בידוד של סוגי תאים מרובים ממוח עכבר על ידי הומוגניזציה מכנית

0 צפיות3:27 דק' • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

התחל בהנחת רכיבי מטחנת הרקמות על קרח. מכשיר זה כולל מרגמה ושני עליים בקטרים שונים.

יוצקים מאגר מלח צונן לתוך המרגמה ואז מוסיפים רקמת מוח של עכבר.

המאגר שומר על איזון אוסמוטי, שומר על מבנה התא ותפקודו.

טוחנים את הרקמה במשיכות עדינות מרובות באמצעות עלי בקוטר קטן יותר, שגוזז מכנית את הרקמה לחתיכות קטנות יותר.

לאחר מכן, שבץ עם עלי בקוטר גדול יותר, מה שמקל על פירוק נוסף של הרקמה לתאים המרכיבים אותה.

מעבירים את התערובת לצינור וצנטריפוגה.

הסר את ה-supernatant.

מוסיפים חוצץ מלח צונן ומערבולת כדי לשבור את גושי התאים ואת המיאלין.

לאחר מכן, הוסף מדיום שיפוע צפיפות וצנטריפוגה.

בשל הבדלים בצורה ובמסה, תאים ישקעו בשכבה התחתונה, ואילו פסולת ומיאלין מצטברים בשכבה העליונה.

השליכו את הסופרנטנט.

הוסף פתרון מתאים לקבלת תרחיף מרובה תאים לשימוש נוסף.

להומוגניזציה של רקמות, הוסף 3 מיליליטר של HBSS מקורר מראש למכתש הזכוכית המצוננת מראש של מטחנת רקמות Dounce, והעביר את מחצית אחד המוח שנקטף לטיט. השרו בעדינות את הרקמה עם 10 משיכות של עלי A, ולאחר מכן 10 משיכות של עלי B, והעבירו את התערובת ההומוגנית לצינור חרוטי חדש של 15 מיליליטר.

מלאו את הצינור לנפח סופי של 10 מיליליטר עם HBSS מקורר מראש לצנטריפוגה והשעו את הגלולה ב-7 מיליליטר של HBSS טרי עם מערבולת לפני החזקת הדגימה על קרח. להסרת פסולת, הוסף 3 מיליליטר של תמיסה איזוטונית מקוררת מראש לכל דגימה מעוכלת או הומוגנית, ומערבל בעדינות את הדגימות כדי לוודא שהן מעורבבות בצורה הומוגנית.

לאחר מכן, צנטריפוגה את הדגימות והסירו בזהירות את הדיסק הלבנבן של פסולת ומיאלין הצף על פני התמיסה. כאשר הפסולת הושלכה, אספו את כל המיקרוליטרים מלבד 100 המיקרוליטרים האחרונים של הסופרנטנט מכל צינור מבלי להפריע לכדורים. יש להשעות מחדש כל גלולה ב-1 מיליליטר של תמיסת FACS/BL להעברה לצינורות מיקרו-צנטריפוגה בודדים של 1.5 מיליליטר.

לאחר הצנטריפוגה עם תמיסת החלקיקים, חשוב להסיר את דיסקת הפסולת ואת הסופרנטנט בזהירות רבה, מבלי לעקור את כדורית התא, כדי למנוע אובדן דגימה.

לאחר הצנטריפוגה, שאפו בזהירות את הסופרנטנט מכל צינור והשעו מחדש את הכדורים ב-350 מיקרוליטר של FACS/BL טרי לכל צינור.

09:49

בידוד של אזור-מיקרוגליה ספציפי מתוך חצי הכדור השני של המוח העכבר עבור רצפי RNA של תא יחיד בודד

סרטונים קשורים

0 צפיות

04:53

בידוד של מיקרוגליה ראשונית של עכבר על ידי מיון תאים המופעלים מגנטית במודלים של בעלי חיים של Demyelination

סרטונים קשורים

0 צפיות

06:52

שיטת "חליבת המוח" לבידוד תאי גזע עצביים ותאי אב אוליגודנדרוציטים מחולדות חיות

סרטונים קשורים

0 צפיות

04:11

בידוד תאים חד-גרעיניים ממוח עכבר: טכניקת צנטריפוגה של שיפוע צפיפות לבידוד תאים חד-גרעיניים שוכני מוח

סרטונים קשורים

0 צפיות

03:48

בידוד תאי מיקרוגליה מקליפת המוח של מוח עכבר בוגר

סרטונים קשורים

0 צפיות

10:21

אפיון ובידוד של העכבר מיקרוגלייה העיקרי על ידי צנטריפוגה הדרגתיות צפיפות

סרטונים קשורים

0 צפיות

10:24

אפיון מרובה של סוגי תאים שאוחזרו ממוח העכבר/חוט השדרה דרך שיטות הומוקות שונות

סרטונים קשורים

0 צפיות

06:49

שיטת פלט גבוהה כדי לבודד קרום הלב של מוחין מהעכבר

סרטונים קשורים

0 צפיות

07:14

דיסוציאציה מכנית ואנזימטית משולבת של רקמת היפוקמפל במוח העכבר

סרטונים קשורים

0 צפיות

07:10

כימות שינויים גלובליים בהיסטון לאחר תרגום באמצעות ציטומטריית זרימה תוך-גרעינית במיקרוגליה מבודדת במוח עכבר

סרטונים קשורים

0 צפיות

עודכן לאחרונה: 1 אוגוסט 2026