Name: Isolement et absorption par des cellules dendritiques de petites vésicules extracellulaires d’Echinococcus granulosus (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 4 s
Description: Découvrez l'isolation et l'absorption des vésicules extracellulaires d'Echinococcus granulosus par les cellules dendritiques. Cette méthode révèle les mécanismes d'immunomodulation parasitaire et ouvre des perspectives pour le développement vaccinal.

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<table><tbody><tr><td>Tubes de 1,5 mL</td><td>Henso</td><td>N14059</td><td></td></tr><tr><td>Plaque 24 puits&nbsp ;</td><td>JetBiofil</td><td>CAP011024</td><td>Polystyrène, fond plat,</td></tr><tr><td>plaque stérile à 6 puits&nbsp ; &nbsp ;</td><td>Henso Medical Co. Ltd.</td><td>N14221</td><td>Fond plat, matériau PS, Filtre à</td></tr><tr><td>cellules stériles en polypropylène de 70 mm</td><td>Biologix Group Limited</td><td>15-1070</td><td></td></tr><tr><td>Bleu Alcian stérile 8 GX colorant&nbsp ;</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-214517B</td><td></td></tr><tr><td>Incubateur automatique CO2</td><td>Nuarire</td><td>UN-5100E/G DH</td><td></td></tr><tr><td>Sérum bovin Albumine</td><td>Wiener lab</td><td>1443151</td><td></td></tr><tr><td>CD11c Anticorps monoclonal-PECy5&nbsp ; &nbsp ; 100 et micro ; g</td><td>eBioscience</td><td>15-0114-82</td><td>clone (N418)</td></tr><tr><td>CD40 Anticorps monoclonal-FITC 100 &micro ; g</td><td>eBioscience</td><td>11-0402-82</td><td>clone (HM40-3)</td></tr><tr><td>CD80 Anticorps monoclonal-APC 100 &micro ; g</td><td>eBioscience</td><td>17-0801-82</td><td>clone (16-10A-1)</td></tr><tr><td>CD86 Anticorps monoclonal-FITC&nbsp ; 100 &nbsp ; g</td><td>eBioscience</td><td>11-0862-82</td><td>clone (GL-1)</td></tr><tr><td>Centrifugeuse</td><td>Thermo Scientific</td><td>IEC CL31R Microscope confocal multi-vitesses</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Nikon</td><td>Nikon Microscope confocal C1</td><td></td></tr><tr><td>Tubes coniques 15 mL dia.17 x 120 mm</td><td>Citotest</td><td>4610-1865</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma</td><td>107K4034</td><td></td></tr><tr><td>D-Glucose</td><td>Merk</td><td>1.78343</td><td></td></tr><tr><td>Diméthylsulfoxyde de sulfoxyde</td><td>Anedra</td><td>6646</td><td></td></tr><tr><td>Sérum fœtal bovin 500 mL</td><td>Sigma-Aldrich&nbsp ; &nbsp ;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>12352207 Système de cytométrie en flux</td><td>BD Biosciences</td><td>BD FACSCanto&trade ; II</td><td></td></tr><tr><td>Cellule Zeta capillaire pliée&nbsp ;</td><td>Malvern Panalytical</td><td>DTS1070</td><td></td></tr><tr><td>Gentamicin</td> sulfate salt <td>Sigma</td><td>G1264</td><td></td></tr><tr><td>Solution de glutaraldéhyde</td><td>Fluka</td><td>49630</td><td></td></tr><tr><td>Hepes</td><td>Gibco</td><td>11344041</td><td></td></tr><tr><td>Aiguille hypodermique 21 G x 1"25/8</td><td>Weigao</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stérile Hypodermique&nbsp ; aiguille 25 G x 5/8"</td><td>Weigao</td><td></td><td>stérile</td></tr><tr><td>Microscope inversé&nbsp ;</td><td>Leica</td><td>DMIL LED Fluo&nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>Kétamine</td><td>Holliday</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lipopolysaccharide&nbsp ; 5 mg</td><td>Invitrogen</td><td>tlrl-rslps</td><td>LPS de la bactérie Gram-négative E. coli K12 . TLR2/4 Agonistes</td></tr><tr><td>Chlorhydrate de lopéramide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>5.08162</td><td></td></tr><tr><td>Moyen 199&nbsp ;</td><td>Gibco</td><td>11150059</td><td></td></tr><tr><td>Bleu de méthylène</td><td>Anedra</td><td>6337</td><td></td></tr><tr><td>CMH classe I (H2kb) Anticorps monoclonal-PE 100 & micro ; g</td><td>Clone eBioscience</td><td>12-5958-82</td><td>(AF6-88.5.5.3)</td></tr><tr><td>CMH de classe II (IA/IE) Anticorps monoclonal-FITC&nbsp ; 100 &nbsp ; g</td><td>eBioscience</td><td>11-5321-82</td><td>clone (M5/114.15.2)</td></tr><tr><td>Microscope</td><td>Olympus</td><td>CX31</td><td></td></tr><tr><td>Souris souris recombinante murine Flt3L.</td><td>PrepoTech</td><td>250-31L-10UG</td><td></td></tr><tr><td>Nanodrop</td><td>Thermo Scientific</td><td>ND-One</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldéhyde</td><td>Agar Scientific</td><td>R1018</td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline G sel de sodium</td><td>Sigma</td><td>P3032-10MU</td><td></td></tr><tr><td>PKH26</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MINI26</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate de potassium Timper</td><td></td><td></td> monobasique <td>pour phosphate tamponné Solution saline (PBS)</td></tr><tr><td>Tampon de lyse des globules rouges 100 mL</td><td>Roche</td><td>11814389001</td><td></td></tr><tr><td>milieu RPMI&nbsp ; 1640 1x 500 mL</td><td>Sigma-Aldrich (Gibco)</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>Cacodylate de sodium&nbsp ; &nbsp ;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0250</td><td></td></tr><tr><td>Chlorure de sodium</td><td>Anedra</td><td>7647-14-5</td><td>Pour solution saline tamponnée au phosphate (PBS)</td></tr><tr><td>Phosphate de sodium dibasique (anhydre) p. a.</td><td>Biopack</td><td>1639.07</td><td>Pour solution saline tamponnée au phosphate (PBS)</td></tr><tr><td>Sel de sulfate de streptomycine</td><td>Sigma</td><td>S9137</td><td></td></tr><tr><td>Seringue 10 mL</td><td>Bremen</td><td></td><td>Tubes stériles</td></tr><tr><td>en polycarbonate à paroi épaisse</td><td>Beckman Coulter</td><td></td><td>13 x 55 mm, capacité nominale 4 mL</td></tr><tr><td>Microscope électronique à transmission</td><td>Jeol</td><td>JEOL JSM 100CX II</td><td></td></tr><tr><td>Ultracentrifugeuse</td><td>Beckman</td><td>Optima LE-80k&nbsp ;</td><td>Rotor 90 Ti</td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Richmond</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Zetasizer Nano&nbsp ;</td><td>Malvern&nbsp ;</td><td>Nano ZSizer-ZEN3600</td><td>Pour effectuer des mesures de diffusion dynamique de la lumière et de potentiel zêta</td></tr></tbody></table>

