בדיקת סינון של מולקולות קטנות Nematicides: שיטת תפוקה בינונית לסינון נמטיקוטים פוטנציאליים נגד דיפסאצ'י דיפסאצ'י
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 3:48 דק׳ • July 8th, 2025
נמטודות טפיליות צמחיות כגון Ditylenchus dipsaci הן תולעים מיקרוסקופיות. התולעים החיות מציגות תנועות סינוסואידיות באמצעות התכווצויות שרירים, והתנועתיות שלהן היא גורם חשוב לבריאותן בתנאי תרבית.
חשיפה לקוטלי נמטיקה - חומרים רעילים כימיים, עלולה להפריע לתהליכים ביולוגיים מרכזיים, ולהשפיע על הניידות של נמטודות מתורבתות אלה, ולהוביל למותן.
כדי לסנן קוטלי נמטיקה של מולקולות קטנות, קח צלחת מרובת בארות המכילה מים מזוקקים. בעזרת כלי הצמדה נקי, העבירו את קוטלי הנמטיקה המולקולריים הקטנים הפוטנציאליים מלוח המלאי הכימי ללוחית הבדיקה כדי להבטיח העברה של כמויות עקביות של מולקולות לכל באר.
מחלקים מספר שווה של נמטודות לכל באר בצלחת. אטום את הצלחות תוך שמירה על תנאים לחים כדי לתמוך בהישרדות ובניידות של הנמטודות. דגרו את הצלחת בתסיסה קלה כדי למנוע תולעים להתיישב.
במהלך הדגירה, מולקולות קטנות רעילות שונות פועלות על תולעים והורגות אותן, בעוד שללא רעילות אין השפעה. התבונן בצלחת תחת מיקרוסקופ מנתח כדי לזהות את הבארות עם אוכלוסיית תולעים לא תנועה.
השלם את לוחות הבדיקה בתמיסת נתרן הידרוקסיד - ממריץ כימי בנקודת קצה. זה מפעיל את התנועה של כל תולעים במנוחה ומבדיל אותן ממתות.
נוכחותן של תולעים שאינן נעות לאחר טיפול בנתרן הידרוקסיד בבארות מסוימות מאשרת את יעילותן של מולקולות קטנות מתאימות כקוטלי נמטיקה.
להכנת לו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים