Name: Purification efficace des polypeptides de type élastine (ELP) à partir d’E. coli en utilisant une méthode d’extraction et de précipitation à base de solvant organique (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-09T13:05:00.000+00:00
Duration: 6 min 30 s
Description: Découvrez une méthode rapide d'extraction par solvant organique pour purifier des polypeptides de type élastine (ELP) à partir d'Escherichia coli. Cette technique conserve l'activité des protéines de fusion et contrôle efficacement les endotoxines.

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<ol><li>Despanie, J., Dhandhukia, J. P., Hamm-Alvarez, S. F., MacKay, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastin-like+polypeptides%3A+therapeutic+applications+for+an+emerging+class+of+nanomedicines%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Elastin-like polypeptides: therapeutic applications for an emerging class of nanomedicines.</a> J Control Release. 240, 93-108 (2016).</li>
<li>MacEwan, S. R., Chilkoti, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+elastin-like+polypeptides+in+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Applications of elastin-like polypeptides in drug delivery.</a> J Control Release. 190, 314-330 (2014).</li>
<li>Jenkins, I. C., Milligan, J. J., Chilkoti, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+encoded+elastin-like+polypeptides+for+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Healthc+Mater%22%5BJournal%5D)">Genetically encoded elastin-like polypeptides for drug delivery.</a> Adv Healthc Mater. 10 (13), e2100209(2021).</li>
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<li>VerHeul, R., Sweet, C., Thompson, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+and+simple+purification+of+elastin-like+polypeptides+directly+from+whole+cells+and+cell+lysates+by+organic+solvent+extraction%5BTitle%5D)+AND+%22Biomater+Sci%22%5BJournal%5D)">Rapid and simple purification of elastin-like polypeptides directly from whole cells and cell lysates by organic solvent extraction.</a> Biomater Sci. 6 (4), 863-876 (2018).</li>
<li>Sweet, C., Aayush, A., Readnour, L., Solomon, K. V., Thompson, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+fast+organic+extraction-precipitation+method+for+improved+purification+of+elastin-like+polypeptides+that+is+independent+of+sequence+and+molecular+weight%5BTitle%5D)+AND+%22Biomacromolecules%22%5BJournal%5D)">Development of a fast organic extraction-precipitation method for improved purification of elastin-like polypeptides that is independent of sequence and molecular weight.</a> Biomacromolecules. 22 (5), 1990-1998 (1990).</li>
<li>Darji, S., Aayush, A., Estes, K. M., Strock, J. D., Thompson, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unravelling+the+mechanism+of+elastin-like+polypeptide-enzyme+fusion+stabilization+in+organic+solvents%5BTitle%5D)+AND+%22Biomacromolecules%22%5BJournal%5D)">Unravelling the mechanism of elastin-like polypeptide-enzyme fusion stabilization in organic solvents.</a> Biomacromolecules. 25 (1), 272-281 (2024).</li>
<li>Urry, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+chemistry+of+biological+free+energy+transduction+as+demonstrated+by+elastic+protein-based+polymers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Phys+Chem+B%22%5BJournal%5D)">Physical chemistry of biological free energy transduction as demonstrated by elastic protein-based polymers.</a> J Phys Chem B. 101 (51), 11007-11028 (1997).</li>
<li>Guo, Y., Liu, S., Jing, D., Liu, N., Luo, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+construction+of+elastin-like+polypeptides+and+their+applications+in+drug+delivery+system+and+tissue+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nanobiotechnology%22%5BJournal%5D)">The construction of elastin-like polypeptides and their applications in drug delivery system and tissue repair.</a> J Nanobiotechnology. 21, 418(2023).</li>
<li>Yi, A., Sim, D., Lee, S. -B., Sarangthem, V., Park, R. -W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+bioengineered+elastin-like+polypeptide-based+system+for+targeted+gene+delivery+in+tumor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biomater+Biosyst%22%5BJournal%5D)">Application of bioengineered elastin-like polypeptide-based system for targeted gene delivery in tumor cells.</a> Biomater Biosyst. 6, 100050(2022).</li>
<li>Clement, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+between+the+recombinant+expression+and+chemical+synthesis+of+a+short+cysteine-rich+insecticidal+spider+peptide%5BTitle%5D)+AND+%22J+Venom+Anim+Toxins+Trop+Dis%22%5BJournal%5D)">Comparison between the recombinant expression and chemical synthesis of a short cysteine-rich insecticidal spider peptide.</a> J Venom Anim Toxins Trop Dis. 21, 19(2015).</li>
<li>Miranda, L. P., Alewood, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+chemical+synthesis+of+peptides+and+small+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Accelerated chemical synthesis of peptides and small proteins.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96 (4), 1181-1186 (1999).</li>
<li>Eweje, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-assembling+protein+nanoparticles+for+cytosolic+delivery+of+nucleic+acids+and+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Self-assembling protein nanoparticles for cytosolic delivery of nucleic acids and proteins.</a> Nat Biotechnol. , (2025).</li>
<li>Hassouneh, W., Christensen, T., Chilkoti, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastin-like+polypeptides+as+a+purification+tag+for+recombinant+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Protein+Sci%22%5BJournal%5D)">Elastin-like polypeptides as a purification tag for recombinant proteins.</a> Curr Protoc Protein Sci. 6 (11), 1-16 (2010).</li>
<li>Yakhnin, A. V., Vinokurov, L. M., Surin, A. K., Alakhov, Y. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Green+fluorescent+protein+purification+by+organic+extraction%5BTitle%5D)+AND+%22Protein+Expr+Purif%22%5BJournal%5D)">Green fluorescent protein purification by organic extraction.</a> Protein Expr Purif. 14 (3), 382-386 (1998).</li>
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<li>Christensen, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fusion+order+controls+expression+level+and+activity+of+elastin-like+polypeptide+fusion+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Protein+Sci%22%5BJournal%5D)">Fusion order controls expression level and activity of elastin-like polypeptide fusion proteins.</a> Protein Sci. 18 (7), 1377-1387 (2009).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2-Mercaptoéthanol</td><td>Bio-Rad</td><td>161-0710</td><td>Composant SDS-PAGE</td></tr><tr><td>30 % d’acrylamide/bis-acrylamide</td><td>TCI</td><td>A3218</td><td>Composant SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Acétone</td><td>Fisher Scientific</td><td>A949</td><td>Solvant organique</td></tr><tr><td>Acétonitrile</td><td>Fisher Scientific</td><td>A996</td><td>Solvant organique</td></tr><tr><td>Ampiciline</td><td>Bio-Biotechnologie de l’or</td><td>A-301-25</td><td>Antibiotique</td></tr><tr><td>APS (Persulfate d’ammonium)</td><td>Bio-Rad</td><td>1610700</td><td>Composant SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Butanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>L13171</td><td>Solvant organique</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Bioréactifs de Fisher</td><td>BP118-500</td><td>Composant tampon de lyse</td></tr><tr><td>Éthanol</td><td>Laboratoires de décontamination</td><td>UN1170</td><td>Solvant organique</td></tr><tr><td>Acétate d’éthyle</td><td>Fisher Scientific</td><td>E195</td><td>Solvant organique</td></tr><tr><td>Glycérol</td><td>Produits de recherche International</td><td>G22020-0.5</td><td>Composant média Terrific Broth (TB)</td></tr><tr><td>Acide chlorhydrique</td><td>Fisher Scientific</td><td>A144SI-212</td><td>Composant tampon de lyse</td></tr><tr><td>Coloration instantanée de Coomasie</td><td>Abcam</td><td>ab119211</td><td>Composant SDS-PAGE</td></tr><tr><td>IPTG</td><td>Bio-Biotechnologie de l’or</td><td>12481C25</td><td>Composante d’expression protéique</td></tr><tr><td>Isopropanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>A451-1</td><td>Solvant organique</td></tr><tr><td>K2HPO4 (Monobase de phosphate de potassium)</td><td>Science des Wards</td><td>470302-246</td><td>Partie 2 Composant tampon</td></tr><tr><td>KH2PO4 (phosphate dibasique de potasse)</td><td>Science des Wards</td><td>470302-254</td><td>Partie 2 Composant tampon</td></tr><tr><td>L-Proline</td><td>Produits de recherche International</td><td>P5200-500.0</td><td>Composant média Terrific Broth (TB)</td></tr><tr><td>Lysozyme</td><td>Bio-Biotechnologie de l’or</td><td>L-040-1</td><td>Composant tampon de lyse</td></tr><tr><td>Méthanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>A452</td><td>Solvant organique</td></tr><tr><td>Tampon d’échantillonnage natif</td><td>Bio-Rad</td><td>161-0738</td><td>Composant SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Échelle des protéines</td><td>Bio-Biotechnologie de l’or</td><td>P008-500</td><td>Composant SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Tampon de gel de résolution</td><td>Bio-Rad</td><td>1610798</td><td>Composant SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Sodim Dodécylsulfate (SDS)</td><td>Thermo Scientific</td><td>J18220-36</td><td>Composant SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Hydroxyde de sodium</td><td>Fisher Scientific</td><td>S318-500</td><td>Composant tampon de lyse</td></tr><tr><td>Tampon gel d’empilement</td><td>Bio-Rad</td><td>1610799</td><td>Composant SDS-PAGE</td></tr><tr><td>TEMED</td><td>Bio-Rad</td><td>1610801</td><td>Composant SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Tris Base</td><td>Bioréactifs de Fisher</td><td>BP-152</td><td>Composant tampon de lyse</td></tr><tr><td>Tryptone</td><td>Produits de recherche International</td><td>T60065-1000.0</td><td>Composant média Terrific Broth (TB)</td></tr><tr><td>Extrait de levure</td><td>Produits de recherche International</td><td>Y20025-1000.0</td><td>Composant média Terrific Broth (TB)</td></tr></tbody></table>

purification efficace des polypeptides de type élastine (elp) à partir d’e. coli en utilisant une méthode d’extraction et de précipitation à base de solvant organique

Efficient Purification of Elastin-Like Polypeptides (ELPs) from E. coli Using an Organic Solvent-based Extraction and Precipitation Method

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Le criblage de différentes combinaisons de solvants organiques a démontré des efficacités d’extraction v...

Purification efficace des polypeptides de type élastine (ELP) à partir d’E. coli en utilisant une méthode d’extraction et de précipitation à base de solvant organique

Elastin-like polypeptides (ELP) are engineered biopolymers built from repetitive pentapeptide sequences that mimic motifs found in mammalian tropoelastin. ...

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Purification de Hsp104, une protéine Disaggregase

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Purification non chromatographique de polypeptides recombinants élastine et de leurs fusions avec des peptides et des protéines<em&gt; Escherichia coli</em

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