (CSM) et des cellules endothéliales progénitrices Colony Forming (CPEF)

Les cellules souches mésenchymateuses (CSM) ont un potentiel de différenciation vers la lignée ostéoblastique lorsqu’elles sont stimulées par des facteurs solubles ou des biomatériaux spécifiques. Ce travail présente une nouvelle option pour l’administration de CSM à partir de la membrane amniotique humaine (AM-hMSC) qui utilise la matrice osseuse bovine Nukbone (NKB) comme échafaudage.

Isolement de mésenchymateuses humaines cellules souches et de leur culture sur la matrice osseuse poreuse

Ici, nous présentons un protocole pour la dissection du cordon ombilical humain (UC) et l'échantillon de placenta fœtal en alignant le cordon (CL), la gelée de Wharton (WJ), de la jonction de cordon placenta (CPJ), et le placenta fœtal (FP) pour l'isolement et la caractérisation des cellules souches mésenchymateuses (CSM) en utilisant la technique de culture des explants.

Isolement et caractérisation de cellules mésenchymateuses stromales du cordon ombilical humain et fœtale Placenta

Cordon ombilical humain (UC) peuvent être obtenu au cours de la période périnatale à la suite de terme prématuré et postterm de livraison. Dans ce protocole, nous décrivons l’isolement et la caractérisation des UC dérivées de cellules souches mésenchymateuses (UC-MSCs) du foetus/nourrissons à 19 à 40 semaines de gestation.

Isolement et caractérisation des humains provenant du cordon ombilical cellules souches mésenchymateuses de prématurés et les nouveau-nés à terme

Cette étude présente une procédure unique de dissection contondante pour préserver l’intégrité de la gelée de Wharton (WJ), ce qui permet d’obtenir moins de WJ endommagés et une plus grande quantité et viabilité des cellules souches mésenchymateuses (CSM) récoltées. La méthode démontre un rendement et une capacité de prolifération supérieurs par rapport aux méthodes conventionnelles de dissection tranchante.

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Dans ce rapport, nous démontrons un système pour isoler les cellules du donneur et de la culture de la glande mammaire de la souris, et la transplantation orthotopique ces cellules dans des souris bénéficiaires d'analyser stromales: interactions épithéliales pendant le développement de tumeurs mammaires.

Transplantation mammaires de cellules stromales et les cellules de carcinome chez les souris C57BL/6J

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Différenciation isolement, caractérisation et comparative de l&#39;homme dentaires cellules souches de pulpe Dérivé de dents permanentes à l&#39;aide de deux méthodes différentes

L'isolement des cellules souches cancéreuses (CCM) directement à partir de tissus humains est nécessaire pour leur caractérisation biologique. Ce manuscrit décrit une méthodologie pour l'isolement des CSC de la prostate à partir de tissus humains, tout en offrant des conseils sur le dépannage des mesures difficiles.

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Établir des systèmes primaires de l'endomètre stromales de cellules de culture à partir d'échantillons hystérectomie est une technique biologique précieux et une étape cruciale avant de poursuivre une vaste gamme de recherche vise. Ici, nous décrivons deux méthodes utilisées pour établir les cultures stromales de tissus de l'endomètre résection chirurgicale des patients humains.

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Isolement de cellules stromales mésenchymateuses dérivées du cordon ombilical BAMBI^humain

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