בידוד קפלים עצביים גולגולתיים מעובר אפרוח לצורך תרבית תאי קרסט עצבית

קח עובר אפרוח הנתמך בתוך מסגרת נייר פילטר ומקם אותו מתחת למיקרוסקופ מנתח.

הסר את קרום הוויטלין, ציפוי מגן המקיף את העובר.

זהה את הקפלים העצביים במוח התיכון הממוקמים מאחורי האונות האופטיות וקדמיים לסהר הלב, המבשר העוברי של הלב הבוגר.

הקפלים העצביים מכילים תאי פסגה עצבית טרום-נדידה, שהם תאי גזע רב-פוטנטיים שהופכים לתאים נודדים במהלך ההתפתחות.

תאים נודדים אלה מתמיינים לתאים עצביים ולא עצביים.

כרתו את ההיבט הגבי ביותר של הקפלים העצביים והעבירו את הרקמה לצלחת תרבית המכילה חיץ.

לאחר מכן, הניחו כיסויים מצופים בחלבון הידבקות בבארות צלחת תרבות המכילות מדיה.

העבירו את הקפלים העצביים אל הכיסויים המצופים. דגירה כדי להקל על הצמדת רקמות.

במהלך התרבות, תאי פסגה עצבית נודדים יוצאים מהקפלים העצביים על פני השטח המצופה, ויוצרים תרבית תאי פסגה עצבית.

העבירו עובר לכלי נקי המכיל תמיסת Pen-Strep של רינגר. העבירו בעדינות את העובר קדימה ואחורה כדי לנקות כל חלמון שמסתיר את הנוף, והחליפו את תמיסת ה-Pen-Strep של רינגר או העבירו אותו לכלי טרי אם הוא נעשה מעונן. מקם את הגב של העובר ואת צד המסגרת כלפי מעלה תחת מיקרוסקופ מנתח. השאירו את העובר על מסגרת הנייר כדי לשמור אותו מתוח ומוחזק במקומו.

לאחר מכן, הסר את קרום הוויטלין באמצעות מלקחיים כדי לחשוף את הקפלים העצביים. כלול רקמות זנב לשלפוחיות האופטיות המתרחבות ורוס