אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 1:29 דק׳ • March 4th, 2025
התחילו עם פרוסת מוח עשירה בנוירונים דופמינרגיים.
לדגור על הפרוסה ב- aCSF המכיל מוליכים עצביים כוזבים פלואורסצנטיים או FFN.
FFNs הם סמנים רגישים ל- pH המחקים דופמין ופלואורס בעוצמה רבה יותר בסביבות ניטרליות מאשר חומציות.
FFN אלה נכנסים באופן סלקטיבי לנוירונים דופמינרגיים ונטענת לתוך שלפוחיות סינפטיות חומציות, שם שינוי ה- pH מפחית פלואורסצנטיות של FFN.
העבירו פרוסה זו לתא הדמיה, הדקו אותה והמשיכו לנקב בעזרת aCSF כדי להסיר רכיבי FFN לא מאוגדים.
דמיינו את הפרוסה כדי לאשר הצטברות FFN כ-puncta פלואורסצנטי.
לאחר מכן, מקם אלקטרודה מגרה כדי לספק גירוי חשמלי.
הפולסים החשמליים גורמים לסידן להיכנס לנוירון, מה שגורם לאיחוי שלפוחית סינפטית עם הממברנה העצבית ולשחרור של FFN לתוך השסע הסינפטי החוץ-תאי.
בסביבת ה- pH הניטרלית של השסע הסינפטי, פלואורסצנטיות FFN מתגברת.
דמיינו שוב את הפרוסה כדי לצפות בפלואורסצנטיות מפוזרת בחלל החוץ תאי, המאשרת שחרור FFN משלפוחיות סינפטיות.