isolement et absorption par des cellules dendritiques de petites vésicules extracellulaires d’echinococcus granulosus

Isolation And Dendritic Cell-Uptake of Small Extracellular Vesicles from Echinococcus granulosus

La figure 1 présente un organigramme résumant les principales étapes du maintien de cultures pures du stade larvaire d’E. granulosus, l’isolement et la caractérisation des sEV, ainsi que leur absorption par les cellules dendritiques murines. Pour obtenir une production élevée de sEV à partir des protoscoleces et des métacestodes d’E. granulosus, une méthode de culture in vitro précédemment développée en laboratoire a été utilisée pour maximiser la survie et l’homéo...

Isolement et absorption par des cellules dendritiques de petites vésicules extracellulaires d’Echinococcus granulosus

The secretion of extracellular vesicles by cestodes is crucial for enabling cellular communication not only among parasites but also with host tissues. In ...

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Recherche

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie et infection

Source : Watson, D. C., et.al. Isolement et purification évolutifs des vésicules extracellulaires d’Escherichia coli et d’autres bactéries. J. Vis. Exp. (2021)Cette vidéo démontre l’isolement et la concentration de vésicules extracellulaires (VE) dérivées de la membrane externe de bactéries génétiquement modifiées. Le processus implique la culture des bactéries pour libérer des VE, suivie d’étapes de centrifugation et de filtration séquentielles pour éliminer les cellules et les débris. Enfin,...

Isolement et enrichissement de vésicules extracellulaires dérivées de la membrane externe à partir de bactéries

Cette vidéo décrit une méthode basée sur la chromatographie d’exclusion stérique (SEC) pour isoler les vésicules extracellulaires ou EV dérivées des cellules immunitaires du cerveau, la microglie. Les VE agissent comme une cargaison moléculaire pour délivrer des médiateurs, qui régulent une réponse immunitaire. Par conséquent, les VE isolés peuvent être utilisés comme modèle in vitro pour étudier la diaphonie microglie-neurone au cours d’une réponse immunitaire neuronale.

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Et isoler immunocoloration des lymphocytes et des cellules dendritiques à partir des plaques de Peyer murin de

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Découvrez l'isolation et l'absorption des vésicules extracellulaires d'Echinococcus granulosus par les cellules dendritiques. Cette méthode révèle les mécanismes d'immunomodulation parasitaire et ouvre des perspectives pour le développement vaccinal.

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