הדמיה של הפעלת קספז במקרופאגים שמקורם במונוציטים אנושיים

בתאי מערכת החיסון, קספאז-1, קספאז דלקתי, הוא מרכיב מרכזי המגיב למערכת החיסון וקיים בצורה לא פעילה. צורות לא פעילות אלו מורכבות מפרו-דומיין שהתמזג עם תחום קטליטי והופכות לפעילות באמצעות דימריזציה המושרה על ידי קרבה.

כדי לדמיין את הפעלת הקספאז in vivo, התחל בתרבית של מקרופאגים שמקורם במונוציטים אנושיים שעברו טרנספטציה המבטאים חלבונים פלואורסצנטיים אדומים וזוג חלבונים מדווחים על השלמה פלואורסצנטית. החלבונים המדווחים מכילים פרו-דומיין של קספאז-1 המאוחה עם מקטעים לא פלואורסצנטיים של חלבון ונוס, Venus-N או Venus-C.

טפל בתאים באמצעות מדיום הדמיה המכיל ליפופוליסכרידים - ממריץ דלקתי שמקורו בחיידקים, ואשלגן יונופורים - ניגריצין.

ליפופוליסכרידים מקיימים אינטראקציה עם קולטני זיהוי דפוסים על המקרופאגים, ומתחילים הרכבה של קומפלקס דלקתי.

מולקולות ניגריצין נכנסות לתא ונקשרות ליוני אשלגן, וגורמות לזרימתם לתווך החוץ-תאי ולהפחתת ריכוז יוני האשלגן התוך-תאי. זה מוביל להתחלה של חלבוני חיישן דלקתיים עם חלבוני מתאם - חלבון מגשר בין חלבון חיישן לפרוקספאז-1, היוצר את הקומפלקס.

הפרו-דומיינים המכילים שברי ונוס מקיימים אינטראקציה עם חלבוני המתאם של הקומפלקס. זה מביא את שני השברים בסמיכות, ומאלץ אותם להתחדש ולהאיר.

דמיין את התאים תחת מיקרוסקופ אפיפלואורסצנטי.

התאים הטרנספטנטיים נראים אדומים עם כתמי פלואורסצנטיו