אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 4:16 דק׳ • July 8th, 2025
קח מכשיר מיקרופלואידי המוצמד לשלב מיקרוסקופ, הכולל כניסה לחלוקת ריאגנטים, תעלות מחוברות זו לזו לזרימת נוזלים ושקעים לטיהור הנוזלים.
התעלה הראשית מכילה הגבלה מרכזית מדורגת עם מיקרו-חלקיקי ברזל מצטברים כלואים.
התעלות מודגרות בתמיסת חסימה למניעת קשירת נוגדנים לא ספציפיים.
הזרם מאגר כביסה, והסר תמיסת חסימה עודפת.
הציגו תרחיף אימונוקומפלקס בקצב זרימה מוגדר. הקומפלקס החיסוני מורכב מננו-חלקיקים מגנטיים, המצופים באנטיגנים הקשורים לנוגדנים ראשוניים, הקשורים עוד יותר לנוגדנים משניים מצומדים לפרוקסידאז.
להפעיל שדה מגנטי חיצוני, למגנט את המיקרו-חלקיקים המצטברים ולהפוך אותם למלכודת מגנטית ללכידת הקומפלקסים החיסוניים.
הכניסו מצע פלואורוגני המומר על ידי הפרוקסידאז לתוצר פלואורסצנטי וזורם דרך המלכודת.
באמצעות המיקרוסקופ, השווה את הקרינה לפני ואחרי המלכודת, ואשר את לכידת הקומפלקסים החיסוניים.
מלאו את התעלות במים מזוקקים בעזרת מזרק. טבלו את המכשיר באמבטיה אולטרסאונד למשך 10 דקות. לאחר מכן, רוקנו את המים בתוך תעלות המכשיר והשתמשו במזרק כדי להכניס תמיסת BSA של 5%.
הכן תרחיף של מיקרו-חלקיקי ברזל בקוטר 7.5 מיקרומטר ב-5% BSA. דגרו את השבב ואת תרחיף המיקרו-חלקיקים עם תמיסת החסימה למשך שעה לפחות בטמפרטורת החדר. לאחר מכן, הכנס את המיקרו-חלקיקים לשבב בעזרת מחט מזרק דרך צינור יציאת התעלה הצדדית.
הנח את השבב ב
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים