שיטה ללא טיהור חלבונים של קביעת זיקה מחייבת ידי thermophoresis Microscale

30.6K צפיות

צוטט 54 פעמים

10:22 דק׳

15 באוגוסט 2013

10.3791/50541-v

15 באוגוסט 2013

30.6K צפיות

Lyuba Khavrutskii¹^,² , Joanna Yeh¹ , Olga Timofeeva³ , Sergey G. Tarasov⁴ , Samuel Pritt¹ , Karen Stefanisko¹ , Nadya Tarasova¹

¹Cancer and Inflammation Program, National Cancer Institute, ²Basic Science Program, SAIC-Frederick, Inc., ³Departments of Oncology and Radiation Medicine, Georgetown University Medical Center, ⁴Structural Biophysics Laboratory, National Cancer Institute

thermophoresis microscale (MST) יכול להיות בשימוש נרחב לקביעת זיקה מחייבת ללא טיהור של חלבון המטרה מlysates התא. הפרוטוקול כולל ביטוי יתר של החלבון ה-GFP-התמזגו, תמוגה תא שבאינו denaturing תנאים, וזיהוי של אות MST בנוכחות ריכוזים שונים של ליגנד.